《食品中禁用水溶性合成色素的测定》

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团体标准

T/GDFDTAECXXXX—XXXX

食品中禁用水溶性合成色素的测定

Determinationofprohibitedwater-solublesyntheticcolourinfood

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XXXX-XX-XX发布XXXX-XX-XX实施

广东省食品药品评审认证技术协会  发布

T/GDFDTAECXX—2023

食品中禁用水溶性合成色素的测定

1范围

本标准规定了食品中32种禁用水溶性合成色素（见附录A）的液相色谱-串联质谱检测方法。

本标准适用于饮料、糖果、调味酱、豆制品、熟肉等食品中32种禁用水溶性合成色素的测定。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，

仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本

文件。

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法

GB/T33087仪器分析用高纯水规格及试验方法

3术语和定义

本文件没有需要界定的术语和定义。

4方法原理

试样经甲醇或5%氨水-甲醇溶液提取，提取液经氮吹置换溶剂后，经C18萃取小管净化，利用液相色

谱-串联质谱仪测定，外标法定量。

5试剂和材料

除另有说明，本实验使用试剂均为分析纯，水为GB/T6682中规定的一级水或GB/T33087中规定的

高纯水。

甲醇（CH4O）：色谱纯。

乙酸铵（CH3COONH4）：色谱纯。

十八烷基硅烷键合硅胶（C18材料）：粒径40~60μm。

氨水（NH3·H2O）：含量20%~25%

5%氨水-甲醇溶液：移取5.00ml氨水于100ml容量瓶中，甲醇定容。

10%甲醇水溶液：移取10ml甲醇于100ml容量瓶中，水定容。

标准品：色素标准品见附录B，纯度≥95%，或经国家认证并授予标准物质证书的标准物质。

标准溶液配制

5.8.1标准储备溶液（1000mg/L）：分别准确称取经折算相当于50mg（精确到0.1mg）的色素标准品，

置50mL容量瓶中，用甲醇定容到刻度。

5.8.2混合标准储备液A组（10mg/L）：根据附录A化合物的浓度分组，准确移取1.00mL的A组色素

单标储备溶液于100mL容量瓶中，用甲醇定容到刻度。

5.8.3混合标准储备液B组（100mg/L）：根据附录A化合物的浓度分组，准确移取1.00mL的A组色

素单标储备溶液于10mL容量瓶中，用甲醇定容到刻度。

5.8.4混合标准中间液A组（1mg/L）：准确移取1.00mL混合标准储备液A组于10mL容量瓶中，用甲

醇定容到刻度。

5.8.5混合标准中间液B组（10mg/L）：准确移取1.00mL混合标准储备液B组于10mL容量瓶中，用

1

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甲醇定容到刻度。

5.8.6混合标准工作溶液：根据需要，用10%甲醇水溶液将混合标准中间液稀释成所需的标准工作溶

液。

6仪器和设备

液相色谱-串联质谱仪（LC-MS/MS）：配有电喷雾电离源（ESI）。

分析天平：感量为0.1mg、0.01mg。

离心机：转速不低于8000r/min。

超声波清洗器。

氮吹仪。

7分析步骤

试样制备

碳酸类饮料加热或超声去除二氧化碳。豆制品、熟肉类食物等粉碎机搅碎混匀。

试样提取

7.2.1固体、半固体试样

糖果：称取2.00g（准确至0.01g）于小烧杯中，加入5ml甲醇，微热溶解后，溶液转移至10ml比色

管，用甲醇多次洗涤烧杯，洗液合并至比色管，然后定容至刻度。准确移取2.00mL至含有50mgC18材料

的净化管中，涡旋1min，在8000r/min下离心5min。取1mL上清液用水稀释至10mL，过0.22μmPTFE滤膜，

待测。

其他：称取2.00g（准确至0.01g）试样于50mL离心管中，加入10mL5%氨水-甲醇溶液，超声5min，

