人教版2022年高三生物第二轮复习-专题八-第1讲-微生物的利用和生物技术在食品加工中的应用

第1讲微生物的利用和生物技术在食品加工中的应用[考纲要求]1.微生物的试验室培育。2.土壤中分解尿素的细菌的分别与计数。3.果酒及果醋的制作。4.胡萝卜素的提取。[构建网络]考点一微生物的利用1．有关微生物试验的基本方法(1)制备培育基：计算→称量→溶化→灭菌→倒平板。(2)无菌技术：主要指消毒和灭菌。(3)倒平板操作：待培育基冷却至50℃左右时，在酒精灯火焰四周倒平板(4)平板划线法：是通过接种环在琼脂固体培育基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培育基的表面。(5)稀释涂布平板法：先将菌液进行一系列的梯度稀释后涂布平板，在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的微生物将被分散成单个细胞，从而在培育基表面形成单个菌落。如图：2．土壤中分解尿素的细菌的分别与计数(1)分别——选择培育基。(2)计数①筛选菌株：利用选择培育基筛选菌株。②计数方法：稀释涂布平板法和显微镜直接计数法。③过程：土壤取样→样品的稀释→微生物的培育与观看。(3)鉴定方法：含酚红指示剂的尿素为唯一氮源的培育基→细菌→指示剂变红，则该菌能分解尿素。[错混诊断]1．在涂布接种前，随机取若干灭菌后的空白平板先行培育一段时间，这样做的目的是检测培育基上的细菌含量(2022·新课标Ⅱ，39(1)改编)(×)2．某争辩小组从有机废水中分别微生物用于废水处理。接种后的培育皿须放在光照培育箱中培育(2021·江苏，18C)(×)3．纯化菌种时，为了得到单菌落，常接受的接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法(2011·新课标，39(2)改编)(√)4．在琼脂固体培育基上长出的单个菌落含有多种细菌(2011·重庆，2A)(×)5．检测土壤中细菌总数试验操作中，确定对比组无菌后，选择菌落数在300以上的试验组平板进行计数(2009·安徽，6D)(×)6．培育微生物的培育基分装到培育皿后进行灭菌(2021·江苏，18A改编)(×)题组一从微生物的试验室培育进行命题1．(2022·新课标Ⅱ，39)为了调查某河流的水质状况，某争辩小组测定了该河流水样中的细菌含量，并进行了细菌分别等工作。回答下列问题：(1)该小组接受稀释涂布平板法检测水样中的细菌含量。在涂布接种前，随机取若干灭菌后的空白平板先行培育了一段时间，这样做的目的是__________________________________；然后，将1mL水样稀释100倍，在3个平板上用涂布法分别接入0.1mL稀释液；经适当培育后，3个平板上的菌落数分别为39、38和37。据此可得出每升水样中的活菌数为___________。(2)该小组接受平板划线法分别水样中的细菌。操作时，接种环通过________灭菌，在其次次及以后划线时，总是从上一次划线的末端开头划线。这样做的目的是_________________。(3)示意图A和B中，________表示的是用稀释涂布平板法接种培育后得到的结果。(4)该小组将得到的菌株接种到液体培育基中并混匀，一部分进行静置培育，另一部分进行振荡培育。结果发觉：振荡培育的细菌比静置培育的细菌生长速度快。分析其缘由是：振荡培育能提高培育液中________的含量，同时可使菌体与培育液充分接触，提高__________的利用率。答案(1)检测培育基平板灭菌是否合格3.8×107(2)灼烧将聚集的菌体逐步稀释以便获得单个菌落(3)B(4)溶解氧养分物质解析(1)为了检测培育基平板灭菌是否合格，可在涂布接种前，随机取灭菌后的空白平板先行培育一段时间。0.1mL稀释液中平均有(39＋38＋37)/3＝38个活菌，则每毫升稀释液中活菌的数目为38/0.1＝380，则稀释前每毫升水样中活菌数目为380×100＝3.8×104，则每升水样中活菌数目为3.8×104×1000＝3.8×107。