2025年人民版选择性必修3生物下册阶段测试试卷含答案

…………○…………内…………○…………装…………○…………内…………○…………装…………○…………订…………○…………线…………○…………※※请※※不※※要※※在※※装※※订※※线※※内※※答※※题※※…………○…………外…………○…………装…………○…………订…………○…………线…………○…………第=page22页，总=sectionpages22页第=page11页，总=sectionpages11页2025年人民版选择性必修3生物下册阶段测试试卷含答案考试试卷考试范围：全部知识点；考试时间：120分钟学校：______姓名：______班级：______考号：______总分栏题号一二三四五六总分得分评卷人得分一、选择题(共6题，共12分)1、一种双链DNA分子被三种不同的限制酶切割；切割产物通过电泳分离，用大小已知的DNA片段的电泳结果作为分子量标记（右图左边一列）。关于该双链DNA,下列说法错误的是（）

A.呈环状结构B.分子质量大小为10kbC.有一个NotI和两个EcoRI切点D.其NotI切点与EcoRI切点的最短距离为2kb2、天然的玫瑰没有蓝色花，这是由于缺少控制蓝色色素合成的基因B，而开蓝色花的矮牵牛中存在序列已知的基因B。现用基因工程技术培育蓝玫瑰，下列操作正确的是（）A.提取矮牵牛蓝色花的mRNA，从而获得互补DNA，再扩增基因BB.利用DNA连接酶从开蓝色花矮牵牛的基因文库中可以获取基因BC.利用DNA聚合酶将基因B与质粒连接后导入玫瑰细胞D.将基因B直接导入大肠杆菌，然后感染并转入玫瑰细胞3、下列有关胚胎干细胞（简称ES细胞）的叙述，错误的是（）A.ES细胞体积大，核仁明显B.ES细胞可以从原始性腺中分离获取C.ES细胞具有发育的全能性D.ES细胞可用于研究细胞凋亡的机理4、下图为利用重叠延伸PCR的方法在蛋白A基因中部引入定点突变（A/T碱基对变为G/C）的过程。该过程需设计四种引物；其中引物A；D与蛋白A基因的两端完全配对，引物B、C虽与蛋白A基因中部配对，但在欲引入突变的位置替换为突变后的碱基。通过多次独立的PCR达到目的。

下列说法不正确的是（）A.PCR1所用引物应为引物A和BB.PCR2至PCR4依次以PCR1至PCR3的产物为模板C.PCR3无需额外加入引物D.PCR4的作用是大量扩增突变基因5、重组新冠病毒疫苗的制备原理是将新冠病毒S蛋白受体结合区(RBD)基因通过基因工程技术重组到中国仓鼠卵巢(CHO)细胞内，在体外大量表达出RBD二聚体，提取后制备成疫苗。下列叙述正确的是（）A.CHO细胞作为新冠病毒的宿主细胞，提供病毒所需的营养物质B.新冠病毒的RBD基因可以直接重组到CHO细胞的DNA分子上C.体外培养重组CHO细胞时需添加适量的干扰素防止杂菌污染D.要检测RBD基因在CHO细胞中成功表达，可用抗原一抗体杂交方法6、如图为基因表达载体的模式图，下列叙述错误的是（）

A.构建基因表达载体需要用到限制酶和DNA连接酶B.终止子位于基因的下游，使翻译在所需要的地方停止下来C.构建成功后可使目的基因在受体细胞中稳定存在，并遗传给下一代D.抗生素抗性基因作为标记基因评卷人得分二、多选题(共8题，共16分)7、2012年6月29日，中国首例设计婴儿诞生。这个婴儿的父母均为地中海贫血基因的携带者。此前，二人曾育有一女，患有重度地中海贫血，为了再生一个健康的孩子，用他的脐带血帮助姐姐进行造血干细胞移植，设计了这个婴儿。下列有关说法正确的是（）A.“设计试管婴儿”利用体外受精、胚胎移植、植入前胚胎遗传学诊断技术等B.“设计试管婴儿”与“试管婴儿”均为有性生殖C.“设计试管婴儿”与“试管婴儿”都要进行胚胎选择，二者选择的目的相同D.设计婴儿性别是“设计试管婴儿”的第一步8、下列有关利用酵母菌发酵制作葡萄酒的叙述，错误的是（）A.葡萄糖在酵母菌细胞的线粒体内分解成丙酮酸B.制作葡萄酒时，酵母菌先在有氧条件下大量繁殖C.制作过程中，酵母菌始终处于碱性环境D.酵母菌的发酵产物不会影响自身的代谢活动9、下图为胚胎干细胞获取及培养简图；据图示信息判断，下列相关叙述错误的是（）

A.通过③过程可定向培育人造组织器官，用于器官移植B.研究细胞分化和细胞凋亡的机理可选择图中②或③途径C.胚胎干细胞培养过程中5%CO2的主要作用是促进细胞呼吸D.②过程只能在饲养层细胞上进行，该细胞可作为干细胞的营养细胞10、下列关于发酵工程的应用，叙述正确的是（）A.柠檬酸是一种广泛应用的食品酸度调节剂，可以通过黑曲霉发酵制得B.可以将乙型肝炎病毒的抗原基因转入酵母菌通过发酵工程制备乙型肝炎疫苗C.利用发酵工程生产的白僵菌特异性强，只能用来防治一种农林害虫D.一种真菌通过发酵工程产生的井冈霉素可以用来防治水稻枯纹病11、将单克隆抗体与前体药物的专一性活化酶藕联（简称抗体导向酶偶联）是特异性治疗肿瘤并减少对正常细胞伤害的最新研究方向。碱性磷酸酶是抗肿瘤药物多柔比星前体的专一性活化酶，医学研究中利用抗体导向酶偶联机理将碱性磷酸酶与单克隆抗体制成“生物导弹”，通过活化多柔比星使其对DNA造成损伤，进而抑制以DNA为模板进行的生理活动，达到治疗肿瘤的目的。下列说法正确的是（）A.为获得单克隆抗体应首先给小白鼠注射肿瘤细胞表面抗原，得到能产生特定抗体的B淋巴细胞B.制备单克隆抗体的过程中至少要经过两次原理和目的均不同的筛选过程C.生物导弹综合利用了碱性磷酸酶的定向制导作用和单克隆抗体的特异性杀伤能力D.多柔比星只作用于有增殖能力的细胞12、下面为制备单克隆抗体过程示意图，下列相关叙述错误的是（）