在8000r/min下离心5min，重复提取一遍，合并上清液。准确移取2.00mL上清液于氮吹仪上氮吹至干，

用2.00mL甲醇复溶，转移至含有50mgC18材料的净化管中，涡旋1min，在8000r/min下离心5min。取1mL

上清液用水稀释至10mL，过0.22μmPTFE滤膜，待测。

7.2.2液体试样

称取液体样品1.00g（准确至0.01g）于10mL比色管，用甲醇定容至刻度。准确移取2.00mL至含有

50mgC18材料的净化管中，涡旋1min，在8000r/min下离心5min。取1mL上清液用水稀释至10mL，过

0.22μmPTFE滤膜，待测。

每个样品做2个平行测试，同时做空白测试。

仪器参考条件

7.3.1液相色谱参考条件

a)色谱柱：C18柱，100mm×2.1mm，1.8μm，或同等性能的色谱柱；

b)流动相：A为5mmol/L乙酸铵水溶液，B为甲醇；梯度洗脱条件见表1；

c)柱温：40℃；

d)进样量：2μL；

e)流速：0.4mL/min。

表1液相色谱梯度洗脱条件

时间（min）流动相A（%）流动相B（%）

0.00982

1.00982

15.00595

18.00595

2

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21.00982

7.3.2质谱参考条件

a)离子源类型：电喷雾电离源（ESI）；

b)扫描方式：负离子电离模式；

c)检测方式：多反应监测MRM；

d)毛细管电压：-2.5kV；

e)离子源温度：150℃；

f)脱溶剂气温度：500℃

g)脱溶剂气流速：1000L/h；

h)锥孔气流速：150L/h；

i)定性离子对、定量离子对、去簇电压和碰撞能量参见附录A。

测定法

7.4.1定性测定

在同样测试条件下，试样溶液中禁用水溶性合成色素的保留时间与标准溶液相应峰的保留时间相对

偏差在±25%以内，且检测到的相对离子丰度，应当与浓度相当的标准溶液相对丰度一致。其允许偏差

应符合表2的要求。

表2定性确证时相对离子丰度的最大允许偏差

相对离子丰度/%＞5020～5010～20≤10

允许相对偏差/%±20±25±30±50

7.4.2定量测定

取试样溶液和相应的标准溶液，作单点或多点校准，以特征离子质量色谱峰面积定量，按外标法计

算。标准工作液及试样溶液中的禁用水溶性合成色素响应值均应在仪器检测的线性范围内。在上述色谱

-质谱条件下，标准溶液特征离子质量色谱图见附录B。

空白试验

取空白试样，除不加标准溶液外，采用相同的测定步骤进行平行操作。

8结果计算和表述

试样中各色素含量按式（1）计算：

····················································(1)

�

式中：�×�×�

�=�×��×1000

X—样品中相应的色素含量的数值，单位为毫克每千克（mg/kg）；

CS—标准溶液中相应色素浓度的数值，单位为纳克每毫升（ng/mL）；

A—样品溶液中相应的色素峰面积；

AS—标准溶液中相应的色素峰面积；

V—样品定容体积，单位为毫升（mL）；

m—样品质量的数值，单位为克（g）。

计算结果保留2位有效数字。

9精密度

3

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在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的20%。

10其他

本方法禁用水溶性合成色素的检出限为0.3mg/kg（A组化合物）、3.0mg/kg（B组化合物）。

4

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A

A

附录A

（规范性）

禁用水溶性合成色素的母离子、子离子、去簇电压、碰撞能量、保留时间和检出限

禁用水溶性合成色素的母离子、子离子、去簇电压、碰撞能量、保留时间和检出限见表A.1。

表A.1禁用水溶性合成色素的母离子、子离子、去簇电压、碰撞能量、保留时间和检出限

标准溶定量离子定性离子

序母离子定量离子定性离子去簇电压保留时间检出限

中文名称英文名称液浓度碰撞电压碰撞电压

号(m/z)(m/z)(m/z)(V)(min)(mg/kg)

分组(V)(V)

