2025年微生物菌群密度检测研究报告

云阳金谷农业发展有限公司检查汇报试验名称：菌落总数的检查试验措施：平板计数法香猪脆、香脆肚。总负责人：熊经理检查时间：7月26—8月6号菌落总数的检测平板计数法为了深入理解与熟悉我们产品的操作规范和要点的控制，掌握菌落总数的检查措施和理解超净工作台的操作规范。二、试验仪器设备和所需试剂及试剂的配制。1、试验仪器及设备型组织捣碎机、隔水或智能恒温培养箱GHP—9080、出厂编号13475、烘箱ZFD—5040(全自动型鼓风干燥箱)、蒸馏水制备机、灭菌过的250ml锥形瓶、1ml吸量管、10ml的吸量管、酒精灯、锥形瓶1000ml、培养皿、电子天平AL104、电磁炉、锅、锅铲、PH试纸、恒温水浴锅HH—4出厂标号160.53。2、试验试剂及配制2.1重要试剂：琼脂、无菌生理盐水、无菌水、75%的酒精、1moL/L氢氧化钠、1moL/L的盐酸。2.2药物试剂2.21琼脂：精确称取12.5g胰蛋白胨、酵母浸膏7.5g、葡萄糖3.0g、琼脂37.5g、蒸馏水2500ml,加入至锅中煮沸溶解，先加入琼脂将其熬化，在加入其他样品，直至样品熬化即可关掉火，冷却后调解PH值(7.0左右即可)。酸性用氢氧化钠调整、碱性用盐酸进行调整，将在120℃高压灭菌15min即可。2.22无菌生理盐水：精确称取8.5g氯化钠溶于1000ml蒸馏水中。2.23无菌水：吸取1000ml的蒸馏水，将在120℃高压灭菌15min即可。2.241moL/L氢氧化钠：称取40g的氢氧化钠溶于1000ml的蒸馏水中在2.4575%的酒精：分别吸取400ml的95%的无水乙醇和100ml的蒸馏水与1、样品的稀释1.1固体和半固体样品：称取25g样品置盛有225ml磷酸盐缓冲液或生理盐水的无菌均质杯内，8000r/min～10000r/min均质1min～2min,或放入盛有225ml稀释液的无菌均质袋中，用拍击式均质器拍打1min~2min,制成1:10的样品匀液。1.2液体样品：以无菌吸管吸取25ml样品置盛有225ml磷酸盐缓冲液或生理盐水的无菌锥形瓶(瓶内预置合适数量的无菌玻璃珠)中，充足混匀，制成1:10的样品匀液。36℃±1℃48h±2h.2、检样与接种：25g(ml)样品+225ml稀释液，均质，10倍系列稀释选择2个～3个合适稀释度的样品匀液，各取1ml分别加入无菌培养2.1用1ml无菌吸管或微量移液器吸取1:10样品匀液1ml,沿管壁缓慢注于盛有9ml稀释液的无菌试管中(注意吸管或吸头尖端不要触及稀释液面),振摇试管或换用1支无菌吸管反复吹打使其混合均匀，制成1:100的样品匀液。2.2.按上述操作程序，制备10倍系列稀释样品匀液。每递增稀释一次，换用1次1ml无菌吸管或吸头。12.2.根据对样品污染状况的估计，选择2个～3个合适稀释度的样品匀液(液体样品可包括原液),在进行10倍递增稀释时，吸取1ml样殖。平板计数琼脂培养基，混匀.4、培养：待琼脂凝固后，将平板翻转，36℃±1℃培养48h±2h。水产品30℃±1℃培养72h±3h。假如样品中也许具有在琼脂培养基表5、报告的菌落数量。菌落计数以菌落形成单位(colony-formingunits,CFU)6.1选用菌落数在30CFU～300CFU之间、无蔓延菌落生长的平板可记录为多不可计。每个稀释度的菌落数应采用两个平板的平均数。6.2其中一种平板有较大片状菌落生长时，则不适宜采用，而应以无片状菌落生长的平板作为该稀释度的菌落数；若片状菌落不到平板的二分之一，而其他二分之一中菌落分布又很均匀，即可计算半个平板后乘以2,代表一种平板菌落数。