《卷烟 主流烟气中氨的测定 连续流动法实验报告》

PAGEPAGE14《卷烟主流烟气中氨的测定连续流动法》试验报告烟气中的氨是44种Hoffman有害成分名单中的一种[1]，中国的卷烟安全性评价指标中也有氨[2]。卷烟主流烟气中的氨，主要来源于烟草中的氨基酸、蛋白质、硝酸盐及铵盐等含氮化合物。在粒相和气相中均有氨，粒相中氨含量占总量的比例超过80%。游离氨能碱化烟气，增加烟气中非质子化尼古丁的浓度，使尼古丁更易被吸收，从而增加了烟草致瘾性和全球使用量。主流烟气中，尼古丁分布于气、粒两相，气相中的尼古丁完全以游离烟碱的形式存在，粒相中以质子化和游离态两种形式存在，其比例根据粒相物的pH值不同，Hoffmann等人的研究表明：pH值在5.8时，尼古丁主要以单质子化和双质子化形式存在，而随着pH值进一步升高，游离尼古丁的相对含量逐渐增加，在pH=7.8时，烟气中大约30%尼古丁为游离态。Sloan和Morie的实验证明烟气中游离氨的总量与pH值（5.2～7.4）呈明显正相关。氨对尼古丁生物利用度的增加作用主要通过：（1）增大气、粒两相中游离烟碱的比例；（2）增大气相中烟碱的分布比例，从而造成一种由浓度驱动的，尼古丁在口腔、上呼吸道上皮细胞中更快速、更大量的吸收。根据BAT的一份研究报告，在卷烟里使用氨的添加剂可使尼古丁的最高输送率达到45%。此外，氨会污染室内环境空气，环境中低含量的氨气（10μg/m3）就会引起上呼吸道敏感的人咽喉刺激感、呼吸急促，高含量的氨气（750mg/m3）甚至可能引发慢性阻塞性肺病。因此准确测定卷烟烟气中的氨对于评价卷烟安全性有重要意义[3,4,5]。目前，行业内测定卷烟主流烟气中的氨已有多种方法。主要分两类：一类是离子色谱法，包括中国科学技术大学烟草与健康研究中心王希琴、蔡继宝[6]等以及郑州烟草研究院赵晓东等建立的离子色谱法测定卷烟主流烟气中氨的方法[7]，由上海烟草集团牵头制定的YC/T377-2010《卷烟主流烟气中氨的测定离子色谱法》行业标准[8]；一类是分光光度法、容量法、离子选择性电极及毛细管电泳法、色谱法等。容量法要求所测样品的氨含量较高，氨电极法样品前处理较复杂，测定易受环境影响。气相色谱法操作冗长，进样复杂，线性范围狭窄。毛细管电泳的线性范围窄，钾、钠离子干扰大。C.H.Slosan等用气相色谱法测定了卷烟烟气中的氨，在该方法中样品溶液在进气相色谱分析前需用强碱干燥剂脱水，然而即使用干燥剂BaO,在4-5次进样后仍会出现色谱峰拖尾现象，而且会越来越严重，为克服这一缺点，在进样时额外使用了一种复杂的by-pass装置，该方法操作冗长，进样复杂，线性范围狭窄[17]。国外烟草公司和机构也进行了大量的研究工作，包括菲莫、雷诺、BAT、UK、Arista、HealthCanada等，建立了较成熟的分析方法[9,10,11,12,13,14]，各种方法均测定了气、粒两相中氨的总量。主要差异在于前处理条件不同：捕集液种类、体积；捕集阱的设计；抽吸支数；萃取时间；捕集液的转移过程等。氨的分析均采用阳离子交换色谱，外标法定量，但标准曲线的拟合方程存在差异。目前，YC/T245-2008《烟草及烟草制品氨的测定连续流动法》[15]是采用样品在碱性缓冲溶液中与水杨酸和次氯酸反应，亚硝基铁氰化钠为反应中的催化剂，反应生成物在660nm处进行比色测定。该标准溶液的浓度范围为2.0～40.0mg/L,样品经过6英寸透析器稀释后反应。ISO11732:2005是采用连续流动法测定水中的氨氮含量[16]，检测适用的浓度范围为0.1～10.0mg/L。本项目拟采用连续流动法测定卷烟主流烟气中氨的含量，建立卷烟主流烟气中氨含量测定的行业标准。1、材料与方法1.1仪器与设备AA3连续流动分析仪（德国SEAL公司），配有660nm滤光片Borgwaldt20H转盘式吸烟机（博格瓦特公司）SM450、SM400直线型吸烟机（Cerulean公司）Milli-Q-Academic超纯水发生器（法国MILLIPORE公司）THZ-82气浴振荡器(江苏金坛环宇科学仪器厂)KBF恒温恒湿箱（德国Binder公司）DME037E恒温恒湿机（美国Libert公司）氨捕集阱（见图1）。