微生物学实验一课件

微生物学实验微生物学实验一1.应保持实验室安静，切勿高声喧哗和随意走动。2.实验室内禁止饮食、吸烟、及用嘴湿润铅笔和标签等物。3.使用显微镜和其它贵重仪器时，应在教师同意后方可使用，切勿擅自拆卸，否则因此而损坏仪器，应予以赔偿。4.遇意外发生，应立即报告教师，不可自己随意处理。实验室须知微生物学实验一实验室注意事项：每次实验前必须认真预习，课堂上注意聆听教师对实验内容的讲解，注意观察教师的示范操作。实验时应仔细认真，严格按操作规程进行，注意改变生活中的习惯动作，以掌握微生物学实验的科学操作方法。使用贵重仪器应先事先熟知操作规程，遇仪器故障时请教师帮助解决。实验中如遇菌液外溢、皮肤划伤或菌液吸入等意外，应立即报告老师及时进行处理，不得隐瞒，以免酿成后患。5.注意安全，易燃物品如二甲苯、吸水纸等应远离火源。打火机只能用于点燃酒精灯，酒精灯用完应及时盖上灯帽。6.实验完毕，必须将仪器放到指定地点，带菌工具应先进行消毒。微生物学实验一7.实验需进行培养的材料，要标明姓名、组别、日期后，放于教师指定的培养箱中进行培养。8.未经教师同意，实验室中的任何菌种和物品不得携带出室外。9.实验时应认真进行观察和操作，做好实验记录；有疑难问题向教师求教。10.励行节约，对水、电、染色液、镜油、擦镜纸、吸水纸及其它药品等均应节约使用。11.实验后应对实验室整理清扫，洗手后方可离开实验室，关窗锁门。实验室注意事项：微生物学实验一微生物学实验室常用的器皿1．试管2．吸管3．培养皿4．三角烧瓶5．载玻片与凹玻片普通载玻片用于微生物涂片、染色，作形态观察等凹玻片是在一块厚玻片的当中有一圆形凹窝，作悬滴观察活细菌以及微室培养用。6.滴瓶：用来装各种染料、生理盐水等7.接种工具：接种环、接种针等微生物学实验一常用器材酒精灯1/人接种环1/人试管夹1/人吸耳球1/2人计数器1/2人镊子1/2人香柏油1/2人擦镜纸1/2人微生物学实验一实验报告格式基本信息的填写（不能留空）。题目目的原理材料和器皿方法和步骤实验结果画图文字描述分析和讨论思考题实验报告必须以实事求是、严肃认真的科学态度，按照指导书的要求按时完成。实验报告应该简明扼要、叙述准确、数据完整、绘图清晰且写实，应有讨论、有分析，结论明确。微生物学实验一清洁与卫生保持实验台的清洁与试剂架的整齐洁净。废纸、培养基等废弃物一律丢入垃圾桶内，严禁放入水槽！培养皿、玻片、试管等玻璃仪器清洗后一律搁置凉在不朽钢网框里。玻片上的染液必须彻底清洗干净（用洗衣粉洗）。培养皿、试管等玻璃仪器上做的标记必须彻底洗净。最终垃圾由值日生倒入卫生间箩框里，湿拖把挂在水槽水龙头架上滴水凉干。每次值日生4人。微生物学实验一实验一显微镜油镜的使用及细菌的简单染色法实验二

细菌的革兰氏染色及芽孢染色法实验三鞭毛染色法及活细菌运动性的观察实验四四大类微生物菌落及个体形态观察实验五微生物大小测定及血球计数板计数实验六培养基配制及灭菌实验七微生物的分离纯化与平板菌落计数实验八微生物的生理生化反应（一）实验九微生物的生理生化反应（二）

实验内容微生物学实验一显微镜油镜的使用及细菌的简单染色法实验一教学目标或要求：巩固和掌握显微镜油镜的正确使用；学习细菌制片和简单染色技术；观察细菌的三种基本形态；初步建立无菌操作的概念；微生物学实验一显微镜的构造

1.光学部分:接目镜、接物镜、照明装置(聚光镜、反光镜等).它使检视物放大,造成物象.

2.机械部分:镜座、镜臂、镜筒、物镜转换器、载物台、载物台转移器、粗调节器、细调节器等部件.它起着支持、调节、固定等作用.微生物学实验一油镜使用的原理

油镜，即油浸物镜。当光线由反光镜通过玻片与镜头之间的空气时，由于空气与玻片的密度不同，使光线受到曲折，发生散射，降低了视野的照明度。若中间的介质是一层油（其折射率与玻片的相近），则几乎不发生折射，增加了视野的进光量，从而使物象更加清晰。微生物学实验一显微镜的放大倍数、分辨率和数值孔径

1.放大倍数=物镜放大倍数×目镜放大倍数

2.分辨率：是表示显微镜辨析物体（两端）两点之间距离的能力，可用公式表示为：δ=0.61×λ/N.A

式中：

δ：物镜分辨出物体两点间的最短距离。：可见光的波长（平均0.55m)N.A:数值孔径

3.数值孔径(N.A)=n×sinα/2其意为玻片和物镜之间的折射率（n）乘以光线投射到物镜上的最大夹角（a）的一半的正弦。微生物学实验一（一）显微镜使用步骤1.放置好显微镜2.调节光源3.低倍镜观察4.高倍镜观察5.油镜观察6.清洁和还原显微镜微生物学实验一1.放置好显微镜

