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文档简介

紫外-可见分光光度法的基本原理紫外-可见分光光度法紫外-可见分光光度法的基本原理1.透光率与吸收度

I0＝Ia+It+Ir

I0＝Ia+It

透射光强度It与入射光强度I0的比值称为透光率或透光度T。透光率的负对数为吸光度A。紫外-可见分光光度法的基本原理

概念：以波长λ为横坐标、吸光度A为纵坐标所描绘的曲线称为吸收光谱曲线，简称吸收光谱。特点：在相同条件下，同一物质的不同浓度的溶液，其吸收光谱曲线相似，且λmax相同。这是定性分析的基础。

A480520560nm

max=5152.吸收光谱曲线

紫外-可见分光光度法的基本原理3.光的吸收定律

当一束平行的单色光通过均匀、无散射的含有吸光性物质的溶液时，在入射光的波长、强度及溶液的温度等条件不变的情况下，该溶液的吸光度A与溶液的浓度c及液层厚度L的乘积成正比，即A＝K·L·c，称为光的吸收定律（朗伯-比尔定律）。光的吸收定律是定量分析的理论依据。紫外-可见分光光度法的基本原理

朗伯-比尔定律不仅适用于可见光，而且也适用于紫外光和红外光；不仅适用于均匀、无散射的溶液，而且也适用于均匀、无散射的固体和气体。实验证明，溶液对光的吸光度具有加和性。如果溶液中同时存在两种或两种以上的吸光性物质，则测得的该溶液的吸光度等于溶液中各吸光性物质吸光度的总和，即：

A（a+b+c）＝Aa＋Ab＋Ac

3.光的吸收定律

紫外-可见分光光度法的基本原理4.吸光系数

（1）摩尔吸光系数：在入射光波长一定时，溶液浓度为1mol/L，液层厚度为1cm时所测得的吸光度称为摩尔吸光系数，常用ε表示，其量纲为L/（mol·cm）。（2）比吸光系数：在入射光波长一定时，溶液浓度为1g/L，液层厚度为1cm时的吸光度称为吸收系数，常用α表示，其量纲为L/(g·cm)。（3）百分吸光系数：在入射光波长一定时，溶液浓度为1%（g/100ml）、液层厚度为1cm时所测得的吸光度称为百分吸光系数，常用表示，其量纲为100ml/（g·cm）根据上述定义，摩尔吸光系数和吸收系数、百分吸光系数之间的换算关系是：紫外-可见分光光度法的基本原理例

用氯霉素（相对分子质量为323.15）纯品配制100ml含2.00mg的溶液，以1.00cm厚的吸收池在278cm波长处测得其透光率为24.3％，试计算氯霉素在278cm波长处的摩尔吸光系数和百分吸光系数。解：已知M＝323.15g/mol，ρ＝2.00×10-3%，T＝24.3%。求氯霉素在278cm波长处的摩尔吸光系数ε和比吸光系数。∵

∴[100ml/（g·cm）]

L/(mol·cm)4.吸光系数

紫外-可见分光光度法的基本原理5.偏离光的吸收定律的主要因素

化学因素：(1)吸光性物质溶液的浓度(2)吸光性物质的化学变化(3)溶剂的影响光学因素：(1)非单色光

(2)杂散光

(3

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