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DB21Loop-mediatedIsothermalAmplification（LAMP）forRapidDetectionfo辽宁省市场监督管理局发布I刘洋、刘近、吴洪涛、任雪建、赵培、李蓉、章春燕、吕园园、标准起草单位通讯地址：辽宁省动物及产品检疫中心（沈阳市沈河区万柳塘路105号甲），1非洲猪瘟病毒等温扩增快速检测方法本标准规定了非洲猪瘟病毒等温扩增快速检测方法的技非洲猪瘟病毒是一种DNA病毒，该检测方法利用6条特异性引物和具有链置换能力的DNA聚合酶，在等温环境下1h内完成扩增，用于非洲猪瘟病4仪器和器材4.1高速台式冷冻离心机（离心范围0～205.1样品处理剂5.2ASFV-R-Mix215ml离心管和1.5ml离心管经121±1℃高压灭菌20min；灭活后，将悬液转入无菌Eppendorf管中，4℃条件下5000r/min离心10min，编号使用含有抗凝血剂（EDTA-紫色盖）的无菌管（真空采血管）从耳静脉或前腔静脉采集血液3ml～5采集或处理的样品在2～8℃条件下保存应不超过24h；若需长期保存，应放置-70到实验室检测。按照《兽医实验室生物安全技术管理34A.1样品处理剂的制备A.2ASFV-R-Mix的制备物（F3与B3）和1对环引物（LF与LB均由FIP：5'-TAACGCCACTATGCAGCCCACGGAAGAGCTGBIP：5'-CAACATGTGCGAACTTGTGCCACATACCTGGAACGTCTCC-F3：5'-ATAGGTAATGCGATCGGATACA-LB：5'-AGCCTCGGTGTTGATGCGGAT取3对引物（FIP、BIP、F3、B3、LF和LB）干粉，按引物说明书分别加入适量无A.2.3ASFV-R-Mix的配制称取2.4gTris，0.37g氯化钾，0.12g硫酸镁，100μl吐温-20，7.029g甜菜碱，溶于80ml用于制备本试剂盒的Bstenzyme为商品化DNA聚合酶，按使用说明书用纯化水稀释至4×106/L，分A.4D-I矿物油
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