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备案号:47705-2015DB32AjaponicaRiceVarietyNanjing9108江苏省质量技术监督局发布I本标准主要起草人：姚姝、陈涛、赵春芳、赵庆勇、周丽慧、赵凌、朱镇、张亚东、王才1水稻品种南粳9108机插稻每亩有效穗（21～22）万，每穗总粒数（130～140）粒，结实率>90%，千粒重（25～2手栽秧(149～154)d，机插秧（145~21234（40.1~50.0）cm5（1.5~2.0）cm6直立15°78（25.1~35.0）cm9（1.5~2.0）cm直立15°（0.7~1.0）cm），1234无5678931>85%2>75%3>70%4567891234感56抗稻谷的暗胚乳基因和香米基因的分子检测方法4DB32/T2791-2015(资料性附录)暗胚乳突变基因和香米基因的分子检测方法A.1Wx-mq基因四引物PCR分子标记检测A.1.1引物PCR分子标记序列稻谷出苗后在三叶期按单株提取基因组DNA,利用四引物PCR标记进行分子检测。s,65℃下退火30s,72℃下延伸1min,共35个循环，最后72℃下延伸10min,4℃下保存待用。(M:分子量标准；2、4、5、6、7、8、9、10为南粳9108稻谷标准带型，1、3为非标准带型。)5将稻谷进行幼苗DNA提取，利用InDel标记进行分子检测。正向引物(InDel-E2-F)序列为5'-GGGAGGCGCTGAAGAGGA-3,反向引物序列(InDel-E2-R)序列为5'-GGGTAGTCACCACCCTACCTTG-3'。MgCl₂)2.0μL,dNTP(2.5mmol/L)0.4μL,Taq酶(5U/uL)0.5μL和ddH₂O13.1μL。PCR反应在MJResearchPTC-200热循环仪上进行，反应程序如下：94℃下预变性5min,每个循环94℃下变性30反应产物在8%的非变性聚丙烯酰胺凝胶上电泳，经硝酸银染色并于凝胶成像系统下观察分析。利用fgr基因InDel分子标记扩增水稻品种的基因组DNA,南粳9108标准稻谷能扩增出100bp的DNA条带，而非南粳9108标准稻谷则扩增出107bp或同时具有100bp和107bp的带型。
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