医学教材 病原肠道杆菌课件

肠道杆菌

1学习要求1）掌握：致病性大肠埃希菌及其所致疾病；志贺菌属的致病性；沙门菌属的致病性与免疫性；肠道杆菌与微生物学分离鉴定有关的生物学特性。2）熟悉：肠杆菌科的共同特性；埃希菌属、志贺菌属和沙门菌属的微生物学检查步骤；肥达试验。3）了解大肠埃希菌的微生物学检查及防治原则；志贺菌和沙门菌的防治原则；沙门菌分类；其他肠道细菌。2编辑版ppt肠道杆菌是一大群寄居在人类和动物肠道内，生物学性状相似的G-杆菌。肠道杆菌种类很多，其中与医学关系密切的有埃希菌属、志贺菌属、沙门菌属、变形杆菌属、克雷伯菌属、肠杆菌属等；

大多数为肠道正常菌群,可成为条件致病菌，引起肠道外感染；少数为致病菌，导致肠道传染病。概述3编辑版ppt乳糖发酵试验共同特性(了解)1、相似的形态染色—多数有鞭毛，G-杆菌2、简单的培养条件：普通培养基中即可生长

3、活泼的生化反应重要试验（掌握）初步鉴别肠道致病菌和肠道非致病菌肠道致病菌肠道非致病菌多数不发酵乳糖

多数发酵乳糖4编辑版pptEMB（伊红——美兰培养基），乳糖、伊红、美兰选择作用（弱选）大肠埃希菌（非致病菌）乳糖发酵产酸伊红结合美兰形成紫黑色金属光泽化合物有色的乳糖发酵菌落伤寒沙门菌等（致病菌）乳糖不发酵伊红美兰不能结合无色的乳糖不发酵菌落5编辑版pptEMB平板上的E.coli6编辑版pptSS培养基（沙门志贺培养基）乳糖、中性红指示剂、胆盐、煌绿等抑制剂选择抑制作用（强选）大肠埃希菌产酸桃红色乳糖发酵菌落伤寒沙门菌无色乳糖不发酵菌落胆盐、煌绿：抑制大肠埃希菌及G+菌，提高肠道致病菌检出率乳糖发酵中性红呈红色乳糖不发酵7编辑版ppt8编辑版ppt

4、抗原构造复杂

鞭毛抗原（H）H-O变异菌体抗原（O）LPS的特异性多糖，S-R变异K或Vi抗原侵袭力9编辑版ppt5、抵抗力不强，60℃30min死亡，对一般消毒剂敏感6、易变异溶源性转换（前噬菌体）生化反应性变异通过引起

耐药性变异毒力性变异转导（温和噬菌体）接合(性菌毛）10编辑版ppt第一节埃希氏菌属

Escherichia代表株：大肠埃希菌（大肠杆菌，E.coli）1.肠道中正常菌群，出生后数小时就进入肠道，并终生伴。2.可成为条件致病菌，致肠道外感染3.某些血清型有致病性，导致感染性腹泻4.环境卫生和食品卫生中，常用作粪便污染的检测指标。5.分子生物学和基因工程研究中重要的实验材料11编辑版ppt一、生物学性状革兰阴性杆菌，有周身鞭毛，菌毛。37℃24h—

圆形凸起灰白色S型菌落发酵多种糖类，发酵乳糖

产酸产气，IMViC试验为++--12编辑版ppt※EMB平板—

紫黑色有金属光泽※SS平板—

红色菌落大肠杆菌血清型以O：K：H表示抵抗力：胆盐、煌绿有抑制作用对氯霉素、庆大霉素敏感13编辑版ppt

二、致病性（一）致病因素1、黏附素（定植因子）：菌毛

1个A亚单位（ATP→cAMP↑)LT2、※肠毒素：5个B亚单位(结合单位）

ST（cGMP↑)3、Vero毒素：志贺样毒素，分ⅠⅡ4、溶血素5、LPS、K抗原14编辑版ppt1、条件致病——化脓性炎症某些带有致病基因的血清型，引起肠道感染，表现为急性腹泻，包括产毒性﹑侵袭性﹑致病性﹑出血性﹑集聚性大肠杆菌细菌居住部位改变引起的肠外感染：尿路感染最常见，腹膜炎、败血症、脑膜炎2、致病菌株——胃肠炎（二）所致疾病（掌握）15编辑版ppt菌株作用部位所致疾病致病机理

