尿液其它化学成分检验徐文鑫课件

尿液其它化学成分检验徐文鑫省级精品在线开放课程《临床检验基础》尿化学成分检验PH蛋白质葡萄糖酮体胆红素尿胆原亚硝酸盐血红蛋白白细胞酯酶维生素C本周蛋白肌红蛋白微量清蛋白含铁血黄素HCG一、尿本周蛋白检验

本周蛋白尿（BJP）实质为免疫球蛋白轻链或轻链的二聚体从尿中排出。其特性为将尿液在PH4.5~5.5，加热至56度出现白色混浊及凝固，继续加热至90~100度后混浊消失或明显减退，再冷却至56度时又可重新凝固，又称凝溶蛋白。蛋白电泳时可在α2~γ球蛋白区带间的某个部位出现M区带。一、尿本周蛋白检验1.检验方法及评价

热沉淀反应法：灵敏度低（0.3~2.0g/L），假阴性率高，少使用。

对甲苯磺酸沉淀法：操作简便，灵敏度较高（3mg/L）；不与清蛋白反应；当尿球蛋白＞5g/L时，可出现假阳性，为筛检试验。

电泳法或免疫法：阳性率达97%；能检出κ、λ轻链，检测快、灵敏度和精确度高、稳定性好；确证试验。2.质量保证（热沉淀反应法）①待检者：检测前明确用药史，使用利福平类抗结核药时可出现假阳性；②标本：新鲜、足量，及时送检；混浊尿应离心取上清液进行试验；若为蛋白尿，应先用加热乙酸法沉淀蛋白质，趁热过滤后检测；高浓度本周蛋白在90度不易完全溶解，需做阴性对照或将标本稀释；③PH：低于PH4.0时，分子聚合受到抑制而致假阴性；一、尿本周蛋白检验3.临床意义

①约50%的多发性骨髓瘤及15%的巨球蛋白血症病人出现本周蛋白，为重要诊断依据之一。

②慢性淋巴细胞白血病、淋巴瘤及肾淀粉样病变人也可出现本周蛋白。

一、尿本周蛋白测定

肌红蛋白（Mb）是含有一条珠蛋白肽链和一个亚铁血红素的蛋白质，其结构及特性与血红蛋白相似，但仅有一条肽链，分子量为1.745万，与氧可逆性结合，为肌肉组织供能。当有肌损伤时，肌红蛋白进入血循环，因分子量较小，易通过肾小球滤过，而排入尿中。二、尿肌红蛋白测定

1.测定方法及评价

化学法：

Mb可溶于80%硫酸铵溶液中，其血红素具有类过氧化氢酶样活性，隐血试验呈阳性。简便、经济、敏感度高，为Mb的过筛试验。

分光光度法：灵敏度低。

单克隆抗体免疫法：方便、快速、灵敏、特异，已成为测定Mb的主要方法。

其它方法二、尿肌红蛋白测定

二、尿肌红蛋白质测定2.质量保证

标本：新鲜，以免发生假阴性；需保存标本，宜碱化后冷藏。

防止假阴性：宜将硫酸铵缓慢加入尿中，轻微振荡，防止假阴性。3.临床意义

创伤：挤压综合征、电击伤、烧伤、手术创伤等。严重者可引起肾衰。

缺氧、缺血：心梗。中毒、全身感染、恶性高热和低钾血症导致全身性缺氧与微循环障碍。

阵发性肌红蛋白尿：剧烈运动

其它：原发性肌红蛋白尿症和家族性肌病、肌炎综合征、进行性肌营养不良。

清蛋白是血浆蛋白的主要成分，为单链多肽，清蛋白带负电荷，不容易通过肾小球，尿中含量极微（5~30mg/24h）。早期的肾小球病变，清蛋白的排泄率即有所增加。常规定性方法尚不能检出，只有通过更为敏感的方法才可检测到尿中清蛋白含量的变化。能早期敏感地反映肾小球功能的损害。三、尿微量清蛋白测定1.测定方法及评价①免疫比浊法：临床上常用方法。操作简便，敏感度及特异性较高。但受尿中其它混浊性杂质的干扰，并且当清蛋白浓度超过抗体浓度时不易得到可靠结果。

抗原抗体在特殊缓冲液中快速形成抗原抗体复合物，反应液出现浊度。当保持反应液抗体过量时，形成的复合物随抗原量增加而增加，反应液浊度也随之增高，其结果与标准品对照，即可计算出待检成分的含量。三、尿微量清蛋白测定2.质量保证