A.①表示B淋巴细胞和骨髓瘤细胞均是从小鼠的脾脏中提取的B.④中的筛选是通过抗原—抗体反应进行的C.④中的筛选是为了获得能产生多种抗体的杂交瘤细胞D.⑤可以无限增殖13、利用枯草芽孢杆菌的发酵可以生产亮氨酸脱氢酶。在启动子和亮氨酸脱氢酶基因之间插入信号肽（SPN）基因并将重组质粒导人枯草芽孢杆菌构建工程菌，可提高亮氨酸脱氢酶的生产水平。重组质粒的构建如图所示，KmR为卡那霉素抗性基因，ApR为氨苄青霉素抗性基因，图中各限制酶切割产生的黏性末端不同。下列叙述正确的是（）

A.重组质粒pMA5-SPN-leudh除图中标注外还应具有终止子、复制原点等结构B.构建重组质粒用NdeI和BamHI两种酶有助于正确插入目的基因C.图中KmR和ApR存在于质粒中的作用是便于重组DNA分子的筛选D.图中各限制酶切开的是氢键和磷酸二酯键，切下的DNA片段拼接需依靠DNA连接酶14、下列叙述中错误的是（）A.改变NaCl溶液的浓度只能使DNA溶解而不能使其析出B.细胞代谢产物的工厂化生产体现了细胞的全能性C.在pH和温度相同时加酶洗衣粉的洗涤效果好于普通洗衣粉D.透明带反应是防止多精入卵的第一道屏障评卷人得分三、填空题(共7题，共14分)15、哺乳动物核移植可以分为______核移植（比较容易）和______核移植（比较难）。16、在课题1中，我们学习了稀释涂布平板法。这一方法常用来统计样品中_________________的数目。当样品的稀释度足够高时，____________________。17、微生物________________的方法很多，最常用的是_____________和__________________。18、第三步：将目的基因导入______19、PCR技术的DNA体外复制环境有DNA解旋酶、耐热DNA聚合酶、DNA母链、4种脱氧核苷酸和__________，它能使DNA聚合酶能够从引物的________端开始连接脱氧核苷酸。（人教P58列表），而引物是一段______________片段，用于PCR的引物长度通常为____个核苷酸。20、通常将DNAD的羟基（—OH）成为_______________端，而磷酸基团的末端成为___________端。由于_______________，因此DNA需要引物，因此DNA的合成方向总是从_________________延伸。21、植物繁殖的新途径。

微型繁殖：可以高效快速地实现种苗的大量繁殖。

作物脱毒：采用______组织培养来除去病毒（因为植物分生区附近的病毒______）

人工种子：以植物组织培养得到的______、不定芽、顶芽和腋芽等为材料，经_____包装得到的种子。优点：完全保持优良品种的遗传特性，______；方便储藏和运输。

人工种子的结构包括：______、_____和______。评卷人得分四、判断题(共4题，共28分)22、从牛卵巢中采集的卵母细胞可直接用于体细胞核移植。（选择性必修3P53）()A.正确B.错误23、利用基因工程技术建立移植器官工厂是目前基因工程取得实际应用成果非常多的领域。()A.正确B.错误24、要对蛋白质的结构进行设计改造，最终必须通过改造氨基酸序列来完成。（选择性必修3P94）()A.正确B.错误25、中国政府积极支持制定《禁止生殖性克隆人国际公约》，坚决反对克隆人，不允许进行任何生殖性克隆人实验。（选择性必修3P108）()A.正确B.错误评卷人得分五、实验题(共3题，共30分)26、I：“CTAB法”和“SDS法”是提取DNA的常用方法，CTAB提取液含有CTAB、EDTA等成分，SDS提取液含SDS、EDTA等成分。CTAB能破坏膜结构，使蛋白质变性，提高DNA在提取液中的溶解度；SDS能破坏膜结构，使蛋白质变性，EDTA能螯合Mg2+、Mn2+；抑制DNA酶的活性。某科研小组为了寻找提取腊梅DNA的优良方法，比较了两种提取DNA的方法，主要操作如下：

实验测定结果如下（表中OD260反映溶液中核酸的浓度；OD280反映溶液中蛋白质的浓度。理论上，纯DNA溶液的OD260/OD280为1.8，纯RNA溶液的OD260/OD280为2.0）。

。CTABSDSOD260OD280OD260/OD28OD260OD280OD260/OD280.0030.0181.8330.0060.0051.200请回答下列问题。

（1）与常温下研磨相比，液氮中研磨的优点是_______；CTAB法和SDS法提取液中都加入EDTA的目的是_______。

（2）氯仿一异戊醇密度均大于水且不溶于水，DNA不溶于氯仿一异戊醇，蛋白质等杂质可溶于氯仿一异戊醇，实验过程中加入氯仿一异戊醇离心后，应取①______加异丙醇（异丙醇与水互溶）并离心进行纯化，利用异丙醇溶液纯化DNA的原理是________。