ETEC

小肠

旅行者和婴幼儿腹泻

ST、LT

EPEC

小肠

婴儿腹泻

粘附和破坏上皮细胞

EIEC

大肠

痢疾样腹泻

侵袭和破坏结肠粘膜

EHEC

大肠

出血性结肠炎

Vero毒素(O157:H7)

致病性大肠杆菌引起的腹泻（掌握）EAEC小肠婴儿腹泻集聚性粘附上皮细胞阻止液体吸收16编辑版ppt肠产毒型大肠埃希菌

(enterotoxigenicE.coli，ETEC)

婴幼儿和旅游者腹泻致病物质肠毒素enterotoxinheatlabileenterotoxin(LT)heatstableenterotoxin(ST)定植因子(菌毛）17编辑版ppt肠侵袭型大肠埃希菌

(enteroinvasiveE.coli，EIEC)似菌痢样，有脓血便，有里急后重致病机理侵袭结肠粘膜上皮并繁殖细菌死亡后释放内毒素，引起炎症18编辑版ppt肠致病型大肠埃希菌

(enteropathogenicE.coli，EPEC)

婴幼儿腹泻致病机理粘附和破坏肠粘膜微绒毛上皮细胞排列紊乱，功能受损，导致腹泻19编辑版ppt※肠出血型大肠埃希菌

(enterohemorrhagicE.coli，EHEC)亦称为Vero毒素大肠埃希菌血清型为O157:H7临床表现轻重不一（水便~伴剧烈腹痛的鲜血样便）10%小于十岁患儿，有严重并发症（急性肾衰、溶血性尿毒综合症、血小板减少性紫癜），死亡率高致病因子菌毛毒素Vero毒素内毒素与溶血素20编辑版pptThe“lifecycle”ofE.coliO157:H7

5-10%prevalenceinanimals40%prevalenceinfarms21编辑版ppt肠黏附性大肠埃希菌(集聚型）

(enteroadherentE.coli，enteroaggregativeE.coli,EAEC)婴儿持续性腹泻2W以上，脱水，偶有血便致病因子肠集聚耐热毒素（EAST）菌毛α溶血素22编辑版ppt三.微生物检查

1.临床标本的检查

肠道外感染取---尿﹑血﹑脓﹑脑脊液，生化鉴定肠道内腹泻取----粪便

可疑菌落

涂片染色:形、色、排列---初诊生化反应（IMViC试验为++--）血清分型或测定肠毒素-确诊

37℃18-24h尿路感染：每毫升尿含菌量≥1×10523编辑版ppt在环境和食品卫生学上，常被用作粪便污染的检测指标≤3个大肠菌群数/1L饮水≤100个细菌总数/1ml饮水卫生学指标大肠菌群指数每1000ml水中大肠菌群数我国饮用水卫生标准：细菌总数每1ml或1g样品中细菌总数≤5个大肠菌群/100ml瓶装汽水、果汁24编辑版ppt预防

尿道插管和膀胱镜检查严格无菌操作

加强食品和水的卫生管理

有些牛肠道中存在EHEC，预防出血性结肠炎，应避免食用未煮

熟的牛肉、生牛奶、蔬菜

菌毛疫苗防治新生畜崽腹泻治疗

※耐药普遍，依据药敏试验选择

针对腹泻及时纠正水和电解质平衡五、防治原则25编辑版ppt

在分子生物学和基因工程实验中六、重要的实验材料和研究对象大肠杆菌也是重要的实验材料和研究对象26编辑版ppt病例15岁男孩在随母亲旅游中，进食小店卖的水果沙拉，回家2d后，出现严重腹部疼痛，大便次数不断增加，且多次便血，伴发热、呕吐，到医院急诊，检查有溶血性贫血及血小板减少等溶血性尿毒综合征。思考题：1．最可能的病原菌是什么？2．应做哪些微生物学检查？27编辑版ppt病例1提示1.该患儿有进食水果沙拉病史，2天后出现严重腹痛，大便次数不断增加，且多次便血，伴发热、呕吐，检查有溶血性贫血及血小板减少等溶血性尿毒综合征。以上症状提示最可能的病原体是大肠埃希菌O157：H7（肠出血型大肠埃希菌