图1卷烟主流烟气中氨捕集阱试剂与材料除特别要求外，均应使用分析纯级试剂。水应符合GB/T6682中一级水的规定。1.2.1盐酸，36%~38%（质量分数）。1.2.2Brij35溶液（聚乙氧基月桂醚）称取250gBrij35加入到１Ｌ水中，加热搅拌直至溶解。1.2.3吸收液0.01mol/L盐酸溶液，现配现用。1.2.4缓冲溶液称取40.0g柠檬酸钠（C6H5Na3O7﹒2H2O）于烧杯中，加入约600mL水溶解后，定容至1000mL容量瓶,加入1mlBrij35溶液（1.2.2），1.2.5水杨酸钠溶液称取40.0g水杨酸钠（NaC7H5O3）及1.0g硝普钠（Na2[Fe(CN)5NO]﹒2H2O）于烧杯中，加入约600m1.2.6二氯异氰脲酸钠溶液（DCI）称取20.0g氢氧化钠（NaOH）及3.0g二氯异氰脲酸钠(C3Cl2N3NaO3﹒2H2O)于烧杯中，加入约600mL水溶解后，转移至10001.2.7标准溶液标准储备液NH4+标准溶液（100μg/mL（以N计），GBW(E)080220）。系列工作标准溶液分别移取一定体积的NH4+标准储备液（），用吸收液（1.2.3）稀释定容，现配现用。表1为推荐的系列工作表1系列工作标准溶液单位为微克每毫升NH4+系列标准工作溶液1#2#3#4#5#浓度(以N计)0.150.300.500.80石墨化炭黑固相萃取柱(250mg,6mL)，使用前使用51.3分析步骤1.3.1卷烟抽吸捕集阱连接方式参见图2。装有吸收液的捕集阱连至吸烟机后，应按照GB/T16450规定的要求，调整每孔道抽吸容量至（35±0.3）mL。按照GB/T19609规定要求进行抽吸。直线型吸烟机每个样品同一孔道抽吸4支卷烟。转盘式吸烟机每个样品一轮抽吸20支卷烟。1——烟支：2——捕集器；3、5——连接管路；4——捕集阱；6——二位三通阀；7——抽吸单元图2吸烟系统连接方式示意图1.3.2气相吸收液的制备直线型吸烟机：捕集阱内准确加入20mL吸收液（1.2.3），抽吸后制得主流烟气气相吸收液。转盘式吸烟机：捕集阱内准确加入50mL吸收液（1.2.3），抽吸后制得主流烟气气相吸收液。1.3.3粒相萃取液的制备对于44mm剑桥滤片，卷烟抽吸完成后，把捕集有粒相成分的滤片及擦拭捕集器用的四分之一滤片（44mm）一起放入100mL萃取瓶中。准确加入20mL吸收液（1.2.3）。对于92mm剑桥滤片，卷烟抽吸完成后，把捕集有粒相成分的滤片及擦拭捕集器用的四分之一滤片（44mm）一起放入250mL萃取瓶中。准确加入50mL吸收液（1.2.3）。将萃取瓶放在振荡器上，振荡萃取40min，振荡频率的设定以不振碎滤片的最快速度为准（参考值为160r/min），制得主流烟气粒相萃取液。1.3.4分析样品制备对于由直线型吸烟机得到的主流烟气气相吸收液与粒相萃取液，各定量移取4mL，合并置入10mL容量瓶；使用吸收液（1.2.3）定容。摇匀后，使用石墨化炭黑固相萃取柱（1.2.8）过滤，弃去前2至3mL滤液，后续滤液置于样品杯中，即制得待测样品。对于由转盘式吸烟机得到的主流烟气气相吸收液与粒相萃取液，各定量移取5mL，合并置入25mL容量瓶；使用吸收液（1.2.3）定容。摇匀后，使用石墨化炭黑固相萃取柱（1.2.8）过滤，弃去前2至3mL滤液，后续滤液置于样品杯中，即制得待测样品。1.3.5空白实验按照上述步骤制备空白样品，抽吸时卷烟不点燃。1.3.6连续流动分析连续流动分析仪测定管路图见图3：图3连续流动分析仪测定管路图2、结果与讨论2.1连续流动分析方法选择2.1.1分析管路的选择与确定本方法分析管路的选择主要参考ISO11732:2005[16]，仪器供应商SEAL公司方法MethodNo.G-102-93Rev.2[17]及专利CN102012418A[18]，三种方法检测原理相同，主要是在样品进样量及催化剂亚硝基铁氰化钠浓度存在差异，分别采用三种方法测定系列工作标准溶液(氨浓度范围为0.182mg/L-1.457mg/L)，三种方法及工作标准溶液检测结果具体差异见表2。