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文档简介
DBS江苏省卫生和计划生育委员会发布I1食品安全地方标准食源性致病微生物快速检测核细胞增生李斯特氏菌、大肠埃希氏菌O157：H7、副溶血性弧菌和志贺氏菌）：），3.6引物和探针：引物和探针序列见附录2）：3.7.3亚硒酸盐胱氨酸（SC）增菌）：恒温空气振荡摇床，200r/min振温空气振荡摇床，200r/min振摇4ºC、200r/min振摇4h；移取0.1mL，r/min，4ºC离心5min，取上清，-20ºC保存，作为模板DNA备用。注：也可使用商品化的细菌DNA提取试剂盒，按照试剂盒说明书操作提取3阳性对照应出现典型扩增曲线，Ct值<30；同时，阴性对照和空白对照应未检出；Ct值≤35，样品结果为阳性；Ct值>35而<40，为可疑结果。阳性结果与可疑结果须按照相应GB4789标准进行检验，根据国家标准方法得出的结果判4.5检测过程中防止交叉污染及生物安全检测过程中防止交叉污染按照GB/T27403中的规定执行，4A.1致病菌实时荧光PCR法中所用的引物探针序列见表A.AATATTAATTGT-3’5’-CGCACAAGGCTCGACGGCTCATC-3’CCTGCGACA-3’GCTTT-3’ACCTTTGTA-3’AACCTGGT-3’CTGG-3’CTA-3’TACCAAAGG-3’A-3’GTC-3’ATGGTCTCAA-3’TTAAGG-3’CAAGGTGAT-3’TTCC-3’AA-3’
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