(2)接种环、接种针等金属用具可直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧，以达到快速彻底灭菌的目的。在其次次及以后的划线时，总是从上一次划线的末端开头划线，其目的是将聚集的菌体逐步稀释以便获得单个菌落。(3)比较图A和图B可以看出：A培育基中细菌的分布呈线性，是用平板划线法接种培育后得到的结果；B培育基中细菌均匀分布，是用稀释涂布平板法接种培育后得到的结果。(4)振荡培育可以提高培育液中溶解氧的含量，还可以使菌体与培育液充分接触，提高了养分物质的利用率，因此振荡培育的细菌比静置培育的细菌生长速度快。题组二从微生物培育基的组成成分及纯化方法进行命题2．(2022·四川，10)有机农药苯磺隆是一种除草剂，长期使用会污染环境。争辩发觉，苯磺隆能被土壤中某些微生物降解。分别降解苯磺隆的菌株和探究其降解机制的试验过程如图甲、乙所示。(1)微生物生长繁殖所需的主要养分物质有碳源、水、__________四类，该试验所用的选择培育基只能以苯磺隆作为唯一碳源，其缘由是________________________。(2)与微生物培育基相比，植物组织培育的培育基常需添加生长素和________________，这些植物激素一般需要事先单独配制成________保存备用。(3)纯化菌株时，通常使用的划线工具是________。划线的某个平板培育后，第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌，其次划线区域所划的第一条线上无菌落，其他划线上有菌落。造成划线无菌落可能的操作失误有______________________________________________。(4)为探究苯磺隆的降解机制，将该菌种的培育液过滤离心，取上清液做图乙所示试验。该试验的假设是________________________________，该试验设计是否合理？为什么？________________________。答案(1)氮源和无机盐只有能利用苯磺隆的微生物能正常生长繁殖(2)细胞分裂素母液(3)接种环①接种环灼烧后未冷却；②划线未从第一区域末端开头(4)目的菌株能分泌降解苯磺隆的蛋白质不合理，缺少空白对比解析(1)微生物生长繁殖需要的主要养分物质包括碳源、氮源、水和无机盐四类。依据题意可知，土壤中某些微生物有降解苯磺隆的力量，该试验的目的是探究其降解机制，因此，需要分别出有降解苯磺隆力量的土壤中的某些微生物，故选择培育时为了排解其他碳源的干扰，培育基中唯一碳源只能是苯磺隆。(2)与微生物培育基相比，植物组织培育的培育基需要添加生长素和细胞分裂素，用于调整植物细胞脱分化和再分化；这些植物激素一般需要事先单独配制成母液保存备用。(3)纯化菌株时，通常使用的划线工具是无菌接种环。划线的平板培育后，发觉第一划线区域的划线上不间断地长满了菌，其次划线区域所划的第一条线上无菌落，而其他划线上有菌落。造成此现象的缘由可能有两个：一是接种环灼烧后未冷却，菌种接触到高温的接种环而死亡；二是划其次划线区域第一条线时未从第一区域末端开头。(4)依据图乙所示试验中的上清液加入蛋白酶溶液推想，试验目的是探究目的菌株是否能分泌降解苯磺隆的蛋白质，试验设计不合理之处是缺少不加蛋白酶溶液、其他条件同图乙的空白对比。用选择培育基分别微生物的方法(1)在基础培育基中加入抗性物质。举例：①加高浓度食盐分别金黄色葡萄球菌；②加青霉素分别酵母菌和细菌。(2)通过转变培育基的成分。举例：①培育基中缺乏氮源时，可分别自生固氮微生物，非自生固氮微生物因缺乏氮源而无法生存。②培育基中若缺乏有机碳源则异养微生物无法生存，而自养微生物可利用空气中的CO2制造有机物生存。(3)利用培育基的特定成分。举例：①当石油是唯一碳源时，可抑制不能利用石油的微生物的生长，使能够利用石油的微生物生存，从而分别出能消退石油污染的微生物。