6.3当平板上出现菌落间无明显界线的链状生长时，则将每条单链作为一种菌落计数。7成果与汇报7.1菌落总数的计算措施7.1.1若只有一种稀释度平板上的菌落数在合适计数范围内，计算两个平板菌落数的平均值，再将平均值乘以对应稀释倍数，作为每g(ml)样品中菌落总数成果。7.1.2若有两个持续稀释度的平板菌落数在合适计数范围内时，按公式(1)计算：N=∑C/(N₁+0.1n₂)d…………N——样品中菌落数；∑C——平板(含合适范围菌落数的平板)菌落数之和；n,——第一稀释度(低稀释倍数)平板个数；n₂——第二稀释度(高稀释倍数)平板个数；d——稀释因子(第一稀释度)。上述数据按7.2.2数字修约后，表达为25000或2.5×104。7.1.3若所有稀释度的平板上菌落数均不小于300CFU,则对稀释度7.1.4若所有稀释度的平板菌落数均不不小于30CFU,则应按稀释度7.1.5若所有稀释度(包括液体样品原液)平板均无菌落生长，则以不不小于1乘以最低稀释倍数计算。7.1.6若所有稀释度的平板菌落数均不在30CFU～300CFU之间，7.2菌落总数的汇报7.2.1菌落数不不小于100CFU时，按“四舍五入”原则修约，以整数汇报。7.2.2菌落数不小于或等于100CFU时，第3位数字采用“四舍五入”原则修约后，取前2位数字，背面用0替代位数；也可用10的指数7.2.3若所有平板上为蔓延菌落而无法计数，则汇报菌落蔓延。7.2.4若空白对照上有菌落生长，则本次检测成果无效。空白数数数005800000若只有一种稀释度平板上的菌落数在合适计数范围内，计算两个平板菌落数的平均值，再将平均值乘以对应稀释倍数，作为每g(ml)样品中菌落总数成果。因此：N=37+38+39/3×10二、奇爽菌落总数的数据分析空白123000406若有两个持续稀释度的平板菌落数在合适计数范围内时，按公式(1)N——样品中菌落数；成果2∑C——平板(含合适范围菌落数的平板)菌落数之和；n₁——第一稀释度(低稀释倍数)平板个数；n₂——第二稀释度(高稀释倍数)平板个数；d——稀释因子(第一稀释度)。N=267+281+295+44+34+29/(3+0.1×3)×10N=2879个/g三、香猪脆菌落总数的数据分析成果1空白300感杂40001若只有一种稀释度平板上的菌落数在合适计数范围内，计算两个平板菌落数的平均值，再将平均值乘以对应稀释倍数，作为每g(ml)样品中菌落总数成果。因此：N=57+60+34/3×10N=503个/g空白12300感杂40001若只有一种稀释度平板上的菌落数在合适计数范围内，计算两个平板菌落数的平均值，再将平均值乘以对应稀释倍数，作为每g(ml)样品中菌落总数成果。N=243个/g空白1230087若只有一种稀释度平板上的菌落数在合适计数范围内，计算两个平板菌落数的平均值，再将平均值乘以对应稀释倍数，作为每g(ml)样品中菌落总数成果。因此：N=53+118+84/3×100五、有友菌落总数的数据分析空白130120感杂感杂00000只有一种稀释度平板上的菌落数在合适计数范围内，计算两个平板菌落数的平均值，再将平均值乘以对应稀释倍数，作为每g(ml)样品中菌因此：N=1+7+3/3×10N=33个/g六、香脆肚菌落总数的数据分析空白123000若有两个持续稀释度的平板菌落数在合适计数范围内时，按公式(1)N——样品中菌落数；∑C——平板(含合适范围菌落数的平板)菌落数之和；n,——第一稀释度(低稀释倍数)平板个数；n₂——第二稀释度(高稀释倍数)平板个数；d——稀释因子(第一稀释度)。通过一系列的试验论证表明：自己