2025届高三一轮复习生物：基因工程长句训练

基因工程长句训练1美西螈具有很强的再生能力。研究表明,美西螈的巨噬细胞在断肢再生的早期起重要作用。为研究巨噬细胞的作用机制,科研人员制备了抗巨噬细胞表面标志蛋白CD14的单克隆抗体,具体方法如下。回答下列问题:(1)载体和CD14片段的酶切位点及相应的酶切序列如图1所示。用XhoⅠ和SalⅠ分别酶切CD14和载体后连接,CD14接入载体时会形成正向连接和反向连接的两种重组DNA。可进一步用这两种限制酶对CD14的连接方向进行鉴定,理由是。

质粒DNA分子上有标记基因(如某种抗生素抗性基因),利用抗生素可筛选出含质粒载体的宿主细胞,方法是。表达载体含有启动子,启动子是指。

PCR技术可用于临床的病原菌检测。为检测病人是否感染了某种病原菌,医生进行了相关操作:①分析PCR扩增结果;②从病人组织样本中提取DNA;③利用PCR扩增DNA片段;④采集病人组织样本。回答下列问题:(1)PCR反应中退火的结果是

。

(2)PCR(多聚酶链式反应)技术是指。该技术目前被广泛地应用于疾病诊断等方面。

基因工程中可以通过PCR技术扩增目的基因。目前在PCR反应中使用Taq酶而不使用大肠杆菌DNA聚合酶的主要原因是。

博耶(H.Boyer)和科恩(S.Cohen)将非洲爪蟾核糖体蛋白基因与质粒重组后导入大肠杆菌细胞中进行了表达。该研究除证明了质粒可以作为载体外,还证明了

(答出两点即可)。

已知用CaCl2处理细菌,会改变其某些生理状态。取CaCl2处理过的农杆菌与重组质粒在离心管内进行混合等操作,使重组质粒进入农杆菌,完成转化实验。在离心管中加入液体培养基,置于摇床慢速培养一段时间,其目的是,从而表达卡那霉素抗性基因,并大量增殖。

真核生物基因中通常有内含子,而原核生物基因中没有,原核生物没有真核生物所具有的切除内含子对应的RNA序列的机制。已知在人体中基因A(有内含子)可以表达出某种特定蛋白(简称蛋白A)。回答下列问题:(1)某同学从人的基因组文库中获得了基因A,以大肠杆菌作为受体细胞却未得到蛋白A,其原因是。

(2)若用家蚕作为表达基因A的受体,在噬菌体和昆虫病毒两种载体中,不选用噬菌体作为载体,其原因是。

(3)若要高效地获得蛋白A,可选用大肠杆菌作为受体。因为与家蚕相比,大肠杆菌具有(答出两点即可)等优点。

(4)艾弗里等人的肺炎双球菌转化实验为证明DNA是遗传物质做出了重要贡献,也可以说是基因工程的先导,如果说他们的工作为基因工程理论的建立提供了启示,那么,这一启示是。

几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分,几丁质酶可催化几丁质水解。通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内,可增强其抗真菌病的能力。回答下列问题:(1)在进行基因工程操作时,若要从植物体中提取几丁质酶的mRNA,常选用嫩叶而不选用老叶作为实验材料,原因是。提取RNA时,提取液中需添加RNA酶抑制剂,其目的是。

(2)以mRNA为材料可以获得cDNA,其原理是

。

(3)若要使目的基因在受体细胞中表达,需要通过质粒载体而不能直接将目的基因导入受体细胞,原因是(答出两点即可)。

(4)若获得的转基因植株(几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中)抗真菌病的能力没有提高,根据中心法则分析,其可能的原因是。

分别将含M、N基因（目的基因）的重组质粒和酵母表达载体同时进行双酶切处理,然后利用DNA连接酶连接,将得到的重组表达载体转化大肠杆菌。用PCR快速验证重组转化是否成功。此反应可以用大肠杆菌悬液当模板的原因是。

