2025年湘教新版选择性必修3生物下册阶段测试试卷含答案

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A.过程①注射相应抗原后应立即从小鼠脾脏中提取细胞甲B.过程②诱导细胞融合，利用了细胞膜的选择透过性C.过程③、④的筛选方法相同，细胞丙、丁遗传物质相同D.过程⑤无论在体内还是体外进行，细胞丁都可大量增殖2、甲乙两种远缘植物体细胞融合会导致一方的染色体被排出；若甲细胞的染色体在融合前断裂，形成的染色体片段在细胞融合后可能不会被全部排出，未排出的染色体片段可以整合到另一个细胞的染色体上而留存在杂种细胞中。依据该原理，将抗黑胫病的黑芥与不抗黑胫病的甘型油菜进行体细胞杂交获得了抗黑胫病的甘型油菜新品种，过程如下图所示。下列说法错误的是（）

A.④过程用到了植物组织培养技术B.抗黑胫病的甘型油菜染色体上整合了黑芥的染色体片段C.②紫外线照射剂量不同会导致黑芥染色体断裂程度不同D.可利用聚乙二醇或灭活的病毒诱导两种植物原生质体融合3、生物技术安全性和伦理问题是社会关注的热点，下列叙述错误的是（）A.要靠确凿的证据和严谨的逻辑来思考转基因技术的影响B.设计试管婴儿实质是选择性移植体外受精形成的胚胎，应予以禁止C.基因筛检可能帮助人类及早预防某些遗传性疾病，但也会引发基因歧视问题D.利用转基因技术制造的新型致病菌可能让大批受感染者突然发病而又无药可医4、基因工程产物可能存在着一些安全性问题，但不必担心的是（）A.四倍体转基因鲤鱼与正常鲤鱼的杂交，导致自然种群被淘汰B.载体的标记基因（如抗生素抗性基因）可能指导合成有利于抗性进化的产物C.目的基因（如杀虫基因）本身编码的产物可能会对人体产生毒性D.目的基因通过花粉的散布转移到其他植物体内，从而可能打破生态平衡5、血清白蛋白是血液的重要组成成分，具有运输物质、抗凝血等生理功能。临床上人血清白蛋白主要作为血浆容量扩充剂广泛应用于出血性休克、烧伤、癌症和白蛋白过少症的治疗。研究人员利用农杆菌转化法将人血清白蛋白基因导入水稻胚乳细胞中，成功培育出能产生人血清白蛋白的转基因水稻。下列分析错误的是（）A.在构建基因表达载体时，常用同种限制酶对含人血清白蛋白基因的DNA片段和Ti质粒进行酶切B.人血清白蛋白基因应插在启动子和终止子之间C.利用PCR技术扩增人血清白蛋白基因时，将温度调整到90℃以上的目的是使DNA变性D.水稻胚乳细胞中能检测到人血清白蛋白基因及相应的RNA，说明转基因水稻培育成功6、某同学选用新鲜成熟的葡萄制作果酒和果醋，下列相关叙述正确的是（）A.果酒发酵时，每日放气需迅速，避免空气回流入发酵容器B.果酒发酵时，用斐林试剂检测葡萄汁中还原糖含量变化，砖红色沉淀逐日增多C.果醋发酵时，发酵液产生的气泡量明显少于果酒发酵时D.果醋发酵时，用重铬酸钾测定醋酸含量变化时，溶液灰绿色逐日加深7、下列关于果酒、果醋、腐乳和泡菜制作的叙述，正确的是（）A.制作泡菜的微生物是一种需氧型细菌B.制作果醋的乳酸菌，属于严格的厌氧型微生物C.家庭制作果酒、果醋和腐乳通常都不是纯种发酵D.利用酵母菌酿酒时，发酵时间越长，酵母菌产生酒精的速率就越快8、细胞中的DNA分子复制过程中，新合成的链始终沿着5'端向3端延伸，因此一条链的合成是连续的，另一条链是不连续的（如下图）。下列叙述错误的是（）

A.图中DNA分子是边解旋边进行复制的B.图中不连续片段需通过磷酸二酯键连接C.新合成的两条子链（A+T）/（G+C）相同D.PCR过程中有一条链的合成也是不连续的9、下列哪种生物技术能有效地打破物种的界限，定向改造生物，培育新的农作物优良品种（）A.基因工程育种B.诱变育种C.杂交育种D.单倍体育种评卷人得分二、多选题(共7题，共14分)10、根据某基因上游和下游的碱基序列；设计合成了用于该基因PCR的两段引物（单链DNA）。引物与该基因变性DNA（单链DNA）结合为双链DNA的过程称为复性。下图是两引物的Tm（引物熔解温度，即50%的引物与其互补序列形成双链DNA分子时的温度）测定结果，以下分析正确的是（）