待检者：宜在清晨或安静状态下收集尿液，剧烈运动后会增高。

抗血清：宜在4度密封保存，不可反复冻融，每次更换试剂应重做标准曲线。

操作：检验前需将尿液离心。

结果报告方式：晨尿法：每升尿排出量（mg/L）；定时留尿法：计算单位时间内的排泄率（mg/24h），推荐24h尿清蛋白总量；随机尿法：测定清蛋白同时测定尿肌酐，用肌酐比值报告排出率。

三、尿微量清蛋白测定3.临床意义

①早期肾小球损害的筛检：糖尿病、高血压、重金属及药物中毒性肾病病人，清蛋白排泄率的增加可出现于其它指示变化之前。持续出现微量清蛋白尿时，提示病人处于发展为糖尿病肾病的早期；当排泄量持续大于300mg/24h后，诊断为糖尿病肾病。

②超敏反应性紫癜的肾小球功能监测

③其它：尿路感染时，尿清蛋白排泄率轻度升高；某些特发性水肿病人尿清蛋白排泄率也高于健康人。三、尿微量清蛋白测定

经肠道吸收的脂肪皂化后成乳糜液，由于种种原因致淋巴引流不畅而未能进入血循环，以至逆流致泌尿系统淋巴管中时，可致淋巴管内压升高、曲张破裂、乳糜液流入尿中，使尿流呈不同程度的乳白色，严重者似乳法称乳糜尿。如在乳糜液尿中混有血液时称为血性乳糜尿。尿中乳糜的程度与病人摄入脂肪量、淋巴管破裂程度及运动强度因素有关。乳糜烂尿中主要含卵磷脂、胆固醇、脂酸盐及少量纤维蛋白原、白蛋白等。如合并泌尿道感染，则可出现乳糜脓尿。四、乳糜尿测定四、乳糜尿测定1.测定方法及评价四、乳糜尿测定有机溶剂萃取染色法：乳糜，是脂肪微粒组成，呈白色外观，于尿液中加入乙醚充分振荡后，与原尿相比，如乳浊程度明显减轻则可确诊，因所含脂肪性成分为乙醚所溶解。于乳糜尿中加入苏丹Ⅲ染液置显微镜下观察。如见大小不等之桔红色球形小体则为阳性。此法简便易行，过小的脂滴着色后肉眼不易观察，可在显微镜下观察。2.质量保证

乳糜尿与脓尿或严重的结晶尿的鉴别要点为后二者离心沉淀后上清液呈澄清状而沉渣显微镜检查可见多数白细胞或无定形磷酸盐结晶（加热、加酸后溶解），而乳糜尿于离心沉淀后外观不变，丝虫病引起者，偶在沉渣到微丝蚴。

定性检查阳性，应镜检找微丝蚴四、乳糜尿测定3.临床意义

①淋巴管阻塞,常见于丝虫病。丝虫在淋巴系统中引起炎症反复发作,大量纤维组织增生,使腹部淋巴管或胸导管广泛阻塞,由于肾的淋巴最脆弱,故易于肾盂及输尿管处破裂,出现乳糜尿。如为丝虫症引起的,可在尿沉渣中于显微镜下见到微丝蚴.②先天淋巴畸形、腹骨结核、肿瘤压迫等也可以出现乳糜尿。胸腹创伤、手术伤及腹腔淋巴管或胸导管也可出现乳糜尿,但少见。③过度疲劳、妊娠及分娩后、糖尿病脂血症、肾盂肾炎、包虫病、疟疾等也偶见乳糜尿。四、乳糜尿测定含铁血黄素尿（hemosiderinuria,Hd）为尿中含有的不稳定、棕色或暗黄色、颗粒状的铁蛋白聚合体。当血管内溶血时，在部分Hb在尿中排出，而有一部分Hb被肾小管上皮细胞重吸收，并在细胞内分解成含铁血黄素，随细胞脱落由尿中排出。当细胞分解时含铁血黄素释放到尿中，可用铁染色检出。五、尿含铁血黄素测定1.测定方法及评价Rous试验：含铁血黄素中的铁离子，在酸性环境中与亚铁氰化钾作用，产生蓝色的亚铁氰化铁沉淀，显微镜下可见蓝色闪光颗粒，即普鲁士蓝反应。操作简便。但可能因颗粒太小，普通光学显微镜无法看到，引起假阴性。五、尿含铁血黄素测定2.临床意义