对于PCR产物电泳结果符合预期的质粒,通常需进一步通过基因测序确认,原因是。

(1)质粒载体上有限制酶a、b、c的酶切位点,限制酶的切割位点如图所示。构建重组质粒时,与用酶a单酶切相比,用酶a和酶b双酶切的优点体现在(答出2点即可)。

(2)将重组质粒转入大肠杆菌前,通常先将受体细胞处理成感受态,感受态细胞的特点是。若要验证转化的大肠杆菌中含有重组质粒,简要的实验思路和预期结果是。

将天然Ti质粒改造成含有Vir基因的辅助质粒(辅助T-DNA转移)和不含有Vir基因、含有T-DNA的穿梭质粒,共同转入农杆菌,可提高转化效率。细菌和棉花对密码子偏好不同,为提高翻译效率,增强棉花抗病虫害能力,进行如下操作。回答下列问题。注:F1~F3,R1~R3表示引物;T-DNA-LB表示左边界;T-DNA-RB表示右边界;Ori表示复制原点;KanR表示卡那霉素抗性基因;HygBR表示潮霉素B抗性基因。(1)从苏云金杆菌提取DNA时,需加入蛋白酶,其作用是。提取过程中加入体积分数为95%的预冷酒精,其目的是。

(2)穿梭质粒中p35s为启动子,其作用是,驱动目的基因转录;插入两个p35s启动子,其目的可能是。

蛋白酶抑制剂基因转化是作物抗虫育种的新途径。某研究团队将胰蛋白酶抑制剂(NaPI)和胰凝乳蛋白酶抑制剂(StPin1A)的基因单独或共同转化棉花,获得了转基因植株。(1)蛋白酶抑制剂的抗虫机制是

。

(2)是实施基因工程的核心。

(3)利用农杆菌转化法时,必须将目的基因插入质粒的T-DNA上,此方法的不足之处是。

(4)基因突变可产生新的等位基因,在自然选择的作用下,昆虫种群的基因频率会发生定向改变,导致昆虫朝着一定的方向不断进化。据此推测,被蛋白酶抑制剂转基因作物长期选择后,某些昆虫具有了抗蛋白酶抑制剂的能力,其分子机制可能是(写出两点即可)。

基因工程长句训练1答案1.正向连接的重组DNA有这两种酶切位点(限制酶的识别序列);而反向连接的重组DNA会形成新的序列,没有这两种酶的酶切位点(没有限制酶的识别序列)2.将待筛选的宿主细胞接种到含该抗生素的培养基中,能够生长的是含有质粒载体的宿主细胞RNA聚合酶识别、结合并启动转录的DNA片段3.(1)引物通过碱基互补配对与单链DNA结合(2)在生物体外大量快速扩增特定DNA片段的技术4.Taq酶热稳定性高,而大肠杆菌DNA聚合酶在高温下会失活5.体外重组的质粒可以进入受体细胞;真核生物基因可在原核细胞中表达6.使CaCl2处理过的农杆菌恢复细胞的正常状态7.(1)基因A有内含子,在大肠杆菌中,其初始转录产物中与内含子对应的RNA序列不能被切除,无法表达出蛋白A(2)噬菌体的宿主是细菌,而不是家蚕(3)繁殖快、容易培养(4)DNA可以从一种生物个体转移到另一种生物个体8.(1)嫩叶组织细胞易破碎防止RNA降解(2)在逆转录酶的作用下,以mRNA为模板按照碱基互补配对的原则可以合成cDNA(3)目的基因无复制原点;目的基因无表达所需启动子(4)目的基因的转录或翻译异常9.热变性使大肠杆菌细胞破裂,DNA流出10.电泳只能测定DNA长度,不能确定碱基序列是否产生突变11.(1)避免质粒自身环化,防止目的基因反向连接到质粒上(2)能吸收周围环境中的DNA分子根据目的基因的序列设计特异性引物,提取大肠杆菌的DNA进行PCR,将扩增产物进行电泳,若出现特异性条带,说明含有重组质粒12.(1)使蛋白质水解使蛋白质等溶解在酒精中,DNA不溶于酒精而析出(2)RNA聚合酶