A.两引物分别与DNA的两条互补单链结合，是子链延伸的起点B.PCR过程中，复性温度应低于引物的Tm值以提高PCR效率C.若两引物的脱氧核苷酸数相同，推测引物2的（G＋C）含量较高D.适当减少引物2的脱氧核苷酸数，可使其Tm值接近引物111、下列有关哺乳动物胚胎发育和胚胎工程的叙述，错误的是（）A.克隆羊、试管羊、转基因羊的繁殖方式都是有性生殖B.胚胎干细胞在饲养层细胞上培养可维持只增殖不分化状态C.受精时防止多精入卵的两屏障是顶体反应和卵细胞膜反应D.滋养层细胞在囊胚期发育成胎膜和胎盘并可用于性别鉴定12、某种病毒的主要表面抗原为S蛋白，用S蛋白制备的单克隆抗体可用于该种病毒的检测。下列说法正确的是（）

A.B淋巴细胞分离自经S蛋白免疫过的小鼠B.稀释培养后多孔玻璃板中的杂交瘤细胞数目可能不到细胞总数的一半C.集落①的细胞既能无限增殖又能产生单克隆抗体D.集落②～④的细胞可用于扩大化培养生产单克隆抗体13、杜泊羊因其生长速度快、肉质好等优点，成为受广大消费者喜欢的绵羊品种。下图是科研工作者通过胚胎工程快速繁殖杜泊羊的流程。下列说法正确的是（）

A.杜泊羊的快速繁殖过程涉及动物细胞培养技术B.精子入卵后，被激活的卵母细胞完成减数分裂，进而排出第二极体C.受精作用结束后，受精卵即可进行有丝分裂和减数分裂D.在胚胎发育过程中，内细胞团细胞发育成各种组织14、生活垃圾分类就是通过回收有用物质减少生活垃圾的处置量，提高可回收物质的纯度增加其资源化利用价值，减少对环境的污染。目前，各地陆续颁布实施《生活垃圾管理条例》，生活垃圾分类已成为市民的日常生活方式。处理垃圾的有效方法之一是用微生物对其进行降解。下图表示筛选高效降解淀粉菌种的过程。下列叙述正确的是（）

A.剩余饭菜、玻璃碎片、果皮果壳属于湿垃圾B.菌落①②透明圈大小不同是两个菌群对碘液分解能力不同C.若垃圾分类不当混入过期的抗生素或电池等会抑制微生物生长D.图中将菌液接种到培养基的方法是释涂布平板法15、下列有关微生物的分离与培养实验的叙述，正确的是（）A.倒平板前，为了防止杂菌污染，需要将锥形瓶口通过酒精灯火焰B.倒平板时，应将培养皿打开一条略大于瓶口的缝隙，以免培养基溅到皿盖上C.为了防止污染，接种环经灼烧灭菌后应立即挑取菌落D.用移液器吸取相应的菌液前，需要将样液充分摇匀16、荧光原位杂交可用荧光标记的特异DNA片段为探针；与染色体上对应的DNA片段结合，从而将特定的基因在染色体上定位。下列说法正确的是（）

A.由图1可知，DNA探针的本质是荧光标记的DNA片段，其基本单位是脱氧核苷酸B.由图2可知，高温可以使双链DNA分子中的氢键断裂形成DNA单链C.图2中两条姐妹染色单体中最多可有2条荧光标记的DNA片段D.若C分别代表不同来源的一个染色体组，已知AA和BB中各有一对同源染色体可被荧光探针标记。若植物甲（AABB）与植物乙（AACC）杂交，则F1有丝分裂中期的细胞中可观察到6个荧光点评卷人得分三、填空题(共6题，共12分)17、纤维素酶是一种__________，一般认为它至少包括三种组分，即__________、___________和_______________，前两种酶使纤维素分解成___________，第三种酶将纤维二糖分解成_____________。正是在这三种酶的协同作用下，纤维素最终被__________成葡萄糖，为微生物的生长提供营养，同样，也可以为人类所利用。18、DNA连接酶与DNA聚合酶作用的异同:

DNA聚合酶只能将______加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯键。DNA连接酶是连接_____的末端，形成磷酸二酯键。19、最常用的载体是______，它是一种裸露的、结构简单的、独立于细菌染色体之外，并具有______能力的_____。20、动物细胞培养的流程：

取动物组织块（动物胚胎或幼龄动物的器官或组织）→剪碎→用______处理分散成______→制成______→转入培养瓶中进行______培养→贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞继续_____培养。21、动物细胞融合与植物原生质体融合的原理基本相同，诱导动物细胞融合的方法与植物原生质体融合的方法类似，常用的诱导因素有______等。22、请写出基因工程的概念：_________________。请写出胚胎移植的概念：_____________________。请分别写出植物组织培养和动物细胞培养的原理_________。评卷人得分四、判断题(共4题，共28分)23、目前，种植的转基因作物中以水稻和小麦最多，其次是转基因棉花和油菜（______）A.正确B.错误24、我国政府一再重申四不原则：不赞成、不允许、不支持、不接受任何生殖性克隆人实验。（选择性必修3P108）()A.正确B.错误25、我国对转基因技术的方针是研究上要大胆，坚持自主创新；推广上要慎重，做到确保安全；管理上要严格，坚持依法监管。（选择性必修3P104）()A.正确B.错误26、蛋白质工程是一项难度很大的工程，主要是因为蛋白质发挥功能必须依赖于正确的高级结构，而这种高级结构往往十分复杂。（选择性必修3P95）()A.正确B.错误评卷人得分五、实验题(共3题，共24分)27、甘蔗是华南地区一种重要的经济作物。某研究团队从甘蔗根际土壤中分离出了几种固氮菌；实验方案如下。