（3）两种方法中，________法提取的DNA较多，其可能原因是_______。

II：某研究组对玉米开展了组织培养及相关研究；A；B、C、D表示以亲本植物为材料进行的四种人工繁殖过程，请据图回答下列问题：

（1）植物组织培养过程中，外植体需要进行消毒处理。利用图中的部分叶片进行植物组织培养时，需将其先用________消毒30s后；用无菌水清洗2-3次，再用次氯酸钠处理30min后，立即用无菌水清洗2-3次。

（2）2，4-D常用于玉米愈伤组织的诱导，对形态的发生有一定的抑制作用。为促进愈伤组织再分化，在配制分化培养基时需____（填“升高”“保持”或“降低）2，4-D的浓度。当玉米愈伤组织在只含有细胞分裂素的培养基上培养时，出现具有分生能力的绿色芽点，但要继续出芽，通常在培养基中添加____________；以促进苗形成。

（3）研究中用显微镜可以观察到的现象是_______（填下列序号）。

①绿色芽点细胞排列松散②刚融合的杂交细胞发生质壁分离。

③胚状体细胞中有叶绿体④分化的愈伤组织的各细胞的形态大小一致27、某化工厂的污水池中含有一种有害的难以降解的有机化合物A。研究人员用化合物A；磷酸盐、镁盐以及微量元素配制的培养基；成功筛选到能高效降解化合物A的细菌（目的菌）。实验的主要步骤如图所示。请分析回答下列问题。

（1）培养基中加入化合物A的目的是__________，这种培养基属于__________培养基。

（2）“目的菌”生长所需的氮源和碳源是来自培养基中的__________。实验需要振荡培养，由此推测“目的菌”呼吸作用的类型是__________。

（3）在上述实验操作过程中，获得纯净“目的菌”的关键是__________。

（4）转为固体培养基时，常采用平板划线的方法进行接种，此过程中所用的接种工具是__________，操作时采用__________灭菌的方法。

（5）实验结束后，使用过的培养基应该进行灭菌处理后才能倒掉，这样做的目的是____________________。

（6）某同学计划统计污水池中“目的菌”的总数，他选用104、105、106倍稀释液进行平板划线，每种稀释液都设置了3个培养皿。从设计实验的角度看，还应设置的一组对照实验是__________，此对照实验的目的是____________________。28、下图是某同学设计的传统发酵装置示意图。比较传统发酵技术与现代发酵工程；回答下列问题：

(1)传统发酵酿酒与现代工业发酵酿酒的原理是______。请设计简单的实验验证发酵过程中产生了酒精（不考虑发酵液中葡萄糖的影响），写出实验思路并预期实验结果与结论______。

(2)传统发酵技术一般以天然存在的______发酵，品质不一，现代工业发酵一般为单一菌种发酵，品质较高。自制的果酒并非商品意义上的产品，在实际生产中还需要经过______装瓶等过程才能获得成品酒。

(3)若要测定发酵罐中酵母菌的种群密度，取10mL发酵液稀释1000倍，利用25×16的血细胞计数板，观察并统计到中方格中的酵母菌平均数为9个，则每毫升发酵液中酵母菌数量约是______个。

(4)利用上图中装置酿酒与酿醋时，操作上的最主要的区别是______。评卷人得分六、综合题(共3题，共9分)29、三氯生是一种广谱抑菌物质；可用于基因工程中筛选含目的基因的受体菌。某科研团队通过先筛选出一种对三氯生抗性较强的重组质粒(如图1)，再将可以受温度调控的基因插入该质粒上，构建了温度调控表达质粒。请回答下列问题：

(1)利用从细菌中提取的DNA通过PCR技术获取fabV­A基因(或fabV­B基因)时，至少需经过________次扩增可获得8个双链等长的目的基因。实验操作时，微量离心管中需加入的物质有：模板、引物、原料、________________。下图2为PCR产物的电泳结果，操作较理想的泳道有________条。

(2)图1中，步骤Ⅰ需要的工具酶是________________；步骤Ⅱ常用的方法是用Ca2＋处理使细菌成为________________；为达到步骤Ⅲ预期的筛选目的，所用物质X最可能为________。

(3)为获得一种增强大肠杆菌对三氯生的抵抗作用效果较好的重组质粒，将含有不同质粒的大肠杆菌分别接种到相应培养基中。培养一段时间后，结果如图3，则适宜选作构建温度调控表达质粒的是________。

(4)科研工作者对上述选出的质粒进行改造，获得了图4所示质粒。其中S1和S2是启动子，P1和P2是终止子。H基因在高温下会抑制S1，L基因在低温下会抑制S2。

①如果将lacZ基因和GFP(绿色荧光蛋白)基因插入图4质粒中，且使得低温下只表达GFP基因，高温下只表达lacZ基因，则lacZ基因插在________之间，而GFP基因的插入位置及注意点是________________。

②若以大肠杆菌为受体细胞，筛选上述①中插入GFP基因成功的受体细胞的依据是：大肠杆菌能在含________的培养基中生长，且__________________。30、中科院动物研究所通过基因工程技术向猪的基因组内插入一个解偶联蛋白基因（UCP）；经过基因改造的猪瘦肉率高；脂肪少、抗寒能力强。下图是基因改造过程中涉及的相关限制酶及酶切位点。请据图回答下列问题：