②当纤维素为唯一碳源时，分别纤维素分解菌。考点二果酒和果醋的制作果酒、果醋的制作果酒果醋原理把握条件O2无氧有氧温度18～2530～35试验流程图[错混诊断]1．醋酸菌在无氧条件下利用乙醇产生醋酸(2022·广东，4A)(×)2．酵母菌在无氧条件下利用葡萄汁产生酒精(2022·广东，4B)(√)3．某争辩性学习小组以樱桃番茄为材料进行果酒、果醋发酵试验。先供氧进行果醋发酵，然后隔绝空气进行果酒发酵(2022·江苏，14B改编)(×)4．在制作果醋时，假如条件适宜，醋酸菌可将葡萄汁中的糖分解成醋酸(2022·江苏，21B改编)(√)5．在家庭中用鲜葡萄制作果酒时，让发酵装置接受光照并放在45℃处(2010·北京，1AD改编)(×题组从果酒、果醋的制作原理和方法进行命题1.(2022·江苏，24改编)某同学设计了如图所示的发酵装置，下列有关叙述不正确的是()A．该装置可阻挡空气进入，用于果酒发酵B．该装置便于果酒发酵中产生的气体排出C．去除弯管中的水，该装置可满足果醋发酵时底层发酵液中大量醋酸菌的呼吸D．去除弯管中的水后，该装置与巴斯德的鹅颈瓶作用相像答案C解析A项，该装置中注水的弯曲部分可阻挡空气进入，能用于果酒发酵。B项，果酒发酵产生的CO2可溶解在弯管的水中，CO2量多时可进一步通过水排出。C项，醋酸菌是好氧菌，因没有将无菌空气通入发酵液中，故去除弯管中的水后也不能满足底层发酵液中醋酸菌有氧呼吸的需求。D项，去除弯管中的水后，该装置的弯管部分既能排出CO2，也能防止空气中的微生物进入，与巴斯德的鹅颈瓶作用类似。2.下图是果醋和果酒的发酵装置，相关描述错误的是()A．出料口可以用来取样B．排气口能排出酒精发酵时产生的二氧化碳C．充气口在醋酸发酵时要连接充气泵进行充气D．充气口的开关始终要处于打开状态答案D解析醋酸菌是需氧型微生物，酿制果醋时需始终充气维持有氧环境。而酵母菌是兼性厌氧菌，酿造果酒时，先通过充气口充气使酵母菌大量繁殖，然后关闭充气口，造成无氧环境，使酵母菌发酵产生酒精。所以D选项充气口的开关始终要处于打开状态是错误的。1.果酒和果醋发酵装置的设计思路(1)酵母菌繁殖需要氧气，醋酸菌是好氧细菌，则果酒制作前期和果醋制作整个过程都需要氧气；酵母菌产生酒精时是厌氧的，则在充气口处应当设置开关。(2)发酵过程中产生CO2，需要设置排气口；为了防止空气中微生物污染，排气口应当连接一个长而弯曲的胶管。(3)为便于取样及监测发酵状况，需要设置出料口。2．制作果酒、果醋菌种的比较项目酵母菌醋酸菌生物学分类真核生物原核生物代谢类型异养兼性厌氧型异养需氧型生产应用酿酒、发面酿醋氧的需求前期需氧，后期厌氧始终需氧考点三胡萝卜素的提取1．胡萝卜素的提取(1)胡萝卜素的性质：不溶于水，微溶于乙醇，易溶于石油醚等有机溶剂。(2)试验设计①方法：萃取法，石油醚最适宜作萃取剂。②试验流程(3)鉴定方法：纸层析法。2．萃取过程的留意事项(1)避开明火加热，接受水浴加热——防止引起燃烧、爆炸。(2)在加热瓶口安装冷凝回流装置——防止有机溶剂挥发。(3)萃取液的浓缩可直接使用蒸馏装置，浓缩前要进行过滤。[错混诊断]1．用萃取法提取薄荷油时，接受的溶剂是酒精，原理是薄荷油易溶于有机溶剂酒精中(2011·海南，30(2)改编)(√)2．用萃取法提取胡萝卜素的主要步骤是：干燥、粉碎、萃取、浓缩、过滤(×)3．在胡萝卜颗粒的加热干燥过程中，温度过高和时间过长会导致胡萝卜素分解(2008·宁夏，37(3)改编)(√)4．提取的胡萝卜素可通过纸层析法进行鉴定，在鉴定过程中不需要对比(2008·宁夏，37(4)改编)(×)题组从提取胡萝卜素的原理、方法进行命题(2022·山东，34)胡萝卜素是一种常用的食用色素，可分别从胡萝卜或产胡萝卜素的微生物菌体中提取获得，流程如下：(1)筛选产胡萝卜素的酵母菌R时，可选用____________或平板划线法接种。接受平板划线法接种时需先灼烧接种环，其目的是______________________________________________。