回答下列问题：

（1）Ashby培养基的营养成分主要包括水、无机盐_________等。实验中第一次在Ashby培养基上接种的方法是________，在Ashy平板上进行多次接种的目的是_________________________

（2）固氮菌能产生固氮酶。为评估固氮酶的活性，可以检测____________．

（3）研究发现，上述固氮菌还能产生IAA。取一定体积的固氮菌菌液离心，获得上清液，现欲测定上清液中IAA的含量，请利用以下试剂，写出实验思路。_______

供选试剂：标准的1g/L的IAA母液，蒸馏水，S试剂(与IAA反应显红色，且颜色深浅与IAA浓度成正相关）28、赤霉素与其受体GID结合后；可以促进植物茎秆伸长。蓝光能够激活蓝光受体CRY，抑制赤霉素的作用，为探究该机理，研究者分别构建了含有His-CRY和GST-GID融合基因的表达载体，表达出相应的融合蛋白。His和GST均为短肽，它们与其他蛋白形成的融合蛋白能与His或GST抗体结合，且不影响其他蛋白的结构和功能。

(1)构建含上述融合基因的表达载体。

①结合图1分析，欲使His短肽连在CRY的氨基酸序列前面(氨基端)，则应在____________(填“F引物”或“R引物”)的___________(“5’”或“3’”)端加上His短肽的编码序列，理由是________________。

②为使融合基因能与载体相连接，还需在F引物和R引物上添加相应的酶切位点序列，该序列应该位于His短肽编码序列的_____________(填“5’”或“3’”)端。

③用同样的方法扩增GST-GID融合基因；并构建相关表达载体。

(2)将两个表达载体同时导人拟南芥细胞，一段时间后裂解细胞，将含有His抗体的磁珠加人裂解液中，充分孵育后收集磁珠，将磁珠上的蛋白(磁珠蛋白)分离下来，进行抗原-抗体杂交，结果如图2。

①对细胞裂解液蛋白进行抗原-抗体杂交的目的是_______________。对磁珠蛋白进行His抗体检测的目的是_________。

②图示结果说明，蓝光的作用机理是__________。29、T-2毒素是一种由霉菌分泌的脂溶性小分子；可通过污染饲料引起畜禽中毒反应。CYP3A是猪体内降解T-2毒素的关键酶，T-2毒素可诱导CYP3A基因表达水平升高。

(1)T-2毒素是霉菌的_____（选填“初级”或“次级”）代谢产物，主要以_____方式进入猪细胞。

(2)B1和B2是CYP3A基因启动子上游的两个调控序列，为研究T-2毒素诱导CYP3A基因表达的机理，研究者首先将不同调控序列分别和CYP3A基因启动子及荧光素酶基因（LUC基因）连接构建表达载体，再分别导入猪肝细胞，然后向各组猪肝细胞培养液中加入_____，适宜条件下进行培养；24h后检测LUC酶活性，计算启动子活性相对值，结果如图1所示。据图可知，B1和B2调控序列是CYP3A基因响应T-2毒素的核心元件，理由是_____。

(3)研究表明NF-Y和Sp1两种蛋白均参与T-2毒素对CYP3A的诱导；B2是Spl的结合位点。研究者推测，NF-Y通过与B1结合，与Sp1共同调控CYP3A基因的表达。

①为证明Bl是NF-Y的结合位点，研究者依据B1序列制备了野生型和突变型探针，分别与猪肝细胞核蛋白提取物混合，实验分组及结果如图2．据实验结果推测，第4组出现阻滞带的原因是_____，进而推测第5组结果产生的原因是_____。

②研究者设计实验进一步证明了NF-Y和Spl通过互作共同发挥调控功能，实验设计思路是：增大或缩小B1和B2两者之间的距离，检测CYP3A基因的启动子活性。据此分析，实验假设是_____。评卷人得分六、综合题(共2题，共10分)30、已知生物体内有一种蛋白质（P），该蛋白质是一种转运蛋白，由305个氨基酸组成。如果将P分子中第158位的丝氨酸变成亮氨酸，第240位的谷氨酰胺变成苯丙氨酸，改变后的蛋白质（P1）不但保留P的功能；而且具有了酶的催化活性。回答下列问题。

（1）从上述资料可知，若要改变蛋白质的功能，可以考虑对蛋白质的___________进行改造。

（2）以P基因序列为基础，获得P1基因的途径有修饰____基因或合成____基因。所获得的基因在表达时是遵循中心法则的，中心法则的全部内容包括（以图表示）____________。

（3）蛋白质工程也被称为第二代基因工程，其基本途径是从预期蛋白质功能出发，通过___，进而确定相对应的脱氧核苷酸序列，据此获得目的基因，再经表达、纯化获得目标蛋白质，之后还需要对该蛋白质的生物_____进行鉴定。31、α1一抗胰蛋白酶（α1-AT）是下呼吸道中最主要的蛋白酶抑制剂，其在血清中含量越低，肺气肿越易发生。α1-AT补充治疗不仅是先天性α1-AT缺乏症的主要治疗方法，而且也为其他炎症性肺疾病的治疗开辟了新的途径。我国科研人员通过基因工程的方法生产α1-AT并用于临床，下图是科研人员选用的载体（图中bp表示碱基对，α1-AT基因为1182bp）。回答下列问题。