(1)实施基因工程的核心步骤是_____。

(2)为避免出现质粒和目的基因自身环化，可用图中_____两种限制酶同时切割质粒和UCP1基因。为了获取重组质粒，除了使用限制酶外，还需使用_____。

(3)重组质粒上的_____是RNA聚合酶识别和结合的部位；以驱动解偶联蛋白基因（UCPI）转录。

(4)图中的抗生素抗性基因的作用是作为_____基因；以便于筛选。

(5)检测转基因生物的DNA是否插入了解偶联蛋白基因（UCPI），常用的检测方法是_____。31、DDX5基因在细胞周期调控、肿瘤发生等方面发挥重要作用。研究人员运用CRISPR-Cas9基因编辑技术对口蹄疫病毒易感的PK-15细胞株中的DDX5基因进行敲除，为后续研究DDX5基因在病毒感染中的作用提供基础。请据图回答下列问题。

(1)图1中，Ori是_______（酶）首先结合的核苷酸序列。构建CRISPR-Cas9表达载体时使用的工具酶主要有______。结合对图2中CRISPR-Cas9技术原理的理解，图1表达载体中需要插入两种sgRNA基因，原因是_____。

(2)研究中先将CRISPR-Cas9表达载体导入大肠杆菌DH5a，再将菌液利用________法接种到加有________的细菌培养基上，待菌落长成后，直接挑取菌落加入到PCR反应系统中进行基因鉴定。PCR过程中不需要先提取细菌DNA的原因是______。

(3)研究中采用培养转化的大肠杆菌对CRISPR-Cas9表达载体进行扩增。与PCR相比，利用大肠杆菌进行目的基因扩增的优点有________、____________。

(4)取转化的PK15细胞悬液进行有限稀释，再接种到6孔培莽板上，一段时间后对各孔内的细胞株进行DDX5蛋白检测，结果如图（其中B-actin是真核细胞骨架蛋白）。对细胞悬液有限稀释法的目的是________，细胞培养时CO2培养箱中充入的气体应是_______。根据检测结果，敲除DDX5基因的细

胞株编号有___________。

参考答案一、选择题(共6题，共12分)1、D【分析】【分析】

通过与分子量标记比较可知单用EcoRI处理后产生了4kb和6kb两条带；而利用EcoRI和NotI双酶切时产生了6kb、3kb、1kb三条带，即4kb的片段进一步被NotI酶切为3kb和1kb的片段，因此DNA含有一个NotI酶切位点，因为用NotI处理只产生了一个10kb的条带，所以该分子必须是环状的，长度一定是10kb。据此答题。

【详解】

AB、单用EcoRI处理和利用EcoRI和NotI双酶切时产生的结果不同，说明DNA含有NotI酶切位点，因为用NotI处理只产生了一个10kb的条带，所以该分子必须是环状的，且长度一定是10kb；A正确；B正确；

C、因为用NotI处理只产生了一个10kb的条带，说明该环状DNA上含有一个NotI切割位点，单用EcoRI处理后产生了4kb和6kb两条带；说明该环状DNA上含有2个EcoRI切割位点，C正确：

D、用EcoRI处理后产生的4kb的片段，进一步被NotI酶切为3kb和1kb的片段，可以得知NotI切点与EcoRI切点的最短距离为1kb，最大距离为3kb；D错误。

故选D。

【点睛】2、A【分析】【分析】

基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取；利用PCR技术扩增和人工合成；（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤；基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等；（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法；（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。

【详解】

A；提取矮牵牛蓝色花的mRNA；逆转录得到cDNA，然后扩增，可获得大量的基因B，A正确；

B；基因文库中保存的是各基因片段；从基因文库中获取基因B时，不需要使用DNA连接酶，B错误；

C；目的基因与质粒连接用的是DNA连接酶；而DNA聚合酶是在DNA复制中用到的酶，C错误；

D；将目的基因导入植物细胞时；常采用农杆菌转化法，即将基因B先导入农杆菌，然后感染并转入玫瑰细胞，D错误。

故选A。

【点睛】3、A【分析】【分析】

胚胎干细胞是早期胚胎（原肠胚期之前）或原始性腺中分离出来的一类细胞；它具有体外培养无限增殖；自我更新和多向分化的特性。

【详解】

A；胚胎干细胞在形态上有体积小、细胞核大、核仁明显的特点；A错误；

B；胚胎干细胞可以从早期胚胎或原始性腺中分离获取；B正确；

C；胚胎干细胞具有发育的全能性；C正确；

D；胚胎干细胞是在体外条件下研究细胞分化的理想材料；是研究细胞凋亡的机理的理想材料，D正确；

故选A。4、B【分析】【分析】

聚合酶链式反应（PCR）是一种用于放大扩增特定的DNA片段的分子生物学技术；它可看作是生物体外的特殊DNA复制，PCR的最大特点是能将微量的DNA大幅增加。

【详解】

A、引物与模板的3，端结合；由图PCR1的产物可知，PCR1所用引物应为引物A和B，A正确；

B；由图可知；PCR1和2均以原始DNA为模板，PCR3以PCR1和2的产物为模板，PCR4以PCR3产物为模板，B错误；

C；由图可知；两条链互为模板和引物，故PCR3无需额外加入引物，C正确；

D；PCR4的作用是大量扩增突变基因；得到大量的新的蛋白A基因，D正确。

故选B。5、D【分析】【分析】

动物细胞培养需要的条件：（1）充足的营养供给--微量元素、无机盐、糖类、氨基酸、促生长因子、血清等。（2）适宜的温度：36.5℃±0.5℃；适宜的pH：7.2～7.4。（3）无菌、无毒的环境：培养液应进行无菌处理。通常还要在培养液中添加一定量的抗生素，以防培养过程中的污染。此外，应定期更换培养液，防止代谢产物积累对细胞自身造成危害。（4）气体环境：95%空气+5%CO2。O2是细胞代谢所必需的，CO2的主要作用是维持培养液的pH。

