生物化学实验报告

生物化学实验报告生物化学实验报告供检验护理专业使用班级姓名郑州大学护理学院实验一血清蛋白质醋酸纤维薄膜电泳[目的][原理][仪器组成][操作与结果][结果粘贴]实验二酶的特异性[目的][原理][操作与结果]将以上1、2、3号试管置于37℃水浴箱保温10分钟。然后向各管中加班氏试剂20滴，沸水中煮沸10分钟，取出勿振摇试管，观察结果并记录。[分析]三管结果及原因。实验三温度、pH、激活剂、抑制剂对酶反应的影响[目的][原理][操作与结果]（一）温度对酶反应的影响[分析各管的颜色变化原因]（二）pH对酶反应的影响[分析各管的颜色变化原因]（三）激活剂、抑制剂对酶反应的影响[分析各管的颜色变化原因]实验四721型分光光度计的使用[目的][原理][构造][使用]实验五血清葡萄糖的测定[目的][原理][操作]将上述各管混匀，置于37℃水浴箱中保温15分钟，取出分别倒入0.5cm的比色杯中，选择波长λ=505nm，用空白管调节“0”及“100”，分别读取标准管及测定管的吸光度A标、A测。[计算][临床意义]实验六琥珀酸脱氢酶的作用及抑制[目的][原理][操作]取三支试管按下表操作[思考]1、液体石蜡起什么作用？2、各管颜色变化的原因？实验七肝脏中酮体的生成作用[目的][原理][操作][分析各管颜色变化的原因]实验八血浆CO2CP测定[目的][原理][操作][计算][意义]实验九血清谷丙转氨酶测定[目的][原理][操作]将空白管、测定管分别混匀，置入37℃水浴箱保温30分钟，取出加入2.4二硝基笨肼的盐酸溶液各0.5ml混匀后再置入37℃水浴保温20分钟。取出加入0.4M的NaOH5ml，混匀。选择波长λ=505nm，用空白管调节“0”及“100”，读取测定管的吸光度A测。查标准曲线。[结果][意义]实验十血清钾、钠测定[目的][原理][操作]1、钠测定计算2、钾测定计算[思考题]血清K+、Na+测定有何临床意义？第二篇：生物化学实验报告论文3600字生物化学实验报告论文班级:质量121学号:20120844119姓名:张瑶瑶一、前言生物化学是一门联系生物和化学的一门科学学科，学习生物化学可以提高我们严谨的科学分析以及熟练的实验操作，本文主要讲了金黄色葡萄球菌核糖核酸酶的分离实验，金黄色葡萄球菌是人类的一种重要病原菌，属于葡萄球菌属，可引起许多严重污染，本文主要通过核酸酶活性的测定，考马斯亮蓝法测定蛋白质溶液浓度，DEAE-纤维素的处理及装柱，蛋白质亚基分子量测定SDS凝胶电泳二、实验材料准备共分为四组，了解实验目的、方案、原理。2.1、取已配制好的金黄色葡萄球菌于离心管内，8000rpm离心除掉菌体，保留上清（留1-2ml,p1）,用作后续实验。2.2、将锥形瓶中的金黄色葡萄球菌液体放到沸水中煮30分钟，10000rpm离心，保留上清液（留1-2ml,p2）,用作后续实验。2.3、将离心好的上清液取60ml进行75%硫酸铵饱和度沉淀实验，放置离心管，配平后4度冰箱中放置24小时。将硫酸铵沉淀液10000rpm离心，去上清，保留沉淀，缓冲液洗涤，方法是在第一支离心管中加入2ml缓冲液混匀倒入第二支离心管中，再取2ml于第一支离心管中洗一次，再倒入第二支离心管中，最后在第二支离心管中再加入2ml缓冲液。终体积为6ml（留0.5ml,p3）。2.4、DEAE-纤维素的处理及装柱2.4.1、处理本实验采用的是DEAE-纤维素DE52是弱酸型阴离子交换剂，具体处理方法为:先将DE52阴离子交换剂干粉浸泡于蒸馏水中，去除杂质；再在0.5N的Hcl溶液中浸泡1h,再用无离子水或蒸馏水洗至pH4以上，并将其在抽滤中抽干；将抽干的离子交换剂浸在0.5N的NaOH溶液中1h,再用无离子水或蒸馏水将其洗至中性。2.4.2、装柱将层析柱清洗干净垂直固定到层析架上，加1/3体积的无离子水，打开下出液口，水流畅通，即刻将小烧杯中装有适宜浓度的柱才，轻轻倒入层析柱中，凝胶自然慢慢沉降在层析柱底部；凝胶沉积至高度10cm处，停止装柱；夹上止液夹。2.4.3、平衡在柱层析上样前必须对层析柱进行平衡，将平衡缓冲液泵入到层析柱内，打开层析柱下端的出口，当下出口流出液的PH值与平衡缓冲液的PH值一致时（大于50ml平衡液），层析柱达到了平衡。在本实验中，用0.001MTris-HCl缓冲液PH9.0（内含0.0001MEDTA）,预先将DE-52柱进行平衡。2.5、上样平衡液50ml用于收集，收集30-40ml即可。然后装入透析袋，PEG2包埋，浓缩。收集浓缩液p4-x；2.6、透析袋预处理新的透析袋在沸水中煮沸10min.即可进行透析。三、核酸酶活性的测定将甲苯胺蓝核酸琼脂溶化后，倒入平板中，凝固后，用直径为2mm的打孔器打孔，将琼脂取出，将待检酶液10ul,滴入孔中，置于加有湿棉纱的湿盒内，在37℃培养4h,阳性反应在孔的周围会出现1mm以上的粉红圈，测量粉红圈的直径。四、考马斯亮蓝法测定蛋白质浓度4.1、实验原理考马斯亮蓝能与蛋白质的疏水微区相结合，这种结合具有高度敏感性。考马斯亮蓝G250的磷酸溶液呈棕红色，最大吸收峰在465nm。当它与蛋白质结合形成复合物时呈蓝色，其最大吸收峰改变为595nm,考马斯亮G250-蛋白质复合物的高消光效应导致了蛋白质定量测定的高度敏感度。在一定范围内，考马斯亮蓝G250-蛋白质复合物呈色后，在595nm下，吸光度与蛋白质含量呈线性关系，故可用于蛋白质浓度的测定。4.2、实验仪器及用品实验试剂:（1）水；（2）标准蛋白液:牛血清蛋白（0.1mg/ml