(2)培育酵母菌R时，培育基中的蔗糖和硝酸盐可分别为酵母菌R的生长供应____________和____________。(3)从胡萝卜中提取胡萝卜素时，干燥过程应把握好温度和________________以防止胡萝卜素的分解；萃取过程中宜接受________________方式加热以防止温度过高；萃取液浓缩前需进行过滤，其目的是________________。(4)纸层析法可用于鉴定所提取的胡萝卜素。鉴定过程中需用胡萝卜素标准品作为_____。答案(1)稀释涂布平板法杀灭接种环上的微生物(2)碳源氮源(3)干燥时间水浴加热滤去萃取后的固体物(4)对比解析(1)接种微生物的方法主要是稀释涂布平板法和平板划线法，接种过程为了避开其他杂菌的污染，要做无菌操作，所以接种前需对接种环灭菌操作。(2)蔗糖主要供应碳源，当然也可以作为能源物质，硝酸盐含氮元素，可供应氮源。(3)温度过高、干燥时间过长会导致胡萝卜素分解；由于萃取剂往往有挥发性，直接加热时挥发出来的有机溶剂遇明火易爆炸；萃取后需将原料中的固体物滤去。(4)提取出来的胡萝卜素往往不是纯的，用标准样品主要起一个对比的作用。胡萝卜素粗品鉴定过程中的5个易错点(1)层析时没有选择洁净的滤纸，导致试验现象不明显：为了防止操作时对滤纸的污染，应尽量避开用手直接接触滤纸，可以戴手套进行操作。(2)点样时点样圆点太大(直径大于2mm)，导致最终在滤纸上形成一条线，无法辨认被提取的色素：点样圆点的直径应为2mm。(3)将点好样的滤纸卷成筒状，卷纸时不能将滤纸两边相互接触：以避开由于毛细管现象导致溶剂沿滤纸两边的移动加快，溶剂前沿不齐，影响结果。(4)层析液没及样品原点，色素溶解于层析液中，造成试验失败：层析液不行没及样品原点，以免色素溶解于层析液中，使鉴定失败。(5)没设置标准样品作对比：层析液中是否提取到胡萝卜素，可通过与标准样品中的β－胡萝卜素作对比予以确认。专题突破练1．下列关于微生物分别和培育的叙述，错误的是()A．微生物培育前，需对培育基进行消毒B．测定土壤样品中的细菌数目，常用菌落计数法C．分别土壤中不同的微生物，要接受不同的稀释度D．分别能分解尿素的细菌，要以尿素作为培育基中的唯一氮源答案A解析微生物培育前，需对培育基进行灭菌，而不是消毒；测定土壤样品中的细菌数目，常用菌落计数法；分别土壤中不同的微生物，要接受不同的稀释度，由于不同的微生物在土壤中的含量不同；分别能分解尿素的细菌，要以尿素作为培育基中的唯一氮源。2．下列关于果酒和果醋的制作原理、发酵过程的叙述中，错误的是()A．果酒和果醋的发酵菌种不同，但代谢类型相同B．制作果酒和果醋时都应用体积分数为70%的酒精对发酵瓶消毒C．变酸果酒的表面观看到的菌膜可能是醋酸菌的菌落D．果酒和果醋的制作可用同一装置，但需把握不同的发酵条件答案A解析果酒发酵利用的是酵母菌，酵母菌的代谢类型是异养兼性厌氧型，果醋发酵利用的是醋酸菌，醋酸菌的代谢类型是异养需氧型。3．欲从土壤中分别出能分解尿素的细菌，下列试验操作中，不正确的是()A．将土壤用无菌水进行一系列的梯度稀释B．同一浓度的土壤稀释液应至少涂布三个平板C．可将未接种的培育基在相同条件下培育作为对比D．用加入刚果红指示剂的培育基可筛选出分解尿素的细菌答案D解析为了获得单个菌落，应将土壤用无菌水进行一系列的梯度稀释，A正确；为了使结果更加精确     ，同一浓度的土壤稀释液至少要涂布3个平板进行重复试验，然后计算平均值，B正确；加入刚果红的培育基用来筛选纤维素分解菌，D错误。4．微生物强化采油(MEOR)是利用某些微生物能降解石油，增大石油的乳化度，降低石油粘度的原理，通过向油井中注入含微生物的水来提高采油率的新技术。以下是筛选、纯化和扩大培育该类微生物的试验操作。请回答下列问题：(1)土壤是微生物的大本营，该类微生物应取自________________的土壤。(2)为筛选和纯化该类微生物，从功能上分，应选用________________培育基。