生物化学分子生物学实验技巧题

综合试卷第=PAGE1*2-11页（共=NUMPAGES1*22页） 综合试卷第=PAGE1*22页（共=NUMPAGES1*22页）PAGE①姓名所在地区姓名所在地区身份证号密封线1.请首先在试卷的标封处填写您的姓名，身份证号和所在地区名称。2.请仔细阅读各种题目的回答要求，在规定的位置填写您的答案。3.不要在试卷上乱涂乱画，不要在标封区内填写无关内容。一、选择题1.生物化学实验中，常用于蛋白质定量分析的方法是：

a.荧光分光光度法

b.电泳法

c.色谱法

d.紫外可见光谱法

2.下列哪种酶催化反应的底物为ATP：

a.丙酮酸激酶

b.磷酸化酶

c.脱氧核糖核酸酶

d.氨基酸激酶

3.下列哪种物质是蛋白质变性的标志：

a.氨基酸组成变化

b.等电点变化

c.分子量变化

d.结构和功能改变

4.下列哪种物质不是脂质：

a.脂肪

b.磷脂

c.胆固醇

d.蛋白质

5.下列哪种酶催化反应为不可逆反应：

a.蛋白酶

b.核酸酶

c.脱氢酶

d.氧化酶

6.下列哪种生物分子在DNA复制中起关键作用：

a.RNA聚合酶

b.DNA聚合酶

c.转录酶

d.翻译酶

7.下列哪种物质在蛋白质翻译过程中起作用：

a.tRNA

b.rRNA

c.mRNA

d.蛋白质

8.下列哪种生物分子在DNA复制中起作用：

a.ATP

b.NAD

c.GTP

d.NADP

答案及解题思路：

1.答案：d.紫外可见光谱法

解题思路：紫外可见光谱法是生物化学实验中常用的蛋白质定量分析方法，通过测定蛋白质在特定波长下的光吸收值来定量。

2.答案：a.丙酮酸激酶

解题思路：丙酮酸激酶催化ATP与磷酸化酶之间的反应，产生ADP和无机磷酸盐。

3.答案：d.结构和功能改变

解题思路：蛋白质变性通常指的是蛋白质的结构和功能发生改变，如热变性、酸碱变性等。

4.答案：d.蛋白质

解题思路：脂质包括脂肪、磷脂和胆固醇，而蛋白质不属于脂质。

5.答案：c.脱氢酶

解题思路：脱氢酶催化脱氢反应，通常为不可逆反应。

6.答案：b.DNA聚合酶

解题思路：DNA聚合酶在DNA复制过程中起关键作用，负责合成新的DNA链。

7.答案：a.tRNA

解题思路：tRNA在蛋白质翻译过程中将氨基酸转运到核糖体上。

8.答案：a.ATP

解题思路：ATP在DNA复制过程中提供能量。二、填空题1.蛋白质变性过程中，其二级结构发生改变。

2.脂质是生物体中储能和结构的主要成分。

3.DNA复制过程中，DNA聚合酶的作用是催化脱氧核苷酸之间的聚合反应。

4.蛋白质合成过程中，tRNA的作用是转运氨基酸到核糖体上，与mRNA上的密码子配对。

5.下列哪种酶催化反应为不可逆反应：DNA聚合酶。

答案及解题思路：

答案：

1.二级

2.储能、结构

3.催化脱氧核苷酸之间的聚合反应

4.运输氨基酸到核糖体上，与mRNA上的密码子配对

5.DNA聚合酶

解题思路：

1.蛋白质变性主要涉及蛋白质的二级结构，如α螺旋和β折叠，而三级结构涉及整个蛋白质的三维形状。

2.脂质在生物体中扮演储能和结构角色，如脂肪储存能量，磷脂构成细胞膜。

3.DNA聚合酶在DNA复制过程中负责将单个脱氧核苷酸添加到新合成的DNA链上，这一过程是DNA复制的核心。

4.tRNA在蛋白质合成中起关键作用，它将氨基酸带到核糖体上，并与mRNA上的密码子进行配对，保证正确的氨基酸被加入到蛋白质链中。

5.DNA聚合酶催化的DNA复制反应是不可逆的，因为新合成的DNA链一旦形成，就会稳定存在，而不会自发解聚回单个核苷酸。三、判断题1.蛋白质变性后，其生物活性消失。（）

2.脂质在生物体中主要起储能和结构作用。（）

3.DNA复制过程中，DNA聚合酶催化DNA合成。（）

4.蛋白质合成过程中，tRNA将氨基酸转运到核糖体上。（）

5.下列哪种物质在DNA复制中起作用：NAD。（）

答案及解题思路：

1.（√）蛋白质变性是指蛋白质在某些物理或化学因素作用下，其特定的空间构象被破坏，从而导致其理化性质改变和生物活性丧失。但变性并不一定导致蛋白质的完全失活，有时部分生物活性可能依然存在。