【详解】

A；CHO细胞不是新冠病毒的宿主细胞；中国仓鼠卵巢（CHO）细胞是基因工程的受体细胞，A错误；

B；新冠病毒为RNA病毒；不能直接与CHO中的DNA重组，B错误；

C；体外培养重组CHO细胞时需添加适量的抗生素；其目的是防止杂菌污染，C错误；

D；可用抗原-抗体杂交技术检测目的基因是否成功表达出蛋白质；D正确。

故选D。6、B【分析】【分析】

基因表达载体的构建〈即目的基因与运载体结合）是实施基因工程的第二步；也是基因工程的核心。其构建目的是使目的基因能在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传给下一代，同时，使目的基因能够表达和发挥作用。

【详解】

A；首先用限制酶切割含有目的基因的外源DNA分子和运载体；再用DNA连接酶连接目的基因和运载体形成重组DNA分子，A正确；

B；终止子位于基因的下游；作用是使转录在相应的地方停止，不是使翻译在所需要的地方停止下来，B错误；

C；基因表达载体的构建目的是使目的基因能在受体细胞中稳定存在；并且可以遗传给下一代，C正确；

D；抗生素抗性基因作为标记基因；标记基因便于目的基因的鉴定和筛选，可检测受体细胞中是否导入了目的基因，D正确。

故选B。二、多选题(共8题，共16分)7、A:B【分析】【分析】

1；试管婴儿技术是指通过人工操作使卵子和精子在体外条件下成熟和受精；并通过培养发育为早期胚胎后，再经移植后产生后代的技术。

2；设计试管婴儿技术是通过体外受精获得许多胚胎；然后从中选择符合要求的胚胎，再经移植后产生后代的技术。

【详解】

A；“设计试管婴儿”利用体外受精、胚胎移植、植入前胚胎遗传学诊断技术等；A正确；

B；“设计试管婴儿”与“试管婴儿”均利用了体外受精技术；均为有性生殖，B正确；

C；“设计试管婴儿”与“试管婴儿”都要进行胚胎选择；但二者选择的目的不同，C错误；

D；体外受精获得许多胚胎是“设计试管婴儿”的第一步；D错误。

故选AB。

【点睛】8、A:C:D【分析】【分析】

酵母菌是单细胞的真核生物；属于真菌，代谢类型是兼性厌氧型。在氧气充足时，酵母菌进行有氧呼吸，将葡萄糖分解为二氧化碳和水；在无氧条件下，进行无氧呼吸产生酒精和二氧化碳。

【详解】

A；利用酵母菌发酵的方式制作葡萄酒时；酵母菌进行无氧呼吸，葡萄糖在酵母菌细胞质基质内被分解成丙酮酸，A错误；

B；酵母菌繁殖需要空气；在完全隔绝空气的情况下，酵母菌繁殖几代就停止了，要维持酵母菌长时间发酵，必须供给一定的氧气，故制作葡萄酒时酵母菌先在有氧条件下大量增殖，B正确；

C、酵母菌发酵的后期，由于产生的CO2和其他代谢产物的积累；发酵液呈酸性，C错误；

D；酵母菌发酵产生的酒精会对酵母菌的生长产生抑制作用；D错误。

故选ACD。9、B:C:D【分析】【分析】

1；胚胎干细胞具有胚胎细胞的特性；在形态上表现为体积小，细胞核大，核仁明显；在功能上，具有发育的全能性，可分化为成年动物体内任何一种组织细胞。另外，在体外培养的条件下，可以增殖而不发生分化，可进行冷冻保存，也可进行遗传改造。

2；识图分析可知；图中①为早期胚胎的囊胚阶段，②为胚胎干细胞在体外培养的条件下，可以增殖而不发生分化，如在饲养层细胞上培养，③表示在胚胎干细胞体外诱导，分裂、分化形成各种组织和器官，培育出各种人造组织器官的过程。

【详解】

A.图中③过程为干细胞的诱导分化；通过该过程可定向培育人造组织器官，用于器官移植，解决供体器官不足和移植后免疫排斥的问题，A正确；

B.图中途径②没有发生细胞分化；所以研究细胞分化和细胞凋亡的机理可选择图中③途径，B错误；

C.细胞培养过程中，5%CO2的主要作用是调节培养液的pH；C错误；

D.②过程胚胎干细胞只分裂而不分化的培养；可在饲养层细胞上进行，饲养层细胞可作为干细胞分裂；增殖的营养细胞，也可在添加抑制因子的培养液中培养，使干细胞只分裂而不分化，D错误。

故选BCD。10、A:B【分析】【分析】

发酵工程是指采用现代工程技术手段；利用微生物的某些特定功能，为人类生产有用的产品，或直接把微生物应用于工业生产过程的一种技术。发酵工程的内容包括菌种选育；培养基的配制、灭菌、种子扩大培养和接种、发酵过程和产品的分离提纯（生物分离工程）等方面。

