药品微生物检验技术 课件 模块二 项目七 过敏反应的测定

《药品微生物检验技术》模块二药品安全性检查项目七过敏反应的测定

任务一豚鼠的挑选与饲养

任务二右旋糖酐铁注射液过敏反应的测定

目录项目七过敏反应的测定

任务一豚鼠的挑选与饲养

任务引入请思考

过敏反应检查系将一定量的供试品溶液注入豚鼠体内，间隔一定时间后静脉注射供试品溶液进行激发，观察动物出现过敏反应的情况，以判定供试品是否引起动物全身过敏反应。

动物的质量是试验的重要影响因素之一。豚鼠的挑选与饲养有什么特殊要求呢?相关知识-过敏反应

一、过敏反应概念

过敏反应又称变态反应，是身体对一种或多种物质的不正常反应，而这些物质对大多数人是无害的。其主要起因是患者体内产生了过多的特殊抗体，称免疫球蛋白(Ig)。它可以和环境中的致敏物质(变应原)如粉尘、食物、药物、寄生虫等起反应，刺激机体过量产生、释放某些化学物质，引起组织损伤或生理功能紊乱，继而产生各种症状。二、过敏反应检查的原理

将一定量的供试品溶液注入豚鼠体内致敏，间隔一定时间后再静脉注射供试品溶液进行激发，观察动物出现过敏反应的情况，以判定供试品能否引起全身过敏反应。任务实施一、制订工作计划序号工作内容完成时间成员负责人1试验前准备

2豚鼠的挑选

3豚鼠的饲养

根据任务要求，制定合理工作进度计划，并根据小组成员的特点进行分工。任务实施二、试验前准备设备、器材规格数量用途天平

豚鼠称重豚鼠固定器、支架

固定豚鼠饲养箱、饲料、食盆、垫材

豚鼠饲养装置任务实施

供试用的豚鼠应同来源、同品系。挑选时，首先要检查豚鼠的身体是否健康完好。检查豚鼠的眼睛是否有眼屎，鼻子是否流鼻涕。如果有眼屎或者流鼻涕的情况，那么就不能选择。同时，用手触摸豚鼠的身体，检查耳朵、四肢是否完好，是否出现过骨折等情况。检查豚鼠的牙齿是否伸到外面，如果有，表示豚鼠的牙齿咬合不正常，也不能选择。仔细检查豚鼠身体上是否有寄生虫或者脓包等，检查豚鼠是否有掉毛的情况。如果有，表示豚鼠身体不健康，也不能选择。在挑选豚鼠时，可以适当地挑逗豚鼠，以便观察豚鼠的性格，以及行走的步态否正常。

供试用的豚鼠应健康合格，饲养条件保持一致，体重为250～350g,试验称重前自然饱腹，雌鼠应无孕。在试验前和试验过程中，均应按正常饲养条件饲养。做过本试验的豚鼠不得重复使用。三、豚鼠的挑选要求任务实施1.饲养箱：豚鼠专用饲养箱只有一层，开口在上方。饲养时内部必须铺上木屑、锯末等，且必须经常打扫，更换垫材。饲养箱要足够宽敞，避免豚鼠因运动量不足而发胖，以及出现精神紧张等问题，多只饲养时更是如此。存放地点注意避开猫、狗，避免日光直射和风吹雨淋，注意通风。2.食盆：食盆应避免选择塑料或其他会被啃食的材料。应当选择陶瓷或者不锈钢质地，有一定分量而不容易被打翻的食盆。3.饮水：为了保持饲养箱内的干燥，建议使用舔食方式的给水器。4.垫材：垫材的作用是吸收排泄物的水分和异味，让豚鼠觉得舒适。可以选用木屑、锯末、干草、碎布等，猫砂也是很好的选择。四、豚鼠的饲养任务实施

豚鼠比较胆小，容易受惊，在抓取等过程中要稳、准和迅速，防止强烈刺激使豚鼠受惊。抓取幼小的豚鼠，只需要双手捧起来即可；抓取已经成年的豚鼠时，先用手掌扣住鼠背，然后用拇指和食指环握住豚鼠的颈部，并抓住豚鼠的肩胛骨上方，切忌力度过大导致豚鼠无法呼吸，另一只手托住豚鼠臀部。如果在操作过程中，豚鼠挣扎剧烈，可以用纱布将豚鼠头部蒙住，把豚鼠置于实验台上，稍微用力按住豚鼠，然后进行操作。

固定豚鼠时，只需抓取豚鼠放入豚鼠固定器中即可，或将豚鼠背部朝下，固定在木板上。五、豚鼠的抓取与固定任务实施六、豚鼠挑选原始记录动物品种来源数量性别体重毛色是否健康无外伤状态是否活泼饲养环境室温：℃相对湿度：%检验人员日期任务测评考核内容考核标准配分得分试验前准备能判断试验需要的设备、器材是否准备好15豚鼠的挑选与饲养能按要求正确挑选豚鼠15能正确饲养豚鼠15豚鼠的抓取与固定能正确抓取豚鼠15能正确使用固定器固定豚鼠15豚鼠的称量能按要求对豚鼠进行体重称量15清场能按要求完成清场10合计100项目七过敏反应的测定