2.（√）脂质在生物体中确实主要起储能和结构作用。例如脂肪是生物体中主要的储能物质，而磷脂是细胞膜的主要结构成分。

3.（√）在DNA复制过程中，DNA聚合酶负责催化DNA链的合成。这是DNA复制过程的关键酶之一。

4.（√）在蛋白质合成过程中，tRNA（转运RNA）负责将氨基酸转运到核糖体上，以合成多肽链。

5.（×）在DNA复制过程中，起作用的物质是NAD的前体NADPH和ATP，而不是NAD。NADPH在DNA复制过程中提供还原力，而ATP提供能量。NAD主要参与氧化还原反应。四、简答题1.简述蛋白质变性过程中，其结构和功能的变化。

解答：

蛋白质变性是指蛋白质在某些物理或化学因素作用下，其特定的空间构象被破坏，从而导致其理化性质改变和生物活性丧失的过程。在蛋白质变性过程中，其结构和功能的变化

结构变化：蛋白质的二级、三级和四级结构被破坏，原有的氢键、离子键、疏水作用等非共价键断裂，导致蛋白质从有序的卷曲状态变为无序的伸展状态。

功能变化：蛋白质的功能依赖于其特定的空间结构，变性后蛋白质失去了原有的功能，如酶的催化活性降低或丧失，抗原性改变等。

2.简述脂质在生物体中的作用。

解答：

脂质在生物体中扮演着多种重要角色，包括：

能量储存：脂肪是生物体内主要的能量储存形式，可以通过氧化分解提供能量。

细胞膜结构：磷脂是细胞膜的主要成分，维持细胞膜的流动性和选择性。

信息传递：某些脂质如固醇类物质参与细胞信号传递，调节细胞生长和分化。

绝缘和保护：脂肪组织提供机械保护，减少器官间的摩擦，同时起到保温作用。

3.简述DNA复制过程中，DNA聚合酶的作用。

解答：

在DNA复制过程中，DNA聚合酶的作用包括：

引物合成：DNA聚合酶在复制起始点合成一段短的单链RNA引物，为DNA合成提供起始点。

聚合作用：DNA聚合酶从5'到3'方向合成新的DNA链，通过加入与模板链互补的核苷酸，形成新的DNA链。

3'至5'外切酶活性：DNA聚合酶具有3'至5'外切酶活性，可以去除错误掺入的核苷酸，保证DNA复制的准确性。

4.简述蛋白质合成过程中，tRNA的作用。

解答：

在蛋白质合成过程中，tRNA（转运RNA）的作用包括：

遗传密码解读：tRNA携带特定的氨基酸，其反密码子与mRNA上的密码子互补配对，解读遗传密码。

氨基酸转运：tRNA将氨基酸从细胞质中的氨基酸库转运到核糖体，供蛋白质合成使用。

蛋白质合成起始：某些tRNA（如tRNA^fMet）在蛋白质合成的起始阶段发挥关键作用。

5.简述不可逆反应与可逆反应的区别。

解答：

不可逆反应与可逆反应的区别

不可逆反应：反应进行到底，反应物完全转化为产物，没有逆反应发生，如蛋白质变性、酯的水解等。

可逆反应：反应物和产物可以相互转化，达到动态平衡，如水的电离、酸碱中和等。

答案及解题思路：

答案：

1.蛋白质变性破坏其特定空间结构，导致功能丧失。

2.脂质在生物体中作用包括能量储存、细胞膜结构、信息传递和绝缘保护。

3.DNA聚合酶在DNA复制中合成引物、聚合新链并具有校正功能。

4.tRNA在蛋白质合成中解读遗传密码、转运氨基酸并参与起始过程。

5.不可逆反应无逆反应，可逆反应存在动态平衡。

解题思路：

1.分析蛋白质变性的定义和过程，结合结构变化和功能变化进行解答。

2.列举脂质在生物体中的具体作用，如能量储存、细胞膜构成等。

3.结合DNA复制的基本过程，描述DNA聚合酶的具体作用。

4.解释tRNA在蛋白质合成中的作用，包括遗传密码解读和氨基酸转运。

5.区分不可逆反应和可逆反应的定义和特点，明确两者的区别。五、计算题1.已知某蛋白质的相对分子量为20000，求其分子量。

2.某脂质分子含有18个碳原子，求其分子量。

3.某DNA片段的长度为1kb，求其碱基对数。

4.某蛋白质含有200个氨基酸，求其分子量。

5.某DNA分子含有1000个碱基对，求其分子量。

答案及解题思路：

1.解题思路：蛋白质的相对分子量与其实际分子量的换算关系通常是通过摩尔质量来实现的。假设蛋白质的相对分子量为20000，则其摩尔质量（分子量）可以通过以下公式计算：

\[分子量（g/mol）=相对分子量\times氨基酸的平均摩尔质量\]

氨基酸的平均摩尔质量大约为110g/mol。因此：

\[分子量=20000\times110=2200000\text{g/mol}\]

2.解题思路：脂质分子的分子量可以通过计算其组成元素（主要是碳、氢、氧）的摩尔质量之和来得到。假设脂质分子只含有碳和氢，没有氧，那么分子量计算

\[分子量=18\times12\text{（碳的摩尔质量）}18\times1\text{（氢的摩尔质量）}\]

\[分子量=21618=234\text{g/mol}\]