注：质粒除图示部位外以及目的基因内部和外部均无XbaI；SacI、HindIII三种限制酶的识别位点。

(1)基因表达载体的作用是____________（答出2点即可）。质粒中与该作用相关的结构除图中所示外，还有_____。

(2)科研人员在构建基因表达载体时选用的限制酶是XbaI和HindIII，操作成功后的基因表达载体长_____bp。没有选择限制酶XbaI和SacI的理由是_____。

(3)从人体获得α1-AT基因后，通过PCR技术快速扩增。PCR反应需在一定的缓冲溶液中才能进行，理由是_____。在引物设计上，科研人员在两种引物上分别添加了限制XbaI、HindIII的序列，理由是_____，添加位置应位于引物的_____（填“5'”或“3'”）端。参考答案一、选择题(共9题，共18分)1、D【分析】【详解】

A.过程①注射相应抗原后应经过一段时间；使小鼠产生浆细胞，再从小鼠脾脏中提取细胞甲，A项错误；

B.过程②诱导细胞融合；利用了细胞膜的流动性，B项错误；

C.过程③筛选杂交瘤细胞；过程④筛选能产生单一抗体的杂交瘤细胞，二者方法不同，C项错误；

D.过程⑤无论在体内还是体外进行；细胞丁都可大量增殖，D项正确；

因此，本题答案选D。2、D【分析】【分析】

植物组织培养过程是：离体的植物器官；组织或细胞脱分化形成愈伤组织；然后再分化生成根、芽，最终形成植物体。植物组织培养依据的原理是植物细胞的全能性。

题图分析：①表示去壁过程；常用酶解法，该过程用到的酶是纤维素酶和果胶酶；②表示用紫外线照射使黑芥的染色体断裂；③表示形成杂种细胞，④表示经过组织培养获得杂种植株的过程。

【详解】

A；④过程用到了植物组织培养技术；该技术的原理是植物细胞的全能性，A正确；

B；题意显示；“若其中一个细胞的染色体在融合前由于某种原因断裂，形成的染色体片段在细胞融合后可能不会被全部排出，未排出的染色体片段可以整合到另一个细胞的染色体上而留存在杂种细胞中”，依据该原理，可推测抗黑胫病的甘型油菜染色体上整合了黑芥的染色体片段，因此获得了抗黑胫病的性状，B正确；

C；②表示用紫外线照射使黑芥的染色体断裂；使用剂量不同可能会导致黑芥染色体断裂程度不同，C正确；

D；过程③中常用物理法或化学法处理（聚乙二醇）诱导原生质体融合；而灭活的病毒只能诱导动物细胞融合，D错误。

故选D。

【点睛】3、B【分析】设计试管婴儿∶是指体外受精形成的胚胎在植入母体孕育前；根据人们的需要，将胚胎的一个细胞取出，进行某些基因检测。当检测结果符合人们需要是，再把胚胎植入母体孕育.否定的理由∶把试管婴儿当作人体零配件工厂，是对生命的不尊重;早期生命也有活下去的权利，抛弃或杀死多余胚胎，无异于"谋杀"。肯定的理由∶解决了不育问题，提供骨髓中造血干细胞救治患者最好；最快捷的方法，提供骨髓造血干细胞并不会对试管婴儿造成损伤。

【详解】

A；人类对转基因生物安全性的争议集中在食物安全、生物安全和环境安全方面；生物技术的安全性要有确凿的证据和严谨的逻辑来思考，要有健全的法律法规做约束，要有科学的舆论导向，A正确；

B；试管婴儿实质是选择性移植体外受精形成的胚胎；应禁止设计试管婴儿，生殖性克隆，允许治疗性生殖，B错误；

C；基因筛检可能帮助人类及早预防某些遗传性疾病；做到早发现法治疗，如隐私泄露，也会引发基因歧视问题，C正确；

D；利用转基因技术制造的新型致病菌；有一些人类从来没有接触过的致病菌，可能让大批受感染者突然发病而又无药可医，这样，施放者便可以在敌方公众中造成极度恐慌，达到不战而胜的目的，D正确。

故选B。

【点睛】

4、A【分析】【分析】

三倍体转基因鲤鱼在减数分裂形成配子时；同源染色体联会发生紊乱，不能形成正常后代，不必担心与正常鲤鱼的杂交，所以不会导致自然种群被淘汰；

运载体的标记基因（如质粒上抗生素抗性基因）以及目的基因（如杀虫基因）本身编码的产物；均可转录；翻译指导抗性产物形成或形成毒性蛋白；

转基因生物释放到环境中（如抗虫和抗病类转基因植物）；除对害虫和病菌致毒外，对环境中的许多有益生物也将产生直接或间接的不利影响，甚至会导致一些有益生物死亡。

【详解】

A；四倍体转基因鲤鱼与正常鲤鱼（二倍体）杂交；后代个体的体细胞中含三个染色体组，在减数分裂过程中联会发生紊乱，不能产生正常生殖细胞，因此不能产生后代，不会导致自然种群被淘汰，A正确；