【详解】

A；柠檬酸是一种广泛应用的食品酸度调节剂；可以通过黑曲霉发酵制得，A正确；

B；可以将乙型肝炎病毒的抗原基因转入酵母菌通过发酵工程制备乙型肝炎疫苗；B正确；

C；利用发酵工程生产的白僵菌可以用来防治80多种农林害虫；C错误；

D；一种放线菌通过发酵工程产生的井冈霉素可以用来防治水稻枯纹病；D错误。

故选AB。

【点睛】11、A:B【分析】【分析】

单克隆抗体的制备。

（1）制备产生特异性抗体的B淋巴细胞：向免疫小鼠体内注射特定的抗原；然后从小鼠脾内获得相应的B淋巴细胞。

（2）获得杂交瘤细胞。①将鼠的骨髓瘤细胞与脾细胞中形成的B淋巴细胞融合。②用特定的选择培养基筛选出杂交瘤细胞；该杂种细胞既能够增殖又能产生抗体。

（3）克隆化培养和抗体检测。

（4）将杂交瘤细胞在体外培养或注射到小鼠腹腔内增殖。

（5）提取单克隆抗体：从细胞培养液或小鼠的腹水中提取。

【详解】

A；单克隆抗体制备过程中；需要给小白鼠注射肿瘤细胞表面抗原，刺激小鼠产生体液免疫，才能得到能产生特定抗体的B淋巴细胞，A正确；

B；制备单克隆抗体的过程中至少要经过两次原理和目的均不同的筛选过程；第一次筛选杂交瘤细胞，第二次筛选能产生特异性抗体的杂交瘤细胞，B正确；

C；生物导弹综合利用了单克隆抗体的定向制导作用和碱性磷酸酶的特异性杀伤能力；C错误；

D；根据题干信息“通过活化多柔比星使其对DNA造成损伤；进而抑制以DNA为模板进行的生理活动”，说明多柔比星还可以抑制细胞的转录过程，而不增殖的细胞也具有转录过程，D错误。

故选AB。12、A:C【分析】据图分析；①过程表示获取B淋巴细胞和骨髓瘤细胞；②过程促进细胞融合，采用离心；电刺激、聚乙二醇、灭活病毒等试剂诱导，筛选出杂交瘤细胞；④过程通过专一抗体检验阳性，筛选出能够产生特异性抗体的细胞群；⑥过程表示动物细胞培养。

【详解】

A；B淋巴细胞是从小鼠的脾脏中提取的；骨髓瘤细胞不是，A错误；

B；④中筛选能产生特定抗体的杂交瘤细胞；可以通过检测抗原、抗体反应，如果有反应说明表达了抗体，B正确；

C；④中的筛选是为了获得能产生一种抗体的杂交瘤细胞；C错误；

D；⑤可以无限增殖；也能产生特异性抗体，D正确。

故选AC。13、A:B:C【分析】【分析】

限制酶能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列；并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂，形成黏性末端和平末端两种。

【详解】

A；重组质粒pM5-SPN-leudh中除图中标注外；还应该具有终止子，复制原点等结构，A正确；

B；NdeI和BamHI两种酶切割形成的黏性末端不同；构建重组质粒用NdeI和BamHI两种酶切有助于目的基因正确插入，B正确；

C；KmR和A_pR为标记基因；图中KmR和A_pR存在于质粒中的作用是便于重组DNA分子的筛选，C正确；

D；限制酶和DNA连接酶的作用部位为磷酸二酯键；D错误。

故选ABC。14、A:B:C【分析】【分析】

1；DNA粗提取和鉴定的原理：（1）DNA的溶解性：DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同；DNA不溶于酒精溶液；但细胞中的某些蛋白质溶于酒精；DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性。（2）DNA的鉴定：在沸水浴的条件下，DNA遇二苯胺会被染成蓝色。

2；植物组织培养依据的原理为植物体细胞的全能性；即已经分化的细胞仍然具有发育成完整植株的潜能；培养过程的顺序是离体植物器官、组织或细胞（外植体）脱分化形成愈伤组织，再分化形成根、芽等器官进而形成新的植物体。

【详解】

A；DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同；当NaCl溶液的浓度为0.14mol/L时，DNA溶解度最小，因此改变NaCl溶液的浓度既能使DNA溶解也能使其析出，A错误；

B；细胞代谢产物的工厂化生产利用的是细胞培养技术；原理是细胞增殖，未体现细胞的全能性，B错误；

C；相同时加酶洗衣粉洗涤效果好于普通洗衣粉酶的催化作用需适宜的pH值；pH不适宜时，加酶洗衣粉洗涤效果不一定好于普通洗衣粉，C错误；

D；精子与卵子相遇后；会发生顶体反应，释放顶体酶，透明带反应和卵黄膜封闭作用是阻止其他精子入卵的两道屏障，其中透明带反应是防止多精入卵的第一道屏障，D正确。

故选ABC。三、填空题(共7题，共14分)15、略

【解析】①.胚胎细胞②.体细胞16、略

【解析】①.活菌②.培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌17、略

【解析】①.接种②.平板划线法③.稀释涂布平板法18、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】受体细胞19、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】2种引物DNA或RNA20—3020、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】3，5，DNA聚合酶不能从头开始合成，而只能从3，端延伸DNA子链的5，端向3，端21、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】茎尖极少或没有）胚状体人工薄膜不受季节的限制人工种皮；胚状体和人工胚乳。

（2）四、判断题(共4题，共28分)22、B【分析】【详解】

从牛卵巢中采集到卵母细胞后；接着对其进行的操作是先在体外培养到减数第二次分裂中期，再通过显微操作去除卵母细胞中的细胞核，获得去核的卵母细胞，再经核移植获得重组的受体细胞。

故该表述错误。23、B【分析】【详解】

基因工程技术可以使建立移植器官工厂的设想成为现实；说明并未开始实际应用。

故错误。24、B【分析】【详解】

要对蛋白质的结构进行设计改造，最终必须通过改造基因中的碱基序列来完成，因为基因能指导蛋白质的生物合成，故说法错误。25、A【分析】【详解】

中国政府对于“克隆人”的态度是禁止生殖性克隆人，积极支持制定《禁止生殖性克隆人国际公约》，坚决反对克隆人，不允许进行任何生殖性克隆人实验。故该说法正确。五、实验题(共3题，共30分)26、略