1酸性红1Acidred1A组231.4179.2158.13010156.100.3

2酸性红73Acidred73A组255.0150.7241.31010109.020.3

3酸性橙IIAcidorangeIIA组327.0171.2156.23030309.530.3

4橙黄IVAcidorangeIVA组352.0156.279.92030459.960.3

5甲基橙MethylOrangeA组303.9156.2288.23030308.750.3

6酸性红52AcidRed52A组557.1433.080.02045409.560.3

7酸性红87AcidRed87A组642.7518.6440.91025309.340.3

8酸性红265AcidRed265A组294.6157.2*235.21015108.970.3

9铬变素2BChromotrope2BA组233.3158.6126.72020156.090.3

10铬变素2RChromotrope2RA组211.2158.680.01015255.910.3

11酸性红26AcidRed26A组216.8150.5*143.12015157.610.3

12酸性橙20AcidOrange20A组326.9171.2247.24025208.280.3

二甲苯青

13XyleneCyanolFFA组515.1435.1406.15030358.380.3

FF

14酸性蓝3AcidBlue3A组559.1479.0435.02030459.530.3

15酸性紫34AcidViolet34B组577.1496.9417.140254010.973.0

16酸性黄36Acidyellow36A组352.0156.279.740254510.250.3

17酸性橙10Acidorange10A组202.9150.6145.11010305.100.3

18胭脂红SXPonceauSXA组217.1170.280.03015208.160.3

19酸性紫9AcidViolet9A组589.2185.2544.150404010.800.3

20坚牢绿Foodgreen3A组381.3170.2340.91040157.950.3

21丽春红3RPonceau3RA组224.0136.7150.23020158.310.3

PontacylViolet

22滂酰紫6RA组235.7158.6126.74010208.280.3

6R

23荧光素钠UranineA组331.1286.4285.24020358.230.3

滂酰洋红Pontacyl

24A组246.4179.1158.11015206.850.3

2BCarmine2B

25酸性黄11AcidYellow11A组357.0237.2207.820203510.190.3

26酸性橙8AcidOrange8A组341.0185.2169.840203510.180.3

27酸性红71AcidRed71A组269.1136.7209.820251510.490.3

28酸性蓝7AcidBlue7B组667.3560.9481.010404010.253.0

29酸性蓝62AcidBlue62B组399.1316.1225.150354511.473.0

30酸性紫7AcidViolet7A组259.9178.9*158.23013155.720.3

31酸性蓝41Acidblue41B组464.1370.1400.050453510.853.0

32酸性兰27Acidblue27B组421.180.0341.130352511.033.0

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B

B

附录B

（资料性）

禁用水溶性合成色素的英文中文名称对照索引

禁用水溶性合成色素的中英文名称对照索引（按英文字母顺序），见表B.1。

表B.1禁用水溶性合成色素的中英文名称对照索引（按英文字母顺序）

附录中的序

序号A中文名英文名号分子式

号CAS

132酸性兰27Acidblue276408-51-1C22H17N2NaO5S

214酸性蓝3AcidBlue320262-76-4C27H31N2NaO7S2

331酸性蓝41Acidblue412666-17-3C23H18N3NaO6S

429酸性蓝62AcidBlue624368-56-3C20H20N2O5S

528酸性蓝7AcidBlue73486-30-4C37H35N2NaO6S2

617酸性橙10Acidorange101936-15-8C16H10N2Na2O7S2

712酸性橙20AcidOrange20523-44-4C16H11N2NaO4S

826酸性橙8AcidOrange85850-86-2C17H13N2NaO4S

93酸性橙IIAcidorangeII633-96-5C16H11N2NaO4S

104橙黄IVAcidorangeIV554-73-4C18H14N3NaO3S

111酸性红1Acidred13734-67-6C18H13N3Na2O8S2

1211酸性红26AcidRed263761-53-3C18H14N2Na2O7S2

138酸性红265AcidRed2656358-43-6C24H19N3Na2O9S3

146酸性红52AcidRed523520-42-1C27H29N2NaO7S2

1527酸性红71AcidRed716226-76-2C24H18N4Na2O7S2

162酸性红73Acidred735413-75-2C22H14N4Na2O7S2

177酸性红87AcidRed8717372-87-1C20H6Br4Na2O5

1815酸性紫34AcidViolet346408-63-5C28H20N2Na2O8S2

1930酸性紫7AcidViolet74321-69-1C20H16N4Na2O9S2

2019酸性紫9AcidViolet96252-76-2C34H25N2NaO6S

2125酸性黄11AcidYellow116359-82-6C16H13N4NaO4S

2216酸性黄36Acidyellow36587-98-4C18H14N3NaO3S

239铬变素2BChromotrope2B548-80-1C16H9N3Na2O10S2

2410铬变素2RChromotrope2R4197-07-3C16H10N2Na2O8S2

2520坚牢绿Foodgreen32353-45-9C37H34N2O10S3Na2

265甲基橙MethylOrange547-58-0C14H14N3NaO3S

2721丽春红3RPonceau3R3564-09-8C19H16N2Na2O7S2

2818胭脂红SXPonceauSX4548-53-2C18H14N2Na2O7S2

2924滂酰洋红2BPontacylCarmine2B6625-46-3C19H15N3Na2O9S2

6

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附录中的序

序号A中文名英文名号分子式

号CAS

3022滂酰紫6RPontacylViolet6R5850-63-5C20H12N2Na2O8S2

3123荧光素钠Uranine518-47-8C20H10Na2O5

3213二甲苯青FFXyleneCyanolFF2650-17-1C25H27N2NaO6S2

7

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C

C

附录C

（资料性）

禁用水溶性合成色素定量离子提取流图

禁用水溶性合成色素定量离子提取流图（A组：100ng/mL；B组：1000ng/mL），见图C.1。

2020092108517:MRMof1ChannelES-

6.10231.384>179.155(A013)