表2三种方法及工作标准溶液检测结果比较三种方法比较ISO11732:2005MethodNo.G-102-93Rev.2CN102012418A亚硝基铁氰化钠浓度(mg/L)4001000150进样管管径(mL/min)0.320.230.42反应液稀释无反应后加0.23mL/min水稀释无标准曲线相关系数(R2)0.999910.9999增益值10011090由表2可得，三种方法检测，标准曲线相关性均较好（R2>0.9999），但三种方法检测时增益值都较大，影响基线的稳定性及信噪比。因此，需要改进方法，降低方法增益值。综合表2结果，本方法采用：进样管管径0.23mL/min，反应后不稀释，并对亚硝基铁氰化钠浓度进行了梯度实验，结果见表3。表3亚硝基铁氰化钠浓度梯度实验结果亚硝基铁氰化钠浓度(mg/L)15030050010001500增益值2201301006060由表3可得，方法的增益值随着亚硝基铁氰化钠浓度增加而降低，当浓度达到1000mg/L以上时，增益值不再降低。因为亚硝基铁氰化钠作为反应的催化剂，当浓度在1000mg/L以上时，能保证样品反应完全，固本方法选择的亚硝基铁氰化钠浓度为1000mg/L。在确定方法管路图及亚硝基铁氰化钠浓度后，比较了本方法与样品经过透析膜的检测结果差异，结果见表4。表4两种方法检测结果比较两种方法比较本方法样品经过透析膜进样管管径(mL/min)0.230.32标准曲线相关系数(R2)0.99861增益值60230由表4可得，样品经过透析膜后，基线稳定性及信噪比变差，标准曲线线性变差（R2为0.9986），增益值为230。综合上述结果，本方法采用0.23mL/min进样管管径，样品不经过透析膜，亚硝基铁氰化钠浓度为1000mg/L，反应后不稀释。在确定方法管路图及亚硝基铁氰化钠浓度后，开展后续研究。2.1.2仪器精密度配制5个不同浓度的工作标准溶液，重复进样检测6次，检测结果相对标准偏差见表5，不同浓度下的仪器精密度RSD<1%。表5仪器精密度测定次数STD1mg/LSTD2mg/LSTD3mg/LSTD4mg/LSTD5mg/L10.1820.3640.6050.9731.46020.1800.3680.6020.9701.45130.1850.3630.6010.9691.46240.1840.3650.6110.9761.45550.1840.3610.6070.9681.45860.1820.3630.6050.9741.464精密度RSD(%)0.960.680.620.340.332.2连续流动分析方法优化2.2.1方法选择性评价不同种类胺类物质干扰实验在氨浓度为0.971mg/L的标准溶液中，分别加入浓度约为0.3mg/L不同种类的活性胺类物质，包括脂肪族胺类（一甲胺、二甲胺、三甲胺、一乙胺、乙二胺等）、醇胺类（一乙醇胺、3-丙醇胺等）、酰胺类（甲酰胺、乙酰胺、丙烯酰胺等）、脂环胺类（环己胺、三亚乙基二胺等）及芳香胺类（苯胺等）等。立即利用连续流动分析仪检测，标准样品检测结果回收率见表6。表6不同种类胺类物质干扰试验结果胺类物质标样浓度(mg/L)检测值(mg/L)回收率(%)甲胺0.9710.96499.2二甲胺0.9710.95197.9三甲胺0.9711.004103.4乙胺0.9710.96299.0乙二胺0.9710.95398.1乙醇胺0.9710.992102.1丙醇胺0.9710.97099.9甲酰胺0.9710.95097.8乙酰胺0.9710.96999.8丙烯酰胺0.9710.979100.8环己胺0.9711.000102.9三亚乙基二胺0.9710.974100.3苯胺0.9711.015104.5由表6可得，不同种类的活性小分子胺类物质对采用本方法测定主流烟气中的氨基本没有影响，标准溶液检测结果回收率在97.8%-104.5%。