B；标记基因（如抗生素抗性基因）可能指导合成具有抗性的蛋白质产物；B错误；

C；目的基因如杀虫基因指导合成的产物具有杀虫效果；除对害虫和病菌致毒外，对环境中的许多有益生物也将产生直接或间接的不利影响，甚至会导致一些有益生物死亡，C错误；

D；目的基因可能有抗性基因和毒性基因；有可能存在一定的安全性问题，目的基因通过花粉散布到其他植物体内，也有可能改变其特性导致生态环境的平衡遭到破坏，D错误。

故选A。5、D【分析】【分析】

基因工程技术的基本步骤：1；目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。2、基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤；基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。3、将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样，将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。4、目的基因的检测与鉴定：（1）分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术。（2）个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。

【详解】

A；限制酶可以识别特定的DNA序列；并在特定的位点将DNA片段切开，形成黏性末端，因此用同种限制酶对含人血清白蛋白基因的DNA片段（目的基因）和Ti质粒进行酶切，目的是形成相同的黏性末端，以便进行连接，A正确；

B；为了使目的基因在受体细胞表达；需要将人血清白蛋白基因应插在启动子和终止子之间，B正确；

C；PCR过程中；当温度升高到90℃以上，使DNA变性，即双链解开，C正确；

D；为了确定转基因水稻是否培育成功；还需要从个体水平鉴定水稻植株是否含有人的血清白蛋白，D错误。

故选D。6、C【分析】【分析】

参与果酒制作的微生物是酵母菌；其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型。参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型。果醋制作的原理：当氧气；糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸。当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。

【详解】

A；酒精发酵是利用酵母菌的无氧呼吸；随着果酒发酵的进行，装置内会产生气体（二氧化碳），容器内压强大于外界，所以空气不会回流，A错误；

B；果酒发酵时；发酵液中的葡萄糖不断被消耗，因此用斐林试剂检测葡萄汁中还原糖含量变化，砖红色沉淀逐日减少，B错误；

C；以酒精为底物进行醋酸发酵；酒精与氧气发生反应产生醋酸和水，几乎没有气泡产生，发酵液产生的气泡量明显少于果酒发酵时，C正确；

D；重铬酸钾用于检测酒精；不能用于测定醋酸含量，D错误。

故选C。7、C【分析】【分析】

1；乳酸菌是厌氧细菌；在无氧的情况下能将葡萄糖分解成乳酸，可用于乳制品的发酵、泡菜的腌制等。乳酸菌种类很多，在自然界中分布广泛，空气、土壤、植物体表、人或动物的肠道内都有乳酸菌分布。常见的乳酸菌有乳酸链球菌和乳酸杆菌。

2、醋酸菌是好氧细菌，当O2；糖源都充足时能通过复杂的化学反应将糖分解成乙酸；当缺少糖源时则直接将乙醇转化为乙醛；再将乙醛变为乙酸。醋酸菌可用于制作各种风味的醋。多数醋酸菌的最适生长温度为30～35℃。

【详解】

A；制作泡菜的微生物是乳酸菌是厌氧细菌；在无氧的情况下能将葡萄糖分解成乳酸，可用于乳制品的发酵、泡菜的腌制等，A错误；

B、制作果醋的微生物是醋酸菌，醋酸菌是好氧细菌，当O2；糖源都充足时能通过复杂的化学反应将糖分解成乙酸；当缺少糖源时则直接将乙醇转化为乙醛；再将乙醛变为乙酸，B错误；

C；家庭制作果酒、果醋和腐乳通常都不是纯种发酵；以混合菌种的固体发酵及半固体发酵为主，C正确；

D；利用酵母菌酿酒时；发酵时间越长，剩余的营养物质越少，酵母菌的代谢越弱，产生酒精的速率就越慢，D错误。

故选C。8、D【分析】【分析】

1；DNA复制的过程：

（1）解旋；

（2）以母链为模板进行碱基配对合成子链；

（3）子代DNA分子的形成两条母链分别与各自决定的子链组成两个完全相同的DNA分子。

2；复制的特点：

（1）边解旋边复制。

（2）复制方式：半保留复制。

3；复制的条件：模板（代DNA分子的两条链）、原料（4种游离的脱氧核苷酸）、能量（ATP）、酶（解旋酶、DNA聚合酶）。

【详解】

A；据图分析；左侧DNA双链已经打开并开始复制，而右侧双链没有打开，说明改DNA分子是边解旋边进行复制的，A正确；

B；DNA每条链上相邻两个核苷酸之间是通过磷酸二酯键连接的；因此图中不连续片段需通过磷酸二酯键连接，B正确；

C；在双链DNA分子中；由于碱基互补配对原则中A只能与T配对、G只能与C配对，则（A+T）/（G+C）的比值在单双链中是相等的，因此新合成的两条子链（A+T）/（G+C）相同，C正确；