EHEC）2.针对该可以病例应及时对肠道内大肠埃希菌感染进行常规微生物学检查，并快速进行毒力和血清学等特征鉴定，以确定防治措施。28编辑版ppt这种疾病离我们远吗？2011年5月—6月

29编辑版ppt30编辑版ppt病例2患者男23岁，急性腹痛2d，每天脓血便10次左右，有明显里急后重感，肠鸣音亢进，体温38℃，血压正常，白细胞数17×109/L。取粘液便镜检红细胞3个，白细胞8个，未见阿米巴原虫。思考题：1．可初步诊断为哪种疾病？2．采用哪种方法能进行快速诊断？31编辑版pptSS选择培养基上无色半透明菌落多数不分解乳糖（除宋内志贺菌）第二节志贺菌属（Shigella）是人类细菌性痢疾最为常见的病原菌无鞭毛、荚膜、无芽胞，有菌毛。生化反应形态一、生物学性状32编辑版ppt动力试验（+）（-）乳糖发酵实验痢疾杆菌大肠杆菌（-）（+）痢疾杆菌大肠杆菌33编辑版ppt抗原构造抗原主要有O、K两种，O抗原是分类依据，分群特异性抗原和型特异性抗原，痢疾杆菌分4群39个血清型。1、A群（痢疾志贺菌）：致病力最强。2、B群（福氏志贺菌）：我国最多见，易转慢。3、C群（鲍氏志贺菌）：致病力次于A群。4、D群（宋内志贺菌）：有两个变异相。

Ⅰ相：S型菌落，有致病力。受控于质粒。

Ⅱ相：R型菌落，无致病力。34编辑版ppt（一）致病物质1、侵袭力：菌毛—有利于菌粘附至肠粘膜2、毒素：内毒素*作用于肠壁通透性↑吸收↑发热、神志障碍、中毒性休克*破坏肠粘膜→炎症、溃疡→脓血粘液便*肠壁植物神经→肠蠕动失调、痉挛→腹痛、里急后重外毒素——志贺毒素与内毒素协同作用，加重局部和全身症状35编辑版ppt2.所致疾病：细菌性痢疾病人带菌者粪-口细菌性痢疾急性菌痢慢性菌痢36编辑版ppt

（二）所致疾病细菌性痢疾急性细菌性痢疾典型：发热、腹痛、脓血粘液便非典型：低热或不发热，稀便，偶含脓血中毒性：中毒症状慢性细菌性痢疾：病程迁延二月以上37编辑版ppt病例2患者男23岁，急性腹痛2d，每天脓血便10次左右，有明显里急后重感，肠鸣音亢进，体温38℃，血压正常，白细胞数17×109/L。取粘液便镜检红细胞3个，白细胞8个，未见阿米巴原虫。思考题：1．可初步诊断为哪种疾病？2．采用哪种方法能进行快速诊断？38编辑版ppt病例2提示1.患者急性腹痛2d，每天脓血便10次左右，有明显里急后重感，肠鸣音亢进，低热等临床症状，初步诊断为急性细菌性痢疾。39编辑版ppt3.免疫性感染局限于肠粘膜层，不入血，故免疫主要是消化道粘膜表面的分泌型IgA;维持时间短。40编辑版ppt三、微生物学检查及时送检/暂用30%甘油缓冲水保存SS平板（无色透明小菌落）血清学反应（玻片凝集）明确诊断分离培养新鲜脓血便/肛拭双糖培养基（生化反应）快速诊断荧光菌球试验协同凝集试验乳胶凝集试验分子生物学方法41编辑版ppt四、防治原则现致力于活菌苗的研究。如链霉素依赖株（Sd）。口服后，产生SIgA。同时，血清中的IgM、IgG特异抗体也增多。Sd活疫苗的免疫保护具有特异性。药物治疗：应注意耐药菌株。42编辑版ppt43编辑版ppt小结痢疾杆菌的形态特点？培养特点？致病物质有哪些？引起什么疾病？所引起疾病在临床上的分类？何为链霉素依赖株（Sd）？44编辑版ppt其中许多为人畜共患病第三节沙门菌属一大群人与动物肠道中的寄生菌菌群菌型甚多，仅少数对人致病对人致病的有伤寒沙门氏菌，甲﹑乙﹑丙型副伤寒沙门氏菌，鼠伤寒沙门菌、猪霍乱沙门菌和肠炎沙门菌等。45编辑版ppt一、生物学性状