置显微镜于平稳的实验台上，镜座距实验台边沿约为3-4cm。镜检者姿势要端正。（取、放显微镜时应一手握住镜臂，一手托住底座，使显微镜保持直立、平稳。切忌用单手拎提；且不论使用单筒显微镜或双筒显微镜均应双眼同时睁开观察，以减少眼睛疲劳，也便于边观察边绘图或纪录。2.调节好光源接通电源，打开光源。微生物学实验一瞳距调节微生物学实验一粗调松紧调节旋钮微生物学实验一聚光镜中心调节②10X物镜①标本④聚光镜升降旋钮微生物学实验一3.低倍镜的观察。将标本片放在载物台上，用标本夹夹住，调节标本移动螺旋，使观察的目的物处于物镜的正下方。调节粗调螺旋，使物镜（10×）与标本靠近，眼睛在测向注视物镜，防止物镜和载玻片相碰。张开双眼向目镜里观察，如果见到目的物，但不十分清楚，可用细准焦螺旋调节，至目的物清晰为止。通过玻片夹推进器慢慢移动玻片，认真观察标本各部分，找到合适的目的物，仔细观察并记录所观察到的结果。微生物学实验一4.高倍镜的观察使用高倍镜前，必须先用低倍镜观察，发现目的物后将它移至视野正中处。旋动转换器换高倍镜。如果高倍镜触及载玻片立即停止旋动，这说明原来低倍镜并没有调准，目的物并没有真正找到，必须用低倍镜重新调节。如果高倍镜下观察目的物有点模糊，调节细准焦螺旋，直到视野清晰。调节细准焦螺旋时要注意旋转方向与载物台上升或下降的关系，防止镜头与载玻片强力接触，损坏镜头或载玻片。微生物学实验一5.油镜的观察

降低载物台约1.5-2.0cm，将油镜转到光路上来。在载玻片目标物上滴加一滴香柏油。从侧面注视，上升载物台，使油镜前端浸入香柏油。防止发生油镜压破玻片或进一步发生玻片顶坏油镜前的透镜的危险。然后一边观察一边用细调节器缓缓下降载物台，直至视野中出现清晰的物像。如果油镜已经离开油面，则必须重新从侧面注视，再将油镜头浸入油中，重复上面操作。（应特别注意不要在升降载物台时用力过猛，或者调焦时误将粗调节螺旋向反方向转动而损坏镜头及载玻片）微生物学实验一6.清洁显微镜和还原显微镜.

观察结束后，调节光源到最小再关掉电源开关。调节粗调螺旋，使载物台下降到最低，取下玻片。.观察完毕，把油镜转离光轴，应及时把镜头上的香柏油擦去。擦拭时先用干净擦镜纸擦去镜头上的油滴，然后再用二甲苯润湿一新的擦镜纸，一直线方向擦拭镜头1-2次，最后再用干净的擦镜纸擦1-2次去除二甲苯残渍。.用擦油镜头的方法擦观察过的标本片。

微生物学实验一普通光学显微镜注意事项1使用油镜必须按先用低倍镜和高倍镜观察，再用油镜观察2下降镜头时，一定要从侧面注视，切忌用眼睛对着目镜，边观察边下降镜头的错误操作，以免压碎玻片而损坏镜头。3使用二甲苯擦镜头时，注意二甲苯不能过多，以防溶解固定透镜的树脂。4注意保持显微镜的洁净，对金属部分要用软布擦拭，擦镜头必须用擦镜纸，切勿用手或用普通布、纸等，以免损坏镜头。微生物学实验一六、显微结构图的绘制

（1）绘图要用黑色硬铅笔，不要用软铅笔或有色铅笔，一般用2H铅笔为宜。（2）画图时先用轻淡小点或轻线条画出轮廓，再依照轮廓一笔画出与物象相符的线条。线条要清晰，比例要准确。(3)图的明暗及浓淡，应用细点表示，不要采用涂抹方法。点细点时，要点成圆点，不要点成小撇。(4)整个图要美观、整洁，还要特别注意准确性微生物学实验一（二）细菌的简单染色1.定义

是只用一种染料使细菌着色以显示其形态，不能辨别细菌细胞的构造，通常采用碱性染料（如美蓝、结晶紫、碱性复红等）使其着色。1、原理微生物学实验一菌种：培养18-24h的枯草芽孢杆菌染色液和试剂：美蓝、香柏油、生理盐水标本片：细菌三型涂片器材：载玻片、接种环、酒精灯、擦镜纸、显微镜等。2、实验器材微生物学实验一实验程序——细菌简单染色生理盐水涂片接种环自然干燥固定

美蓝染色1min水洗干燥擦拭水洗时不要直接冲菌膜微生物学实验一微生物学实验一染色注意事项1.涂片过程中，取生理盐水和细菌不宜过多，涂菌要均匀，不宜过厚。2.固定时温度不可过高，以载玻片背面不烫手背为宜，因为温度过高会破坏细胞的形态。3.水洗时，不应直接冲洗细菌涂面，水流不应过大、过急，以免细菌涂面被冲掉。微生物学实验一