D；PCR过程中的链的合成都是连续的；D错误。

故选D。9、A【分析】【分析】

基因工程是指按照人们的意愿；进行严格的设计，并通过体外DNA重组和转基因等技术，赋予生物以新的遗传特性，从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品．生物工程育种中，基因工程和植物体细胞杂交两种育种方式能有效地打破物种的界限，制造出新品种。

【详解】

A；基因工程能定向地改造生物的遗传性状；并能打破物种之间的生殖隔离，培育新的农作物优良品种，A正确；

B；诱变育种的原理为基因突变；基因突变具有不定向性，B错误；

C；杂交育种的原理为基因重组；基因重组具有不定向性，并且不能改造生物的遗传性状，C错误；

D；单倍体育种能缩短育种年限；但不能打破物种的界限，D错误。

故选A。

【点睛】二、多选题(共7题，共14分)10、A:B:C:D【分析】【分析】

分析曲线图：引物2的Tm高于引物1；说明引物2的热稳定性较高。

【详解】

A；PCR过程是目的基因DNA受热变性后解链为单链；引物与单链互补结合，合成的子链在Taq聚合酶的作用下进行延伸，所以两引物分别与DNA的两条互补单链结合，是子链延伸的起点，A正确；

B；PCR过程中；复性温度应低于引物的Tm值以提高PCR效率，B正确；

C；DNA含有的氢键数越多；其热稳定性越高，而A和T碱基对间有两个氢键，C和G碱基对间有三个氢键，曲线图显示：引物2的Tm高于引物1，说明引物2的热稳定性较高，因此若两引物的脱氧核苷酸数相同，推测引物2的（G＋C）含量较高，C正确；

D；适当减少引物2的脱氧核苷酸数；会降低引物2的热稳定性，可使其Tm值接近引物1，D正确。

故选ABCD。11、A:C:D【分析】【分析】

哺乳动物的胚胎干细胞简称ES或EK细胞；是由早期胚胎或原始性腺中分离出来的一类细胞。ES细胞具有胚胎细胞的特性，在形态上，表现为体积小；细胞核大、核仁明显；在功能上，具有发育的全能性，即可以分化为成年动物体内任何一种组织细胞。另外，在体外培养条件下，ES可以增殖而不发生分化。ES细胞在饲养层细胞上，或在添加抑制因子的培养液中能够维持不分化状态。

【详解】

A；试管羊、转基因羊的繁殖方式都是有性生殖；克隆羊的繁殖方式属于无性生殖，A错误；

B；胚胎干细胞在饲养层细胞上培养可维持只增殖不分化状态；B正确；

C；受精时防止多精入卵的两屏障是透明带反应和卵细胞膜反应；C错误；

D；囊胚期的滋养层细胞可用于性别鉴定；将来可以发育成胎膜和胎盘，D错误。

故选ACD。12、A:B:C【分析】【分析】

13、A:B:D【分析】【分析】

14、C:D【分析】【分析】

1；根据《上海市生活垃圾管理条例》第四条本市生活垃圾按照以下标准分类规定：湿垃圾；即易腐垃圾，是指食材废料、剩菜剩饭、过期食品、瓜皮果核、花卉绿植、中药药渣等易腐的生物质生活废弃物；干垃圾，即其它垃圾，是指除可回收物、有害垃圾、湿垃圾以外的其它生活废弃物。

2；由题图信息分析可知；该实验的目的是为了筛选获得高效降解淀粉的菌种，在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基，属于选择培养基，接种方法是稀释涂布平板法。

【详解】

A；剩余饭菜、果皮果壳属于湿垃圾；玻璃碎片属于干垃圾，A错误；

B；菌落①②透明圈大小不同是两个菌群对淀粉的分解能力不同；透明圈大的分解能力强，B错误；

C；抗生素或电池等会抑制微生物生长；不利于微生物的分解，C正确；

D；图中出现透明圈；因此将菌液接种到培养基的方法是释涂布平板法，D正确。

故选CD。15、A:D【分析】【分析】

平板划线的操作的基本步骤是：(1)右手持接种环；经火焰灭菌，待凉后，在火焰旁打开盛有菌液的试管棉塞，并将试管口过火焰，将已冷却的接种环伸入菌液，沾取一环菌液，将试管口过火焰并塞上棉塞。(2)左手斜持琼脂平板，皿盖打开一条缝，右手于火焰近处将接种环迅速伸入平板内，划三至五条平行线，盖上皿盖，接种环不应划破培养基表面。(3)烧灼接种环，杀灭环上残留菌液，待冷却，从第一区域划线的末端开始往第二区内划线，重复以上操作，在第三四五区内划线，注意不要将最后一区的划线与第一区相连。(4)将平板倒置，放入培养箱中培养。

【详解】

A；倒平板前；需要将锥形瓶口通过酒精灯火焰，通过灼烧灭菌防止杂菌污染，A正确；

B；倒平板时；应将培养皿打开一条略大于瓶口的缝隙，以免杂菌进入，而不是为了防溅，B错误；

C；接种环经灼烧灭菌后应等到冷却后再挑取菌落；否则高温会使菌落死亡，C错误；

D；用移液器吸取相应的菌液前；需要将样液充分摇匀，保证菌液中微生物均匀分布，提高实验的准确性，D正确。

故选AD。16、A:B:D【分析】【分析】

1；基因探针是用放射性同位素、荧光分子等标记的DNA分子作为探针；原理是DNA分子杂交。

2；DNA分子是一个独特的双螺旋结构；是由两条平行的脱氧核苷酸长链盘旋而成，外侧由脱氧核糖和磷酸交替连接构成基本骨架，内侧是碱基对（A-T；C-G）通过氢键连接。