常用的接种方法是________________________和________________。(3)接种后，应密封培育的缘由是________________，培育一段时间后在培育基上形成降油圈，此时选取________________的菌落就可获得高效菌株。(4)扩大培育过程中需要对微生物进行计数。取0.2mL样品，用固体培育基对其培育，最终统计三个平板，菌落数分别是200、180、220。则样品中微生物的数量为________个/mL。该统计结果________(填“低于”或“高于”)实际值。答案(1)长期被石油污染(含石油多的)(2)选择平板划线法稀释涂布平板法(3)该类微生物是厌氧型微生物降油圈大(4)1000低于解析(1)依据微生物对生存环境的要求，该类微生物应到相应的环境中查找，即被石油污染的环境或含石油较多的环境。(2)筛选微生物常用选择培育基，纯化微生物常用的方法有平板划线法和稀释涂布平板法。(3)由于该类微生物是厌氧微生物，因此接种后应密封培育，一段时间后在培育基上形成降油圈，此时选取降油圈较大的菌落就可获得高效菌株。(4)依据公式计算菌株数：C＝(200＋180＋220)÷3＝200，V＝0.2，M＝1，则样品中微生物数量为eq\f(C,V)·M＝1000个/mL。在统计菌落时，有些活菌在培育过程中死亡，另外有些菌落是由多个活菌共同形成的，所以按形成的菌落数目来计算活菌数目的话，结果往往会低于活菌实际数目。5．如图简洁表示葡萄酒的酿制过程，请据图分析：(1)葡萄酒的酿制原理是：先通气使酵母菌进行________________，以增加酵母菌的数量，然后使酵母菌发酵获得葡萄酒。(2)随着发酵过程的加深，液体密度会渐渐变低(可用密度计测量)。其缘由是________________________________________________________________________。(3)在甲中进行搅拌的目的是________________，丙中一段时间后，揭开盖子是否能够产生果醋？________(填“能”或“不能”)。(4)苹果醋是最受欢迎的饮料之一，其生产过程中利用了________________的发酵作用。在传统发酵技术中，果醋制作往往在果酒制作的基础上进行，其相关的反应式为：________________________________________________________________________。答案(1)有氧呼吸(2)发酵时糖被消耗，产生了酒精和CO2，而酒精密度比糖和水低(3)增加溶氧量能(4)醋酸菌C2H5OH＋O2醋酸菌,CH3COOH＋H2O解析(1)酵母菌为一种兼性厌氧真菌，在有氧状况下可进行有氧呼吸，缺氧则进行无氧呼吸。(2)由于发酵时糖被消耗，产生酒精和CO2，而酒精的密度比糖和水低，这是液体密度降低的缘由。(3)搅拌可增加甲内溶氧量，酵母菌有氧呼吸需要氧。揭盖后氧气充分，丙中酒精可在醋酸菌作用下被氧化生成醋酸。(4)果醋制作过程中，起作用的微生物主要是醋酸菌。6．(2022·江苏，30)为了获得β­胡萝卜素产品，某小组开展了产β­胡萝卜素酵母的筛选与色素提取试验。请回答下列问题：(1)试验用的培育皿常用的两种灭菌方法是________________________________；为了削减灭菌后器皿被污染，灭菌前应当________________________。(2)为了筛选出酵母菌，培育基中添加了青霉素，其目的是__________________________。(3下图是灭菌锅及其局部剖面示意图，图中甲、乙、丙指示的依次是________。(填序号)①平安阀、放气阀、压力表②放气阀、平安阀、压力表③平安阀、放气阀、温度表④放气阀、平安阀、温度表(4)为了将分别到的菌株纯化，挑取了菌落在3块相同平板上划线，结果其中一块平板的各划线区均未见菌生长，最可能的缘由是__________________________________________。