【分析】【分析】

I：核酸是生物有机体中的重要成分；在生物体中核酸常与蛋白质结合在一起，以核蛋白的形式存在。核酸分为脱氧核糖核酸（DNA）和核糖核酸（RNA）两大类，在真核细胞中，前者主要存在于细胞核中，后者主要存在于细胞质及核仁里。在制备核酸时，通过研磨破坏细胞壁和细胞膜，使核蛋白被释放出来。提取DNA有有多种方法，“CTAB法”和“SDS法”是提取DNA的常用方法，二者既有区别又有联系。

II：题图分析：A表示利用生殖细胞得到单倍体植株；B表示通过胚状体进行无性繁殖；其中①为脱分化；再分化；C为植物组织培养；D表示植物体细胞杂交，其中②是诱导原生质体融合。

【详解】

I：（1）液氮温度低，液氮中研磨会研磨得更充分，在液氮中研磨DNA酶活性低，降低DNA的分解；EDTA能螯合Mg2+、Mn2+；抑制DNA酶的活性，减少DNA水解，提高DNA的完整性和总量。

（2）氯仿-异戊醇密度均大于水且不溶于水；DNA不溶于氯仿-异戊醇，离心后，氯仿-异戊醇位于试管的底部，DNA溶于上清液中，所以离心后应该取上清液；含DNA的上清液中加异丙醇离心后取的是沉淀物，说明DNA不溶于异丙醇，而杂质能溶于异丙醇。

（3）从表中数据可知；CTAB法提取的DNA的OD260是0.033，而SDS法提取的DNA的OD260是0.006，0.033＞0.006，所以CTAB法提取的DNA较多，根据CTAB和SDS两种试剂作用的区别，可知CTAB提高了DNA在提取液中的溶解度，从而可提取出更多的DNA。

II：（1）植物组织培养过程中；整个过程应严格无菌无毒，利用图中的部分叶片进行植物组织培养时，需将其先用体积分数为70%的酒精消毒30s后，用无菌水清洗2-3次，再用次氯酸钠处理30min后，立即用无菌水清洗2-3次。

（2）为促进愈伤组织再分化；在配制分化培养基时需降低2，4-D的浓度。当玉米愈伤组织在只含有细胞分裂素的培养基上培养时，出现具有分生能力的绿色芽点，但要继续出芽，通常在培养基中添加适量的生长素，以促进苗形成。

（3）①芽是植物体中具有分生能力的组织；细胞排列紧密，①错误；

②刚融合的植物体细胞没有成熟的大液泡；无法构成渗透系统，不能发生质壁分离现象，②错误；

③胚状体细胞出现具有分生能力的绿色芽；因此其细胞内有叶绿体，③正确；

④分化的愈伤组织的结果形成了具有根和芽的胚状体；细胞的形态发生了变化，④错误。

故选③。

【点睛】

本题主要考查DNA提取原理、操作过程及实验结果的分析以及植物组织培养技术，意在考查学生读图能力和分析应用能力。【解析】研磨充分，低温抑制酶活性抑制DNA酶的活性，减少DNA水解，提高DNA的完整性和总量上清液DNA不溶于异丙醇，而杂质能溶于异丙醇CTABCTAB提高了DNA在提取液中的溶解度，从而能提取出更多的DNA（体积分数为70-75%）酒精降低（适量的）生长素③27、略

【分析】【分析】

微生物的培养；培养基的成分必须含有碳源；氮源、水和无机盐。获取纯净微生物的关键是防止外来杂菌入侵。实验室中目的菌株的筛选的原理：人为提供有利于目的菌株生长的条件（包括营养、温度、pH等），同时抑制或阻止其他微生物生长。

【详解】

（1）本实验是分离出降解的有机化合物A的菌种；所以培养基中加入化合物A的目的是筛选降解的有机化合物A的菌种，这种培养基属于选择培养基。

（2）分析培养基的配方可知；该培养基由化合物A；磷酸盐、镁盐以及微量元素配制而成，其他成分中为体现出提供碳源和氮源，因此化合物A为目的菌提供了碳源和氮源；在培养过程中应该振荡培养，增加培养液中的溶氧量，故目的菌是需氧微生物，呼吸作用的类型是有氧呼吸。

（3）获得纯净“目的菌”的关键是无菌技术；防止外来杂菌入侵。

（4）平板划线操作的工具是接种环；对于接种环的灭菌方法应该是灼烧灭菌。

（5））实验结束后；使用过的培养基应该进行灭菌处理后，才能倒掉，以杀死培养基上残留的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者。

（6）实验设计过程应遵循对照原则；该实验还应增设一组不接种的空白培养基作为对照，以证明培养基制备是否被杂菌污染，检验培养基是否灭菌合格。

【点睛】

本题考查微生物的分离和培养，要求考生识记无菌技术操作方法及接种微生物接种常用的两种方法，能结合所学的知识准确答题。【解析】筛选目的菌选择化合物A有氧呼吸防止外来杂菌入侵接种环灼烧防止造成环境污染不接种的空白培养基检验培养基是否灭菌合格28、略

【分析】【分析】

参与果酒的制作的微生物主要是酵母菌；其新陈代谢的类型为异养兼性厌氧型，较适宜的发酵温度为18~30℃。在无氧的环境中酵母菌把糖类分解为酒精和二氧化碳。在果酒制作过程中检测发酵液是否含有酒精，取样后滴加适量酸性重铬酸钾溶液并振荡，若观察到溶液颜色的变化是橙色变成灰绿色，则说明发酵液中含有酒精。