1001.26e6

%

0Time

-0.002.004.006.008.0010.0012.0014.00

20200921085-11.酸性红122:MRMof3ChannelsES-

9.02255.035>150.709(A014)

1001.59e6

%

0Time

-0.002.004.006.008.0010.0012.0014.00

202009210852.酸性红7342:MRMof1ChannelES-

9.53327.007>171.181(A017)

1004.36e7

%

0Time

-0.002.004.006.008.0010.0012.0014.00

20200921085-13.酸性橙II47:MRMof3ChannelsES-

9.96351.984>156.203(A019)

1009.95e7

%

0Time

-0.002.004.006.008.0010.0012.0014.00

20200921085-14.橙黄IV33:MRMof3ChannelsES-

8.75303.944>156.221(A020)

1008.19e7

%

0Time

-0.002.004.006.008.0010.0012.0014.00

5.甲基橙

8

T/GDFDTAECXX—2023

20200921085-169:MRMof3ChannelsES-

9.56557.084>432.974(A023)

1009.27e5

%

0Time

-0.002.004.006.008.0010.0012.0014.00

20200921085-16.酸性红5275:MRMof3ChannelsES-

9.34642.672>518.589(A026)

1001.42e6

%

0Time

-0.002.004.006.008.0010.0012.0014.00

20200921085-17.酸性红8732:MRMof3ChannelsES-

8.97294.613>235.244(A034)

1001.83e6

%

0Time

-0.002.004.006.008.0010.0012.0014.00

20200921085-18.酸性红26518:MRMof3ChannelsES-

6.09233.334>158.583(A036)

1002.03e6

%

0Time

-0.002.004.006.008.0010.0012.0014.00

20200921085-19.铬变素2B7:MRMof3ChannelsES-

5.91211.171>158.59(A037)

1006.71e5

%

0Time

-0.002.004.006.008.0010.0012.0014.00

20200921085-110.铬变素2R9:MRMof3ChannelsES-

7.61216.766>143.1(A038)

1002.52e5

%

0Time

-0.002.004.006.008.0010.0012.0014.00

20200921085-111.酸性红2641:MRMof3ChannelsES-

8.28326.926>171.187(A041)

1001.53e7

%

0Time

-0.002.004.006.008.0010.0012.0014.00

9

T/GDFDTAECXX—2023

20200921085-112.酸性橙2065:MRMof3ChannelsES-

8.38515.129>435.06(A044)

1001.27e6

%

0Time

-0.002.004.006.008.0010.0012.0014.00

20200921085-113.二甲苯青FF70:MRMof3ChannelsES-

9.53559.098>479.035(A047)

1001.05e7

%

0Time

-0.002.004.006.008.0010.0012.0014.00

20200921085-114.酸性蓝372:MRMof3ChannelsES-

10.97577.097>496.927(A061)

1003.79e7

%

0Time

-0.002.004.006.008.0010.0012.0014.00

20200921085-115.酸性紫3446:MRMof3ChannelsES-

9.97351.98>156.187(A064)

1009.60e7

10.25

%

0Time

-0.002.004.006.008.0010.0012.0014.00

20200921085-116.酸性黄364:MRMof3ChannelsES-

5.10202.918>150.624(A066)

1004.12e5

%

0Time

-0.002.004.006.008.0010.0012.0014.00

20200921085-117.酸性橙1010:MRMof3ChannelsES-

8.16217.066>170.237(A071)

1009.63e5

%

0Time

-0.002.004.006.008.0010.0012.0014.00

18.胭脂红SX

10

T/GDFDTAECXX—2023

20200921085-173:MRMof3ChannelsES-

10.80589.233>185.185(A073)

1002.43e6

%

0Time

-0.002.004.006.008.0010.0012.0014.00

20200921085-119.酸性紫954:MRMof3ChannelsES-

7.95