2025年核酸检验面试试题及答案

核酸检验面试试题及答案姓名：____________________

一、选择题（每题2分，共20分）

1.下列哪种方法不属于核酸提取的常用方法？

A.磷酸盐缓冲液法

B.离心法

C.沉淀法

D.紫外线照射法

2.下列哪种酶用于PCR反应中扩增DNA？

A.聚合酶

B.核酸酶

C.蛋白酶

D.磷酸酶

3.下列哪种试剂用于核酸杂交实验？

A.磷酸盐缓冲液

B.丙烯酰胺

C.醋酸铵

D.DNA探针

4.下列哪种方法可以检测DNA序列中的突变？

A.Southernblot

B.Northernblot

C.DNA测序

D.Westernblot

5.下列哪种方法可以检测RNA病毒？

A.PCR

B.ELISA

C.Westernblot

D.IFA

6.下列哪种核酸提取方法最适用于细胞核提取？

A.CTAB法

B.Trizol法

C.CTAB/CTAB法

D.CTAB/SDS法

7.下列哪种方法可以检测RNA的完整性？

A.Northernblot

B.Southernblot

C.DNA测序

D.RT-PCR

8.下列哪种方法可以检测DNA的完整性？

A.Northernblot

B.Southernblot

C.DNA测序

D.RT-PCR

9.下列哪种方法可以检测病毒载量？

A.PCR

B.ELISA

C.Westernblot

D.IFA

10.下列哪种方法可以检测细菌的核酸？

A.PCR

B.ELISA

C.Westernblot

D.IFA

二、填空题（每题2分，共20分）

1.核酸提取的常用方法包括__________、__________、__________等。

2.PCR反应的四个步骤分别是__________、__________、__________、__________。

3.核酸杂交实验中，常用的探针类型有__________、__________、__________。

4.Southernblot实验中，常用的标记方法有__________、__________、__________。

5.DNA测序的原理是__________、__________、__________。

6.ELISA实验中，常用的酶联反应底物有__________、__________、__________。

7.IFA实验中，常用的荧光标记有__________、__________、__________。

8.PCR实验中，常用的引物设计原则有__________、__________、__________。

9.核酸提取的步骤包括__________、__________、__________、__________。

10.核酸杂交实验的步骤包括__________、__________、__________、__________。

三、简答题（每题5分，共25分）

1.简述PCR反应的原理和步骤。

2.简述DNA测序的原理和步骤。

3.简述核酸提取的常用方法及其原理。

4.简述核酸杂交实验的原理和步骤。

5.简述ELISA实验的原理和步骤。

四、论述题（每题10分，共20分）

1.论述核酸检测在传染病防控中的重要作用。

2.论述PCR技术在分子生物学研究中的应用。

五、计算题（每题10分，共20分）

1.若某基因片段长度为1000bp，设计引物时，引物长度为20bp，求引物之间的距离应为多少？

2.若某DNA片段的浓度为1ng/μl，体积为100μl，求该DNA片段的摩尔浓度是多少？

六、综合应用题（每题10分，共20分）

1.某实验室需要从一份含有多种病毒样本中检测一种特定病毒，请简述如何利用PCR技术进行病毒检测。

2.某研究人员在研究一种肿瘤基因的表达情况，已知该基因长度为2000bp，请简述如何利用RT-PCR技术检测该基因的表达水平。

试卷答案如下：

一、选择题答案及解析思路：

1.D（紫外线照射法不属于核酸提取的常用方法，其他选项均为提取方法）

2.A（聚合酶用于PCR反应中扩增DNA，其他选项为其他类型的酶）

3.D（DNA探针用于核酸杂交实验，其他选项为其他类型的试剂）

4.C（DNA测序可以检测DNA序列中的突变，其他选项为其他检测方法）

5.A（PCR可以检测RNA病毒，其他选项为其他检测方法）

6.A（CTAB法适用于细胞核提取，其他选项为其他提取方法）

7.A（Northernblot可以检测RNA的完整性，其他选项为其他检测方法）

8.B（Southernblot可以检测DNA的完整性，其他选项为其他检测方法）

9.A（PCR可以检测病毒载量，其他选项为其他检测方法）

10.A（PCR可以检测细菌的核酸，其他选项为其他检测方法）

二、填空题答案及解析思路：

1.磷酸盐缓冲液法、CTAB法、Trizol法

2.变性、退火、延伸、延伸

3.DNA探针、RNA探针、寡核苷酸探针

4.同位素标记、荧光标记、酶联标记

5.核苷酸链的合成、碱基配对、链延伸

6.3,3'-二氨基联苯胺（TMB）、4-甲基伞形酮（4-MU）、对硝基苯磷酸（pNPP）

7.异硫氰酸荧光素（FITC）、四甲基异硫氰酸罗丹明（TRITC）、藻红蛋白（PE）

8.保守性、特异性、简并性

9.样本处理、裂解、沉淀、纯化

10.样本处理、杂交、洗涤、显影

三、简答题答案及解析思路：

1.PCR反应的原理是利用DNA聚合酶在特定条件下复制DNA片段，步骤包括变性、退火、延伸和延伸。

2.DNA测序的原理是利用DNA聚合酶在特定条件下合成新的DNA链，并通过电泳分离和读取碱基序列，步骤包括模板制备、引物设计、PCR扩增、测序和数据分析。

3.核酸提取的常用方法包括CTAB法、Trizol法和SDS法，原理是通过裂解细胞、沉淀核酸和纯化核酸来提取。

4.核酸杂交实验的原理是利用核酸探针与目标核酸序列互补配对，步骤包括标记探针、杂交、洗涤和检测。

5.ELISA实验的原理是利用抗原抗体反应检测目标蛋白，步骤包括包被、洗涤、加样、洗涤、加酶联抗体、洗涤、显色和读数。

四、论述题答案及解析思路：

1.核酸检测在传染病防控中的重要作用包括快速、准确地诊断传染病、监测病毒载量、评估疫情趋势和制定防控策略。

2.PCR技术在分子生物学研究中的应用包括基因克隆、基因表达分析、基因突变检测、基因编辑和基因治疗。

五、计算题答案及解析思路：

1.引物之间的距离=基因片段长度/引物长度=1000bp/20bp=50bp

2.摩尔浓度=物质的量/溶液体积=1ng/(6.022x10^23molecules/mol)/100μl=1.65x10^-1