(5)为增加β­胡萝卜素提取量，在研磨酵母细胞时，添加石英砂的目的是______________；研磨时__________(填“需要”或“不需要”)添加CaCO3，理由是_____________________。答案(1)干热灭菌和湿热灭菌(高压蒸汽灭菌)用牛皮纸(报纸)包扎器皿(2)抑制细菌(放线菌)生长(3)①(4)接种环温度过高，菌被杀死(5)有助于研磨充分不需要β­胡萝卜素较耐酸解析(1)培育皿灭菌常用的方法有湿热灭菌(高压蒸汽灭菌)、干热灭菌等。将培育皿放入灭菌锅之前通常用牛皮纸或报纸包扎，避开灭菌后的再次污染。(2)青霉素能抑制细菌和放线菌的生长繁殖，但对酵母菌等真菌不起作用，因此添加青霉素可筛选出酵母菌。(3)图中乙连接软管，为排(放)气阀，甲为平安阀，丙是压力表。(4)三块平板中有两块平板长有菌落，说明含有菌株并可在培育基上生长；而其中一块平板未见菌落，说明接种不成功，可能是接种环灼烧后未冷却或未充分冷却，使菌株因温度过高而被杀死。(5)从β­胡萝卜素酵母中提取β­胡萝卜素，参照叶绿体中色素提取的方法，可添加石英砂，由于石英砂有助于研磨充分。在提取叶绿体中色素时，CaCO3的作用是中和酸性物质，防止叶绿素被分解，而β­胡萝卜素较耐酸，不易被分解，故在研磨酵母细胞时无需添加CaCO3。7．从自然菌样中筛选抱负的生产菌种的一般步骤是：采集菌样→选择培育→纯种分别→性能测定。(1)不同微生物的生存环境不同，获得抱负微生物的第一步是从适合的环境采集菌样，然后再按肯定的方法分别、纯化。若培育噬盐菌的菌样应从________环境中采集。(2)选择培育指创设特定环境条件，使待分别微生物在群落中的数量大大增加，从而达到从自然菌样中分别到所需特定微生物的培育方法。人们对富含耐高温淀粉酶的微生物选择培育应选择以____________为唯一碳源的选择培育基，并在________条件下培育。(3)试验室最常用的灭菌方法是利用高温处理达到杀菌的效果。高温灭菌的原理是高温使微生物的________________等物质发生变性。________灭菌法是微生物争辩中应用最广、效果最好的湿热灭菌法。(4)下图甲表示在平板培育基上的第一次和其次次划线，请在图乙中画出第三次划线。划线后在恒温培育箱中培育时，培育皿须倒置，目的是__________________。(5)植物组织培育过程中也要格外留意灭菌及避开被杂菌污染。在配制好的MS培育基中，若要促进愈伤组织的生长，需要进行的处理是________________________。答案(1)高盐(2)淀粉高温(3)蛋白质和核酸高压蒸汽(4)如右图避开培育皿盖上的水滴污染培育基(5)添加比例适中的生长素和细胞分裂素解析(1)嗜盐菌就生活在高盐环境中，如海滩等环境。(2)耐高温淀粉酶应存在于以淀粉为唯一碳源且在高温环境中生存的微生物体内。(3)试验室最常用的灭菌方法是利用高温处理达到杀菌的效果。高温灭菌的原理是高温使微生物的蛋白质和核酸等物质发生变性，高压蒸汽灭菌法是微生物争辩和教学中应用最广、效果最好的湿热灭菌法。(4)每划一个新区域前都要对接种环进行灭菌处理。(5)在配制好的MS培育基中，添加比例适中的生长素和细胞分裂素可促进愈伤组织的生长。8．某化工厂的污水池中，含有一种有害的、难于降解的有机化合物A。争辩人员用化合物A、磷酸盐、镁盐以及微量元素配制的培育基，成功地筛选到能高效降解化合物A的细菌(目的菌)。试验的主要步骤如图所示。请分析回答问题：(1)培育基中加入化合物A的目的是筛选____________，这种培育基属于____________培育基。(2)“目的菌”生长所需的氮源和碳源是来自培育基中的____________，试验需要振荡培育，由此推想“目的菌”的代谢类型是____________。(3)培育若干天后，应选择培育瓶中化合物A含量____________的培育液，接入新的培育液中连续培育，使“目的菌”的数量__________。(4)转为固体培育时，常接受______________的方法接种，获得单菌落