尿中出现含铁血黄素意义与血红蛋白类似，阳性见于慢性血管内溶血，如阵发性睡眠性Hb尿症和行军性肌红蛋白尿、自身免疫溶血性贫血、严重肌肉疾病等。有时如因尿中Hb量少，隐血试验阴性时可进一步检测是否有含铁血黄素。另外在溶血初期虽有Hb尿,但因HB尚未被肾上皮细胞摄取，因而未形成含铁血黄素，所以本试验可呈阴性。五、尿含铁血黄素测定

成熟女性因受精的卵子移动到子宫腔内着床后，形成胚胎，在发育成长为胎儿过程中，胎盘合体滋养层细胞产生大量的人绒毛膜促性腺激素（humanchorionicgonadotropin,HCG），可通过孕妇血液循环而排泄到尿中。HCG由一条α多肽链和一条β多肽链组成，而β多肽链为HCG特有，故临床上常通过β-HCG来反映HCG的变化。

当妊娠1-2.5周，血清和尿中的HCG水平即可迅速升高，第8孕周达到高峰，至孕期第4个月始降至中等水平，并一直维持到妊娠末期。HCG主要存在于孕女的血液、尿液、羊水中，主要用于早期妊娠的诊断及滋养层细胞肿廇的诊断及疗效观察。六、尿HCG测定

胶乳凝集抑制试验

单克隆双抗体酶免疫法

单克隆抗体胶体金标免疫层析法

六、尿HCG测定1.测定方法及评价操作简便、价格便宜、快速、试剂易得。但灵敏低，特异性不高而趋淘汰灵敏度高，可半定量，临床常用，适合批量检测。操作复杂，所需时间长简便快速，特异性强，灵敏度高，可半定量，在受精后7-10天就可作出诊断，临床应用广泛

放射免疫

电化学发光免疫法

检孕卡法

六、尿HCG测定1.测定方法及评价灵敏度高，可定量，多用于血液HCG测定灵敏度低，可用于早孕诊断灵敏度高，特异性强，稳定，准确，但易污染，适用于研究工作，临床不常用2.质量保证

标本：宜采集新鲜晨尿；留尿前勿大量饮水。不能使用严重蛋白尿、血尿、菌尿标本进行检测。

操作：试带浸入尿液中，同时加做阴性、阳性对照，并做原浓度和2倍稀释的尿液测定，均为阳性才可报告阳性。

报告方式：可定性，可定量。

六、尿HCG测定3.参考区间

妊娠不同时期以及各孕妇之间血清HCG绝对值变化大，一般非孕妇女血HCG＜100IU/L，妊娠期间血清HCG水平见表。六、尿HCG测定妊娠周数HCG（IU/L）0.2-15-501-250-5002-3100-50003-4500-100004-51000-500005-610000-1000006-815000-200000六、尿HCG测定3.临床意义①诊断早期妊娠：7-14d尿液当中可测出HCG。②异常妊娠与胎盘功能的判断：

异位妊娠：如宫外孕时，本试验只有60%的阳性率，在子宫出血3天后，HCG仍可为阳性，故HCG检查可作为与其它腹症的鉴别。HCG常为312-625IU/L。

流产诊断与治疗：不完全流产如子宫内尚有胎盘组织残存，HCG检查仍可呈阳性；完全流产或死胎时HCG由阳性转阴性，因此可作为保胎或吸宫治疗的参考依据。

先兆流产：如尿中HCG仍维持高水平多不会发生难免流产。如HCG在2500IU/L以下，并逐渐下降，则有流产的或死胎的可能，当降至600IU/L则难免流产。在保胎治疗中，如HCG仍继续下降说明保胎无效，如HCG不断上升，说明保胎成功。

在产后4天或人工流产术后13天，血清HCG应低于1000IU/L，产后9天或人工流产术后25天，血清HCG应恢复正常。如不符合这一情况，则应考虑有异常可能。六、尿HCG测定③滋养细胞肿瘤诊断与治疗监测：

葡萄胎、恶性葡萄胎、绒毛膜上皮癌及睾刃畸胎瘤等患者尿中HCG显著升高，可达10万到数百万IU/L，可用稀释试验诊断如妊娠12周以前1：500稀释尿液呈阳性，妊娠12周以后1：250稀释尿