3；目的基因的检测与鉴定：

分子水平上的检测：

①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；

②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；

③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术。

个体水平上的鉴定：

抗虫鉴定；抗病鉴定、活性鉴定等。

【详解】

A；由图1可知；DNA探针是用荧光分子标记的DNA分子，DNA的基本组成单位是脱氧核苷酸，因此荧光标记的DNA探针的基本单位是脱氧核糖核苷酸，A正确；

B；由图2可知；高温（煮沸）可以使双链DNA分子中的氢键断裂形成DNA单链，B正确；

C；图中两条姐妹染色单体中含有2个DNA分子共有4条链；所以最多可有4条荧光标记的DNA片段，C错误；

D、由于AA和BB中各有一对同源染色体可被荧光探针标记，若植物甲（AABB）与植物乙（AACC）杂交，则其F1（AABC）含有3个荧光点；经间期复制加倍，有丝分裂中期的细胞中可观察到6个荧光点，D正确。

故选ABD。三、填空题(共6题，共12分)17、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】复合酶C1酶CX酶葡萄糖苷酶纤维二糖葡萄糖水解18、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】单个核苷酸两个DNA片段19、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】质粒自我复制双链环状DNA分子20、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】胰蛋白酶单个细胞细胞悬液原代传代21、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】聚乙二醇、灭活的病毒、电刺激22、略

【分析】【分析】

动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的组织；将它分散成单个细胞，然后放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。植物组织培养又叫离体培养，指从植物体分离出符合需要的组织；器官或细胞，原生质体等，通过无菌操作，在无菌条件下接种在含有各种营养物质及植物激素的培养基上进行培养以获得再生的完整植株或生产具有经济价值的其他产品的技术。

【详解】

1；基因工程又称基因拼接技术和DNA重组技术；是以分子遗传学为理论基础，以分子生物学和微生物学的现代方法为手段，将不同来源的基因按预先设计的蓝图，在体外构建杂种DNA分子，然后导入活细胞，以改变生物原有的遗传特性、获得新品种、生产新产品的遗传技术。

2；胚胎移植是指将雌性动物的早期胚胎；或者通过体外受精及其它方式得到的胚胎，移植到同种的、生理状态相同的其它雌性动物的体内，使之继续发育为新个体的技术。

3；动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的组织；将它分散成单个细胞，然后放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖，其原理是细胞增殖。

4；植物组织培养又叫离体培养；指从植物体分离出符合需要的组织、器官或细胞，原生质体等，通过无菌操作，在无菌条件下接种在含有各种营养物质及植物激素的培养基上进行培养以获得再生的完整植株或生产具有经济价值的其他产品的技术。植物组织培养的原理是植物细胞具有全能性。

【点睛】

本题考查基因工程概念、胚胎移植、动植物细胞培养等相关知识，意在考察考生对知识点的理解掌握程度。【解析】①.又叫基因拼接技术或DNA重组技术②.又称受精卵移植，是指将雌性动物体内的的早期胚胎，或者通过体外受精及其他方式得到的胚胎，移植到同种的、生理状况相同的其他雌性动物体内，使之继续发育为新个体的技术③.植物细胞全能性、细胞增殖四、判断题(共4题，共28分)23、B【分析】【详解】

目前，种植的转基因作物中以大豆和玉米最多，其次是转基因棉花和油菜，所以错误。24、A【分析】【详解】

生殖性克隆存在伦理道德等方面的问题，我国政府一再重申四不原则：不赞成、不允许、不支持、不接受任何生殖性克隆人实验。本说法正确。25、A【分析】【详解】

转基因生物的安全性问题：食物安全（滞后效应；过敏源、营养成分改变）、生物安全（对生物多样性的影响）、环境安全（对生态系统稳定性的影响）；对待转基因技术的利弊，正确的做法应该是趋利避害，不能因噎废食。我国对转基因技术的方针是一贯的、明确的，就是研究上要大胆，坚持自主创新；推广上要慎重，做到确保安全；管理上要严格，坚持依法监管。

该说法正确。26、A【分析】【详解】

蛋白质工程是一项难度很大的工程，主要是因为蛋白质发挥功能必须依赖于正确的高级结构，而这种高级结构往往十分复杂，并且蛋白质的结构具有多样性，这也在一定程度上增加了蛋白质工程的难度，故说法正确。五、实验题(共3题，共24分)27、略

【分析】【分析】

培养基是人们按照微生物对营养物质的不同需求；配制出供其生长繁殖的营养基质，培养基中一般含有水；碳源、氮源和无机盐。在提供上述几种主要营养物质的基础上，培养基还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物种和氧气的要求。固氮微生物可利用空气中的氮气，故培养基无需再加入氮源。纯化微生物时常用的接种方法是平板划线法和稀释涂布平板法。