卷烟主流烟气中主要存在少量的甲胺与乙胺，离子色谱法在测定卷烟主流烟气中的氨时，需将甲胺、乙胺与铵离子达到基线分离，才不影响氨的测定[19]。采用本方法可以避免卷烟主流烟气中甲胺及乙胺对检测结果的影响。不同离子干扰实验在氨浓度为0.971mg/L的标准溶液中，分别加入浓度约为0.3mg/L不同种类盐类物质，其中，阳离子包括：铜离子、铁离子、钡离子、镁离子、钙离子、铅离子、钠离子、钾离子、汞离子等，阴离子包括：硫酸根、硝酸根、氯离子、溴离子、亚硫酸根、醋酸根、铁氰根、硫氰根、碳酸根。立即用连续流动分析仪检测，标准样品检测结果回收率见表7。表7不同阴阳离子干扰试验结果盐类物质标样浓度(mg/L)检测值(mg/L)回收率(%)硫酸铜0.9710.93496.2硝酸铁0.9710.91594.2氯化钡0.9710.95698.4硝酸镁0.9710.96399.1氯化钙0.9710.973100.2硝酸铅0.9710.96098.8溴化钠0.9710.95197.9硝酸钾0.9710.96899.7硫酸钠0.9711.005103.5亚硫酸钠0.9710.94397.1乙酸钠0.9710.94597.3铁氰化钠0.9711.006103.6氯化钠0.9710.972100.1硫氰酸汞0.9710.991102.0碳酸钠0.9710.978100.7由表7可得，不同种类阴阳离子对采用本方法测定卷烟主流烟气中的氨影响较小，标准溶液检测结果回收率在94.2%-103.6%。卷烟主流烟气中含量不同的阴阳离子，但浓度远低于0.3mg/L，因此，不同阴阳离子对于采用本方法测定主流烟气中氨的影响可以忽略。2.2.2样品净化处理固相萃取柱的选择由于卷烟主流烟气气相捕集液中含有大量的活性物质，粒相萃取液中含有色素及活性物质等，这些物质的存在会对连续流动法的显色体系（主要是缓冲体系）或反应中间体有破坏作用，造成检测结果偏高或偏低，回收率低。因此，必须对样品进行净化处理。目前，行业内主要采用聚苯乙烯—二乙烯基苯填料固相萃取柱MCI-GEL（填料量0.25g）[20]，石墨化炭黑固相萃取柱[21]去除样品溶液的色素、焦油、烟碱及其他活性物质，且石墨化炭黑固相萃取柱效果更好。因此，本方法选用石墨化炭黑固相萃取柱(250mg,6mL)开展后续研究。固相萃取柱对标准溶液检测结果的影响为考察固相萃取柱是否对标准溶液中的铵离子有吸收，将五个浓度工作标准溶液经过活化过的固相萃取柱过滤，分别收集滤液。立即用连续流动分析仪检测，检测结果见表8。表8固相萃取柱对标准溶液检测结果的影响标液浓度（mg/L）过炭黑柱后检测结果（mg/L）回收率（%）1.4571.45799.90.9710.974100.20.6070.60599.70.3640.366100.40.1820.184101.2由表8可得，标准溶液经过固相萃取柱处理后，检测结果的回收率在99.9%-100.4%。说明石墨化炭黑固相萃取柱对酸性环境下标准溶液中铵离子没有吸附，不会影响卷烟主流烟气中氨检测结果的准确性。固相萃取柱对卷烟样品检测结果的影响为考察固相萃取柱对样品主流烟气中氨测定的影响，选取同一卷烟样品（焦油量为11mg/支），利用Borgwaldt20H转盘吸烟机重复抽吸五次，按1.3制备三份待测样品，其中一份样品不经石墨化炭黑固相萃取柱过滤直接利用连续流动分析仪检测，一份样品经过固相萃取柱过滤后利用连续流动分析仪检测，另一份样品经0.45m表9固相萃取柱对卷烟样品中氨检测结果的影响检测次数直接检测结果（g/支）样品过炭黑柱后检测结果（g/支）相对偏差（%）离子色谱检测结果（g/支）110.899.1217.79.31210.959.1418.09.26311.039.3116.99.55411.129.3617.29.74511.259.5416.59.80由表9可得，直接检测结果比经石墨化炭黑固相萃取柱过滤后检测结果高16.5%-18.0%，且大于离子色谱法检测值。