药物分析57课件

药物分析第八章维生素类药物分析达·伽马（VascodaGama，1460年-1524年12月24日），出生于葡萄牙锡尼什，葡萄牙航海家、探险家，早期殖民主义者。他是从欧洲绕好望角到印度航海路线的开拓者，其开辟的航路促进了欧、亚商业关系的发展。1497年，达伽马的160船员中100名因坏血病死亡1593年，英国海军一年中高达1万多人患坏血病18世纪，英国医生伦达发现柠檬可治疗坏血病1924年，英国科学家齐佛从柠檬汁中提取到维生素C1932年匹茨堡大学两名学者从柠檬汁中分离并证明维生素C1933年瑞士科学家用葡萄糖为原料合成出维生素C目录CONTENTS维生素A维生素E维生素B1维生素C1324维生素C（Vitamin

C）又称L-抗坏血酸，在化学结构上和糖类十分相似，有两个手性碳原子，4种光学异构体，其中以L-构型右旋体的生物活性最强。《中国药典》（2015年版）收载维生素C、维生素C片剂、维生素C泡腾片、维生素C泡腾颗粒、维生素C注射剂、维生素C颗粒剂。一、结构与性质（一）化学结构维生素C分子中具有二烯醇结构和内酯环。

维生素C（L-抗坏血酸）

（二）主要理化性质

1.外观性状：为白色结晶或结晶性粉末；无臭，味酸；久置色渐变微黄。

溶解性：本品在水中易溶，在乙醇中略溶，在三氯甲烷或乙醚中不溶。

2.旋光性结构中有两个手性碳原子（C4、C5），具有旋光性，其中L-(+)-维生素C活性最强。3.酸性维生素C分子结构中C3上的羟基受共轭效应的影响，酸性较强（pK1=4.17）；C2上的羟基酸性极弱（pK2=11.57），故维生素C一般表现为一元酸，可与碳酸氢钠作用生成钠盐。4.还原性分子结构中的连二烯醇基具有极强的还原性，易被氧化剂氧化为去氢维生素C，加氢又可还原为维生素C。在碱性溶液或强酸性溶液中，去氢维生素C可进一步水解生成二酮古洛糖酸而失去活性，此反应为不可逆反应。5.水解性维生素C和碳酸钠作用可生成单钠盐，不致发生水解，因双键使内酯环变得较稳定；但在强碱中，内酯环可水解，生成酮酸盐。6.糖类的性质维生素C的化学结构与糖类似，具有糖的性质和反应。7.紫外吸收特性由于维生素C分子结构中具有共轭双键，其稀盐酸溶液在243nm波长处有最大吸收，为560，可用于鉴别和含量测定。二、鉴别（一）与硝酸银及2,6靛酚的反应（原料药）1.测定方法取本品0.2g，加水10ml溶解后，分成2等份，在一份中加硝酸银试液0.5ml，即生成银的黑色沉淀；在另一份中，加二氯靛酚钠试液1～2滴，试液的颜色即消失。2.解析维生素C分子中有二烯醇的结构，具有极强的还原性。加硝酸银试液0.5ml，即生成银的黑色沉淀加二氯靛酚钠试液1～2滴，试液的颜色即消失（二）薄层色谱法鉴别（片剂、注射剂）测定方法：取本品细粉适量（约相当于维生素C10mg），加水10ml，振摇使维生素C溶解，滤过，取滤液作为供试品溶液；另取维生素C对照品，加水溶解并稀释制成1ml中约含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（通则0502）试验，吸取上述两种溶液各2μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以乙酸乙酯-乙醇-水（5∶4∶1）为展开剂，展开，晾干，立即（1h内）置紫外光灯（254nm）下检视。供试品溶液所显主斑点的位置和颜色应与对照品溶液的主斑点相同。（三）与其他氧化剂反应（注射剂）测定方法：取本品，用水稀释制成1ml中含维生素C10mg的溶液，取4ml，加0.1mol/L的盐酸溶液4ml，混匀，加0.05%亚甲蓝乙醇溶液4滴，置40℃水浴中加热，3min内溶液应由深蓝色变为浅蓝色或完全褪色。解析：维生素C还可以被亚甲蓝、高锰酸钾、碱性酒石酸铜试液、磷钼酸等氧化剂氧化为去氢抗坏血酸，同时可以使其试剂褪色，产生沉淀或呈现颜色。三、检查《中国药典》（2015年版）规定维生素C要检查重金属、细菌内毒素、炽灼残渣、溶液的澄清度与颜色、草酸、铁和铜等。（一）溶液的澄清度与颜色测定方法：取本品3.0g，加水15ml，振摇使溶解，溶液应澄清无色；如显色，将溶液经4号垂熔玻璃漏斗滤过，取滤液，照紫外-可见分光光度法（通则0401），在420nm的波长处测定吸光度，不得过0.03。解析：维生素C及其制剂在贮存期间易变色，且颜色随贮存时间的延长而逐渐加深。这是因为维生素C的水溶液不稳定，在高于或低于pH5～6时，易受空气、光线和温度的影响，分子中的内酯环经水解、脱羧、脱水生成糠醛聚合呈色。现行版《中国药典》采用紫外-可见分光光度法，通过测定吸光度来控制有色杂质的限量。

（二）草酸

测定方法：取本品0.25g，加水4.5ml，振摇使维生素C溶解，加氢氧化钠试液0.5ml、稀醋酸1ml与氯化钙试液0.5ml，摇匀，放置1h，作为供试品溶液；另精密称取草酸75mg，置500ml量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取5ml，加稀醋酸1ml与氯化钙试液0.5ml，摇匀，放置1h，作为对照溶液。供试品溶液产生的浑浊不得浓于对照溶液（0.3%）。解析：草酸是维生素C的代谢产物之一，过多的草酸可能在人体内造成结石，通过比浊法控制维生素C中草酸的限量，可增加药物的安全性。

（三）铁、铜测定方法：原子吸收分光光度法。解析：由于微量的铁盐和铜盐会加速维生素C的氧化、分解。四、含量测定（一）碘量法（原料药、片剂、注射剂）1.测定方法取本品约0.2g，精密称定，加新沸过的冷水100ml与稀醋酸10ml使溶解，加淀粉指示液1ml，立即用碘滴定液（0.05mol/L）滴定，至溶液显蓝色并在30s内不褪。每1ml碘滴定液（0.05mol/L）相当于8.806mg的C6H8O6。含C6H8O6不得少于99.0%。2.解析操作中加入稀醋酸使滴定在酸性溶液中进行，在酸性介质中维生素C受空气中的氧氧化速度减慢，但供试品溶于稀酸后仍需立即滴定。使用新煮沸过的冷水溶解供试品可减少水中溶解的氧对测定的干扰。片剂中所加入的辅料对测定有干扰，应先溶解后再滤过，取续滤液进行测定。注射剂在处方中加入抗氧剂焦亚硫酸钠，而焦亚硫酸钠易水解生成亚硫酸氢钠，消耗一定量的碘滴定液，对测定结果有影响，故在滴定前加入2ml丙酮排除干扰。3.含量计算（1）原料药：式中，V为消耗碘滴定液的体积（ml）；F为碘滴定液的浓度校正因子；T为滴定度（mg/ml）；m为供试品的取样量（g）。（2）片剂：式中，V为消耗碘滴定液的体积（ml）；F为碘滴定液的浓度校正因子；T为滴定度（mg/ml）；W（3）注射剂：式中，