【详解】

（1）传统发酵酿酒与现代工业发酵酿酒都是利用了酵母菌的无氧呼吸。酵母菌属于真核生物；其代谢类型是兼性厌氧型，在有氧条件下进行大量增殖，在无氧条件下将葡萄糖分解为酒精。

橙色的重铬酸钾溶液在酸性条件下与乙醇（即酒精）发生化学反应；变成灰绿色，该实验目的是验证发酵过程中产生了酒精，因此实验自变量是是否加入发酵液，因变量为溶液颜色变化。对照组中应加入酒精作为阳性对照。实验过程中应遵循等量原则；单一变量原则等，因此实验思路是：取两支试管分别标号A、B，A试管中各加入2ml发酵液，作为实验组，B试管中各加入2ml酒精，作为对照组，两试管中都加入适量酸性重铬酸钾，振荡后观察试管中颜色变化，AB两试管都变为灰绿色，即可验证发酵过程中产生了酒精。

（2）传统发酵技术一般不进行严格灭菌操作；因此其发酵菌种为天然的混合菌种。现代工业发酵酿制果酒不同于自制果酒，需要经过沉淀；过滤、灭菌、装瓶等过程才能获得成品酒。

（3）25×16型的血细胞计数板计算公式：酵母细胞个数/1mL=1个中方格中酵母菌数×25×10000×稀释倍数，因此该实验中每毫升发酵液中酵母菌数量=9×25×10000×1000=2.25×109。

（4）酿酒利用酵母菌的无氧呼吸，需要关闭充气口，酿醋利用醋酸菌，醋酸菌是需氧型微生物，因此需向充气孔中充入无菌空气。【解析】(1)酵母菌是兼性厌氧微生物；在无氧条件下将葡萄糖分解为酒精实验思路：取两支试管分别标号A；B，向A试管中各加入2ml发酵液，向B试管中各加入2ml酒精，向AB两试管各滴加0．5ml溶有0．1g重铬酸钾的浓硫酸溶液（或酸性重铬酸钾），并轻轻震荡，观察试管中溶液颜色变化。

(2)混合菌种沉淀；过滤、灭菌。

(3)2.25×109

(4)酿酒时需关闭充气口，酿醋时则需向充气孔中充入无菌空气六、综合题(共3题，共9分)29、略

【分析】【分析】

1；基因工程又叫DNA重组技术；是指按照人们的意愿，进行严格的设计，并通过体外DNA重组和转基因等技术，赋予生物以新的遗传特性，从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。基因工程的基本操作步骤主要包括四步：①目的基因的获取，②基因表达载体的构建，③将目的基因导入受体细胞，④目的基因的检测与鉴定。

2；PCR全称为聚合酶链式反应；PCR技术是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术，原理是DNA复制，前提条件是要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一对引物，条件还包括模板DNA、四种脱氧核苷酸、一对引物、热稳定DNA聚合酶（Taq酶）。具体过程为：

（1）变性：当温度上升到90℃以上时；氢键断裂，双链DNA解旋为单链。

（2）复性：当温度降低到50℃左右是；两种引物通过碱基互补配对与两条单链DNA结合。

（3）延伸：温度上升到72℃左右；溶液中的四种脱氧核苷酸，在DNA聚合酶的作用下，根据碱基互补配对原则合成新的DNA链。

3；据图1分析；图中过程Ⅰ表示构建基因表达载体，是基因工程的核心步骤；过程Ⅱ表示将目的基因导入受体细胞；过程Ⅲ表示筛选含目的基因的受体菌的过程。

【详解】

（1）结合PCR技术过程分析；其原理是双链DNA复制，且Taq酶不能从头开始合成DNA，只能从引物的3′端延伸DNA链，则第3次扩增才会出现2个双链等长的目的基因，第4次扩增才会出现8个双链等长的目的基因；实验操作时，微量离心管中需加入的物质有：模板；引物、原料、缓冲液、Taq酶；结合图2分析可知，操作比较理想的泳道有4条。

（2）根据以上分析已知；图1中过程Ⅰ表示构建基因表达载体，该过程需要限制酶和DNA连接酶的催化；步骤Ⅱ表示将目的基因导入受体细胞，若受体细胞为细菌（微生物），可以用钙离子处理使之成为感受态；根据题干信息分析，图1中要先筛选出一种对三氯生抗性较强的重组质粒，因此步骤Ⅲ中所用的物质X应该是三氯生。

（3）根据题中信息及曲线图分析可知；在培养12h之后，pEA组（含三氯生）与pE2组（无三氯生）菌液浓度相差不大，而明显比pE2组（含三氯生）菌液浓度高，说明pEA组（含三氯生）对三氯生的抵抗作用效果最好，因此要“获得一种增强大肠杆菌对三氯生的抵抗作用效果较好的重组质粒”，所以适宜选作构建温度调控表达质粒的是pEA。

（4）①根据题意和图4分析，已知S1和S2是启动子，P1和P2是终止子，且H基因在高温下会抑制S1，L基因在低温下会抑制S2，现要低温下只表达GFP基因，高温下只表达lacZ基因，则lacZ基因应该插在启动子S2和终止子P2之间，GFP基因应该插在启动子S1和终止子P1之间；且不能破坏H基因和L基因。

②上述①中插入GFP基因成功的受体细胞（大肠杆菌）；则该大肠杆菌在含三氯生的培养基中可以生长，且低温下GFP基因可以表达，即有绿色荧光，而高温下GFP基因表达被抑制，即无绿色荧光。

【点睛】

本题考查基因工程有关知识，要求考生能够掌握基因工程的操作步骤，识记基因工程的操作工具，理解PCR技术的