为验证两种前处理方法正确性，进行了回收率实验：准备两份同一卷烟样品溶液，分别定量加入标准溶液，一份直接定容后检测，一份经固相萃取柱过滤后检测，结果见表10。表10两种处理方法回收率实验结果样品名称直接检测结果（mg/L）回收率（%）过炭黑柱检测结果（mg/L）回收率（%）样品溶液原始浓度（mg/L）1.0510.841加入0.182mg/L氨标准溶液1.297134.81.01293.9加入0.486mg/L氨标准溶液1.594111.81.335101.7加入0.971mg/L氨标准溶液2.062104.11.826101.4由表10可得，卷烟样品不经固相萃取柱净化直接检测，标准样品的回收率高，尤其是低标样品（回收率为134.8%）。结合以上三项实验结果，本方法采用在样品前处理时，定容后的样品经石墨化炭黑固相萃取柱过滤后，利用连续流动分析仪检测。2.3卷烟烟气样品前处理方法优化2.3.1烟气捕集条件选择采用两个吸收瓶串联捕集卷烟主流烟气气相中的氨，每瓶中分别加入40mL吸收液（1.2.3），调整抽吸容量，利用Borgwaldt20H转盘式吸烟机按照GB/T19609条件抽吸卷烟样品。连续流动法测定两个吸收瓶捕集液中铵离子含量，由于卷烟主流烟气气相中氨比例小，直接将捕集瓶中吸收液经固相萃取柱过滤后测定，选取同一卷烟样品（焦油量为11mg/支），平行测定三次，结果见表11。表11烟气气相捕集效率实验结果单位为微克每支样品编号1#样品2#样品3#样品吸收瓶吸收瓶2n.dn.dn.d由表11可得，40mL捕集液能完全捕集一组（20支）卷烟样品气相中的氨，因此，本方法采用玻璃纤维滤片捕集卷烟烟气粒相中的氨，一个吸收瓶捕集气相中的氨。2.3.2不同萃取时间对主流烟气粒相物中氨提取效率的影响选取一卷烟样品（焦油量为8mg/支），利用Borgwaldt20H转盘式吸烟机按照GB/T19609条件抽吸卷烟样品，50mL吸收液（1.2.3）萃取玻璃纤维滤片，震荡萃取，分别在5min,10min,15min,20min,30min,40min,50min,60min时，取出1mL样品，加入4mL吸收液（1.2.3），混匀后经石墨化炭黑固相萃取柱过滤后测定，结果换算为原体积萃取液中的氨含量，结果见图4。图4烟气粒相物中氨的萃取效率随时间变化图由图4可得，当萃取时间达到40min后，萃取液中的氨浓度基本没有变化，因此本方法确定卷烟粒相物萃取时间为40min。2.3.3不同盐酸浓度对卷烟烟气粒相物中氨萃取效率的影响选取同一卷烟样品(焦油量为8mg/支)，利用Borgwaldt20H转盘式吸烟机按照GB/T19609条件重复抽吸五次，分别用50mL1mMol,5mMol,10mMol,15mMol,20mMol,25mMol盐酸溶液震荡萃取玻璃纤维滤片40min后，样品稀释5倍，经固相萃取柱过滤后连续流动分析，结果见图5。图5不同浓度盐酸溶液对烟气粒相物中氨萃取效率的影响由图5可得，一是不同浓度盐酸溶液对烟气粒相物中氨的萃取效率大致相同，二是在1mMol-25mMol之间，烟气样品的PH值不会对连续流动显色的缓冲体系造成影响。为保证与YC/T377-2010标准的一致性，本方法粒相萃取液及气相捕集液采用10mMol盐酸。2.3.4样品稳定性实验选取同一卷烟样品(焦油量为8mg/支)，利用Borgwaldt20H转盘式吸烟机按照GB/T19609条件抽吸两次，抽吸完成后，吸收瓶中的捕集液立即倒入100mL容量瓶，粒相萃取瓶亦密封。分别在0h,1h,2h,4h,8h,12h,16h,20h,24h时按1.3定量移取粒相萃取液及气相吸收液，制得待测样品，连续流动分析仪检测，结果见图6。图6卷烟主流烟气中的氨稳定性实验由图6可知，卷烟主流烟气中的氨受环境及样品本身物质影响，随着放置时间的延长，样品的氨含量增加，放置12小时后，氨含量增加4.38%，16小时后，增加5.93%。因此，本方法规定样品须在卷烟抽吸完成后12小时完成检测。