大小0.6-1×2-3um。周身鞭毛、一般无荚膜，少数有微荚膜。（一）形态与染色（二）培养特性普通琼脂平板形成中等大小、无色半透明的S型菌落。46编辑版ppt硫化氢试验（+）（-）乳糖发酵试验伤寒杆菌大肠杆菌（三）生化反应：常用于细菌种与亚种间的鉴别（-）（+）大肠杆菌乙型副伤寒47编辑版ppt（四）抗原构造主要有O、H两种抗原，少数菌还有一种表面包膜抗原，因其与细菌毒力有关，而称之为毒力相关抗原（Vi抗原）。

Vi48编辑版ppt二、致病性(掌握)致病物质侵袭力：细菌的粘附、穿透力及扩散力；内毒素：发热、白细胞数下降等；肠毒素：类似ETEC产生的肠毒素。细菌粘附在小肠粘膜上皮细胞并穿入到上皮下层繁殖

粘膜固有层的吞噬细胞吞噬49编辑版ppt胆囊-----肠道-------粪排菌皮肤----血栓出血--玫瑰疹肾-----尿肝脾-----肿大骨髓------受抑制1.伤寒和副伤寒(肠热症)伤寒和甲型副伤寒沙门菌小肠上部粘膜肠系膜淋巴结

固有层淋巴结进入血液再次进入血液第一次菌血症第二次菌血症50编辑版ppt肠热症摄入的细菌肠系膜淋巴结胸导管全身疼痛、不适发热（前驱期第1周）菌血症肝、脾、肾及胆囊等，细菌被吞噬细胞吞噬胆囊肾脏持续高热、肝脾肿大、全身中毒、玫瑰疹、相对缓脉（第2-3周）菌血症进入肠壁淋巴组织粪便尿并发症：肠穿孔、血栓性静脉炎、胆囊炎典型病例病程为3-4W孤立和集合淋巴结坏死溃疡淋巴管51编辑版ppt2、胃肠炎（食物中毒）：最常见鼠伤寒沙门菌猪霍乱沙门菌肠炎沙门菌大于108食物中毒（发热、恶心、呕吐、腹痛、水样泻）3、败血症：希氏沙门菌鼠伤寒沙门菌猪霍乱沙门菌肠炎沙门菌血败血症（高热、寒战、厌食、贫血）脑膜炎、骨髓炎、胆囊炎、心内膜炎52编辑版ppt4、无症状带菌者约1-5%伤寒或副伤寒患者，症状消失1年后，粪便仍可排菌，这些菌主要留在胆囊中，有传染性。53编辑版ppt三、免疫性本菌为胞内寄生菌，故特异性免疫以细胞免疫为主，伤寒或副伤寒后获得牢固免疫性。54编辑版ppt伤寒和副伤寒

食物中毒

败血症第1周取静脉血 可疑食物 血第1-3周取骨髓液 呕吐物 第2周起取粪、尿 粪 三、微生物学检查标本SS平板生化反应血清学鉴定双糖发酵等玻片凝集试验（一）细菌学检查55编辑版ppt阳性率（%）发病后周数1234567880706050403020100伤寒病人不同病期血、粪、尿中病原菌的检出阳性率血粪尿56编辑版ppt（二）血清学诊断——肥达试验1、定义：用已知的伤寒沙门菌O、H抗原和甲型副伤寒沙门菌H抗原与不同稀释度的待检血清作定量凝聚试验，根据抗体的含量和动态变化以辅助临床诊断伤寒病原菌的一种血清学试验。三、微生物学检查57编辑版ppt伤寒沙门菌O、H抗原甲型副伤寒沙门菌H抗原肖氏沙门菌H抗原希氏沙门菌H抗原+待检血清（不同稀释度）定量凝聚试验抗体的效价58编辑版ppt1.考虑正常人群抗体水平：O≥1:80,H≥1:1602.动态观察：恢复期效价增加≥4倍3.O-AbIgM,出现早，维持时间短

H-AbIgG,出现迟，维持时间长,易受非特异性刺激而重现，如预防接种或非特异性回忆反应O高H高肠热症可能性大O低H低排除O高H低早期或有交叉反应的其它沙门菌感染O低H高预防接种或曾患过伤寒肥达试验的结果判断59编辑版ppt

4.其他：少数病例，在整个病程中，肥达反应始终正常，原因可能为早期使用大量抗