任务二右旋糖酐铁注射液过敏反应的测定

任务引入请思考

右旋糖酐铁注射液适用于不能口服铁剂或口服铁剂治疗效果不良的缺铁患者，可肌内、静脉注射或静脉滴注。右旋糖酐铁注射液的主要不良反应为过敏反应，可在给药后的几分钟内发生，因此需要对其进行过敏反应检查。

某药企生产了一批右旋糖酐铁注射液，根据《中国药典》2020年版要求需要进行过敏反应检查。将供试品注入豚鼠体内，间隔一定时间后静脉注射供试品溶液进行激发，观察动物出现过敏反应的情况，以判定供试品是否引起动物全身过敏反应。任务分析(1)致敏的途径应尽可能模拟临床给药途径。

(2)按照《中国药典》2020年版的规定，确定右旋糖酐铁注射液的检验数量、检验量，保证供试品抽样的客观性，完成供试品检查。在规定时间内观察动物有无过敏反应症状，判断供试品是否合格。相关知识-过敏反应检查

一、过敏反应检查

豚鼠过敏属于I型过敏反应，过敏反应检查是一个经典的动物过敏性试验。此型过敏反应发生迅速，具有严格的特异性以及明显的个体差异特点。过敏反应过程中肥大细胞、嗜碱性粒细胞等细胞释放多种血管活性介质，作用于靶器官，引起特有症状。本试验主要观察豚鼠的过敏反应现象，重复性好，稳定，过敏现象明显，方法简单。相关知识-过敏反应检查

二、过敏反应检查的目的及适用范围

某些生物制品(如各器官提取物、植物及微生物的提取物等)的制备过程中，常可能混入一些具有抗原性的异性蛋白杂质；一些化学药品的组成成分中也可能包含具抗原性的物质(如低分子右旋糖酐)。临床使用这些制剂时，容易导致患者出现多种过敏反应，轻者皮肤出现红斑或丘疹，严重者甚至出现窒息、发绀、血管神经性水肿、血压下降、休克和死亡。

因此，对那些有可能存在变应原的药品，应按要求进行过敏反应的检查，以确保产品质量和用药的安全性。任务实施一、制订工作计划序号工作内容完成时间成员负责人1供试豚鼠的挑选

2试验前准备

3供试品的检查

4结果判断根据任务要求，制定合理工作进度计划，并根据小组成员的特点进行分工。任务实施二、试验前准备设备、器材、试剂规格数量用途洁净室

操作场所天平

豚鼠称重棉球

止血75%乙醇

擦拭消毒无菌注射器

注射供试品右旋糖酐铁注射液

供试品注射用水、氯化钠注射液或其他规定的溶剂

稀释供试品豚鼠固定器、支架

固定豚鼠饲养箱、饲料、食盆、垫材

豚鼠饲养装置任务实施三、试验操作步骤操作内容供试品的制备取右旋糖酐铁注射液稀释成每1mL中含2mg(按Fe计)的溶液，配制供试品溶液的过程应无菌操作豚鼠的挑选取6只豚鼠，用天平称量体重，标记豚鼠并记录给药致敏注射：上述6只豚鼠，隔日每只每次经腹腔注射供试品溶液0.5mL,共注射3次激发注射：再次称量豚鼠体重，将上述豚鼠分成2组，每组3只，分别在首次注射的第14天和第21天静脉注射供试品溶液1mL,进行激发观察记录观察激发后30min内动物有无过敏反应症状结果判断静脉注射供试品溶液30min内，不得出现过敏反应。如果同一只动物出现竖毛、发抖、干呕、连续喷嚏3声、连续咳嗽3声、紫癜和呼吸困难等现象中的2种或2种以上，或出现大小便失禁、步态不稳或倒地、抽搐、休克、死亡现象之一，判定供试品不符合规定任务实施四、检查报告检品名称生产厂家检品规格生产批号检品数量包装和外观有效期检查项目过敏反应检查检查依据《中国药典》2020年版第四部通则1147任务实施四、检查报告检查方法实验动物来源实验动物数量实验动物性别实验动物平均体重检验结果：记录静脉注射供试品溶液30min内，豚鼠有无明显过敏反应检验结论：检验人

复核人

室温

相对湿度

检验日期：

续表：任务测评考核内容考核标准配分得分豚鼠的挑选能按要求正确挑选豚鼠5能判断选用的豚鼠是否符合要求5试验前准备能判断试验需要的设备、器材、试剂是否准备好5能将与供试品接触的试验用器皿进行