2.3.5空白实验按照1.3制备3个空白样品，气相捕集液及粒相萃取液按1:1混合后，连续流动分析仪测定样品中的氨含量，结果均为未检出。2.3.6连续流动分析法与离子色谱法比对选取8个卷烟样品，卷烟抽吸完成后，一份按照YC/T377-2010制备样品，离子色谱法检测，一份按照本方法1.3制备样品，连续流动法检测，结果见表12。表12两种方法比对实验结果样品名称连续流动法结果(μg/cig)离子色谱法结果(μg/cig)相对偏差(%)A7.707.892.44B7.327.431.49C5.515.744.09D8.648.710.81E6.856.981.88F2.462.595.15G3.373.493.50H10.4010.652.38注：A,B,C,D,E为烤烟型样品；F,G,H为混合型样品由表12可得，两种方法检测结果一致性较好。2.4方法评价2.4.1标准工作曲线、检出限、定量限按照配制工作标准溶液，连续流动分析，利用峰高与其浓度相关分析，得到线性相关方程及其相关系数。标准工作溶液相关系数（R2）方法的检出限（LOD）和定量限（LOQ）：以0.193mg/L铵离子标准溶液，重复进样检测10次，计算测定值的标准偏差，以3倍标准偏差作为方法检出限、以10倍标准偏差作为方法定量限，结果见表13。表130.193mg/L铵离子标准进样10次的测定值进样次数铵离子浓度(mg/L)氨浓度(mg/L)10.1940.18320.1910.18030.1940.18340.1920.18150.1940.18360.1910.18070.1900.17980.1930.18390.1900.180100.1950.184平均值0.1920.182标准偏差0.00200.0018检出限和定量限的计算：LOD=3×0.001828×10×25/20=0.07μg/cigLOQ=10×0.001828×10×25/20=0.23μg/cig本方法测定卷烟主流烟气中氨的检出限为0.07μg/cig，定量限为0.23μg/cig，完全能满足卷烟主流烟气中氨释放量的检测要求。2.4.2方法精密度为考察方法的日内检测精度和日间检测精度，选取一种烤烟型卷烟和一种混合型卷烟在1日内检测5次和连续3日检测，结果见表14。表14实验方法的精密度单位为微克每支测定次数烤烟型卷烟混合型卷烟第一日第二日第三日第一日第二日第三日18.618.508.066.246.436.5528.198.278.586.096.326.3138.508.498.376.516.116.6048.728.658.256.426.556.1558.678.308.43日内平均值8.548.448.336.286.326.37RSD(%)由表14可得，本方法日内重复性RSD<3.5%，日间重复性RSD<2.0%，具有良好的精密度。2.4.3方法回收率方法的回收率实验采用基质加标法，将标样加在粒相萃取液及气相吸收液中，分别以10mMol盐酸(未加标)作为空白萃取液及空白吸收液，在10mMol盐酸溶液中分别加入浓度为0.32mg/L，0.64mg/L，0.96mg/L铵离子，作为加标萃取液，按本方法操作，测得低、中、高四个水平下的铵含量值。每个水平下平行测定三个样品，取平均值进行加标回收率的计算，检测结果见表15。结果显示加标回收率为97.3%-99.2%，满足定量分析要求。表15加标回收率样品名称样品氨含量加标量测定值回收率μg/支μg/支μg/支烤烟型卷烟8.563.7812.0197.3%8.567.5615.8698.4%8.5611.3319.3697.3%混合型卷烟6.493.7810.1999.2%6.497.5613.7297.7%6.4911.3317.5698.5%比对实验结果采用所建立的方法，分别在安徽中烟、郑州烟草研究院、中国烟草标准化研究中心、湖南中烟、福建中烟、河南中烟、甘肃烟草工业有限责任公司7家实验室进行比对实验，烤烟型卷烟产品3个、混合型卷烟产品1个，参比卷烟1R5F和3R4F，共计6个样品，样品信息见表16，各实验室所用仪器型号见表17，比对实验结果见表18。