3.解题思路：DNA的长度通常以碱基对（bp）为单位。1kb（千碱基对）等于1000碱基对。因此，DNA片段的碱基对数为：

\[碱基对数=1000\text{bp}\]

4.解题思路：蛋白质的分子量可以通过氨基酸的摩尔质量乘以氨基酸的数量来计算。假设每个氨基酸的平均摩尔质量为110g/mol，那么蛋白质的分子量为：

\[分子量=200\times110=22000\text{g/mol}\]

5.解题思路：DNA分子的分子量可以通过碱基对数乘以每个碱基对的平均摩尔质量来计算。假设每个碱基对的平均摩尔质量为650g/mol，那么DNA分子的分子量为：

\[分子量=1000\times650=650000\text{g/mol}\]

：六、论述题1.论述蛋白质变性过程中，其结构和功能的变化对生物体的影响。

a.蛋白质变性过程及其机制

b.蛋白质变性对生物体的影响

1.生理功能受损

2.抗体功能下降

3.蛋白质降解和代谢障碍

2.论述脂质在生物体中的作用及其对生物体的影响。

a.脂质的结构与分类

b.脂质在生物体中的作用

1.能量储存与供应

2.细胞膜的构成与维持

3.激素的作用与调节

c.脂质对生物体的影响

1.脂代谢异常导致的疾病

2.脂质氧化产生的自由基对细胞损伤

3.论述DNA复制过程中，DNA聚合酶的作用及其对生物体的影响。

a.DNA复制的过程与机制

b.DNA聚合酶的作用

1.DNA模板的识别与结合

2.合成新的DNA链

3.校对与修复

c.DNA聚合酶对生物体的影响

1.DNA复制准确性的保证

2.染色体遗传信息的稳定

4.论述蛋白质合成过程中，tRNA的作用及其对生物体的影响。

a.蛋白质合成过程概述

b.tRNA的结构与功能

1.抗氨基酸特异性

2.结合与转运氨基酸

3.核酸序列识别

c.tRNA对生物体的影响

1.蛋白质合成准确性的保证

2.生物体生长发育的关键作用

5.论述不可逆反应与可逆反应的区别及其对生物体的影响。

a.不可逆反应与可逆反应的定义

b.区别

1.反应速度

2.反应程度

3.平衡状态

c.对生物体的影响

1.代谢途径的选择

2.生物体生理功能的调节

答案及解题思路：

1.答案：

a.蛋白质变性是蛋白质分子空间结构发生改变，导致其生理功能丧失的过程。

b.蛋白质变性对生物体的影响包括：生理功能受损、抗体功能下降、蛋白质降解和代谢障碍。

解题思路：首先描述蛋白质变性的过程及其机制，然后列举蛋白质变性对生物体的影响。

2.答案：

a.脂质分为脂肪、磷脂和固醇类。

b.脂质在生物体中的作用包括：能量储存与供应、细胞膜的构成与维持、激素的作用与调节。

c.脂质对生物体的影响包括：脂代谢异常导致的疾病、脂质氧化产生的自由基对细胞损伤。

解题思路：先介绍脂质的结构与分类，然后分别论述脂质在生物体中的作用及其对生物体的影响。

3.答案：

a.DNA复制过程包括：解旋、配对、合成、校对与修复。

b.DNA聚合酶的作用包括：DNA模板的识别与结合、合成新的DNA链、校对与修复。

c.DNA聚合酶对生物体的影响包括：DNA复制准确性的保证、染色体遗传信息的稳定。

解题思路：概述DNA复制过程，然后介绍DNA聚合酶的作用及其对生物体的影响。

4.答案：

a.蛋白质合成过程包括：转录、翻译、折叠。

b.tRNA的结构与功能包括：抗氨基酸特异性、结合与转运氨基酸、核酸序列识别。

c.tRNA对生物体的影响包括：蛋白质合成准确性的保证、生物体生长发育的关键作用。

解题思路：概述蛋白质合成过程，然后介绍tRNA的作用及其对生物体的影响。

5.答案：

a.不可逆反应是指在反应过程中反应物向物的转化是不可逆的；可逆反应是指在反应过程中反应物向物的转化是可逆的。

b.不可逆反应与可逆反应的区别包括：反应速度、反应程度、平衡状态。

c.对生物体的影响包括：代谢途径的选择、生物体生理功能的调节。

解题思路：首先定义不可逆反应与可逆反应，然后阐述二者的区别，最后论述对生物体的影响。七、实验题1.实验目的

观察蛋白质变性现象。

2.实验原理

通过改变蛋白质的溶解度，观察其结构和功能的变化。

3.实验材料

蛋白质样品、尿素、盐酸、氢氧化钠等。

4.实验步骤

a.配制不同浓度的尿素溶液；

b.将蛋白质样品分别加入不同浓度的尿素溶液中；

c.观察蛋白质在不同浓度尿素溶液中的溶解度和功能变化。

5.实验目的

观察脂质在生物体中的作用。

6.实验原理

通过观察脂质在细胞膜形成中的作用，了解其在生物体中的作用。

7.实验