【详解】

（1）固氮菌可利用空气中的氮气作为氮源，所以Ashby培养基的营养成分主要包括水；无机盐、碳源等；不需要额外加入氮源。将土壤稀释液进行梯度稀释后再接种的方法为稀释涂布平板法，在Ashy平板上进行多次接种的目的是提高固氮菌的纯度。

（2）固氮酶的活性越大；单位时间内的固氮量越大，所以为评估固氮酶的活性，可以检测单位时间内的固氮量。

（3）S试剂可与IAA反应显红色；且颜色深浅与IAA浓度成正相关，所以可用蒸馏水对IAA母液进行梯度稀释，加入S试剂制成标准显色液，往上清液中加入S试剂，与标准显示液进行比色，与上清液颜色相近的标准显示液中IAA的浓度计为上清液中IAA的浓度。

【点睛】

本题考查固氮菌的培养和筛选，意在考查考生对所学知识的灵活应用能力。【解析】碳源稀释涂布平板法提高固氮菌的纯度单位时间内的固氮量用蒸馏水对IAA母液进行梯度稀释，加入S试剂制成标准显色液，往上清液中加入S试剂，与标准显示液进行比色，与上清液颜色相近的标准显示液中IAA的浓度计为上清液中IAA的浓度28、略

【分析】【分析】

基因工程的基本操作步骤包括目的基因的获取；基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定。基因工程至少需要三种工具：限制性核酸内切酶（限制酶）、DNA连接酶、运载体。

【详解】

（1）①由图1可知，欲使His短肽连在CRY的氨基酸序列前面(氨基端)，即获得“3’—His短肽—CRY基因—5’”的基因表达载体；由图可知CRY基因的3’端对应的为F引物，即要将His短肽加在CRY的氨基端，应在CRY基因模板链的3’端上加His短肽编码序列，对应的是F引物；而且加上的His序列不与CRY转录模板配对，所以只能加在F引物5’端，才能保证引物与模板配对后可以正常延伸。

②为使融合基因能与载体相连接；酶切位点序列应该位于F引物的3’端，His短肽编码序列的5’端。

（2）①为确定His-CRY和GST-GID这两个融合基因在拟南芥细胞中已正常表达；应对细胞裂解液蛋白进行抗原-抗体杂交，并且为了确定磁珠上的His抗体可以结合His短肽，对磁珠蛋白进行His抗体检测。

②由题意可知，蓝光可以激活蓝光受体CRY，抑制赤霉素的作用，分析图2，对细胞裂解液蛋白进行抗原-抗体杂交，无论黑暗或蓝光条件下，均具有条带，但含有His抗体的磁珠蛋白组，黑暗条件下没有检测到GST条带，但蓝光组出现了GST条带，说明蓝光激活CRY后，CRY与赤霉素受体GID结合，使赤霉素无法发挥作用，从而抑制赤霉素的作用。【解析】(1)F引物5’要将His短肽加在CRY的氨基端；则应在CRY基因模板链的3’端上加His短肽编码序列，对应的是F引物；而且加上的His序列不与CRY转录模板配对，所以只能加在F引物5’端，才能保证引物与模板配对后可以正常延伸5’

(2)确定His-CRY和GST-GID这两个融合基因在拟南芥细胞中已正常表达确定磁珠上的His抗体可以结合His短肽光激活CRY后，CRY与赤霉素受体GID结合，使赤霉素无法发挥作用，从而抑制赤霉素的作用29、略

【分析】【分析】

图1可知：T-2毒素是一种常见的菌素；CYP3A是降解T-2毒素的关键酶，T-2毒素可诱导其表达水平升高，当用两种调控序列同时连接启动子，启动子的活性最高。

图2可知：野生型探针能与NF-Y结合；突变型探针不能与NF-Y结合，NF-Y抗体一定能与NF-Y结合。

【详解】

（1）初级代谢产物一般是霉菌生命活动所必需的，大多存在于细胞内。次级代谢产物不是霉菌生命活动必需的，并且分泌到体外，故T-2毒素是霉菌的次级代谢产物。T-2毒素是一种由霉菌分泌的脂溶性小分子，脂溶性小分子以自由扩散的方式进入细胞。

（2）实验的自变量是有无调控序列；根据单一变量原则，对照组的目的是为了排除无光变量的影响，除了没有调控序列，其他处理和实验组相同，所以对照组和实验组猪肝细胞均导入含CYP3A基因启动子及LUC基因的表达载体，然后向各组猪肝细胞培养液中加入加入等量T-2毒素，适宜条件下进行培养。从图中信息可知，缺失两个调控序列和对照组活性一致，缺失一个比对照组活性略强，两个都存在活性最高，说明这两个调控序列是CYP3A基因响应T-2毒素的核心元件。故缺失两个调控序列或其中任一个，T-2毒素都不能诱导启动子活性明显增强。

（3）①实验的目的是要验证NF-Y能与B1结合；根据第2组和第3组结果，依据B1序列制备的NF-Y结合位点野生型探针能与NF-Y结合，根据第4组结果，突变型探针不能与NF-Y结合。第5组加入了NF-Y抗体，一定能与NF-Y结合。故可以解释为：结合位点突变的探针不能结合核蛋白中的NF