从表18可以看出，使用本标准方法测定主流烟气中的氨，不同实验室测定结果RSD在2.22%-5.08%之间，一致性较好。表16样品信息样品名称类型盒标焦油量(mg/cig)1R5F肯塔基参比卷烟1.73R4F肯塔基参比卷烟9.4A烤烟型卷烟12.0B烤烟型卷烟12.0C烤烟型卷烟8.0D混合型卷烟6.0表17实验室编号及仪器型号实验室编号吸烟机类型吸烟机型号连续流动分析仪型号1转盘式Borgwaldt-20HAA32-1转盘式Borgwaldt-20HAA32-2直线型Cerulean-400AA33直线型Cerulean-450AA34直线型Cerulean-450SmaetChem2005直线型Cerulean-450AA36直线型Cerulean-450AA37直线型Cerulean-450AA3表18比对实验结果单位为微克每支样品实验室1R5F3R4FABCD13.2010.596.828.737.418.702-13.2910.536.759.017.898.432-23.3510.727.099.657.958.5933.327.688.2843.6110.397.319.547.798.8153.7110.437.018.667.678.7063.4310.677.008.977.658.6473.529.986.968.997.588.34平均值(μg/cig)3.4310.437.019.167.708.56标准偏差(μg/cig)0.170.260.180.420.170.19变异系数(%)5.082.522.514.562.242.223结论本方法利用工作标准溶液线性及增益值选择确定了方法的分析管路图及试剂浓度，并考察了仪器精密度；利用不同种类活性胺类物质及不同阴阳离子对工作标准溶液检测结果的影响评价了方法的选择性；研究样品净化处理方式，确定采用石墨化炭黑固相萃取柱净化样品；研究了不同烟气捕集条件、萃取时间及盐酸浓度对检测结果的影响；考察了样品的稳定性，确定样品在卷烟抽吸完成后12h内完成检测；选取8个样品，与离子色谱法进行了比对实验；对方法进行评价，包括工作标准溶液线性、检测限、定量限、重复性及回收率；选取不同焦油量的6个卷烟样品，分别在7家实验室开展了比对实验工作。建立了连续流动法测定卷烟主流烟气中氨的分析方法，本方法可应用于快速准确测定卷烟主流烟气中的氨。参考文献[1]DietrichHoffmannandIlseHoffmann,ChemistryandToxicology,SmokingandTobaccoControlMonographNo.9:60-73.[2]谢剑平等.卷烟烟气危害性指数研究,烟草科技重要研究报告.2009,(2):5-15[J].[3]E.W.Willems,B.Rambali,2006.Significanceofammoniumcompoundsonnicotineexposuretocigarettesmokers[J].FoodandChemicalToxicology44,678-688.[4]BradleyJ.Ingebrethsen,2001.Particle-gasequilibriaofammoniaandnicotineinmainstreamcigarettesmoke[J].AerosolScienceandTechnology35,874-886.[5]CharleneH.Callicutt,RichardH.Cox,2006.Theroleofammoniainthetransferofnicotinefromtobaccotomainstreamsmoke[J].RegulatoryToxicologyandPharmacology46,1-17.[6]蔡继宝,王希琴,卷烟主流烟气中氨的分析技术一[C].卷烟主流烟气主