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文档简介
1蛋白质高效纯化技术规范4.1组氨酸。4.12纯化填料。25.6水浴锅。5.10磁力搅拌器。5.12高压制备液相。5.14磁力搅拌器。5.16高压层析系统。5.18落地式电动搅拌。5.19气动搅拌机罐。5.20冻干机。5.22医用低温保存箱。5.23超低温冰箱。5.24高效液相色谱仪。5.26紫外分光光度计。5.27超纯水机。5.28数显涡旋仪。5.29低速台式离心机。5.30高速冷冻离心机。5.31管式离心机。5.32高压均质机。5.33冷却水循环机。5.34高速分散机。5.36超滤膜。5.37过滤器。3均质机破碎,获得重组蛋白包涵体(浓悬浊液,又称“包涵体泥加入由氯化钠、纯水混合制成的缓冲液,将包涵体泥浆清洗2次,每次清洗后,使用管式离心机6.2.1.1在清洗离心获得的包涵体泥浆中加入由氢氧化钠、氨丁三醇、盐酸、纯水混合制成的缓冲液6.2.1.2进行两步反相色谱纯化,经等电点沉淀后,获取纯化主6.2.2.1使用色谱树脂填料进行色谱6.2.2.2使用由氨丁三醇、异丙醇、甲酸、纯水混合制成的缓冲液对层析柱进行冲洗、灭菌、再生、6.2.2.3将溶解稀释后的包涵体溶液上柱,通过层析系统、中低压制备液相、高压制备液相等操控将6.2.2.4使用缓冲液洗脱层析柱上的目标6.2.2.5纯化结束后用缓冲液冲洗色谱树脂,进行清洗6.2.3.1使用由氢氧化钠、盐酸混合制成的pH调节剂将色谱纯化得到的蛋白溶液的pH值调节至等6.2.3.2目的蛋白析出为沉淀,使用管式离心机进行分离,离心过程通过冷却水循环机对管式离心机6.3.1.1使用色谱树脂填料进行色谱6.3.1.2使用由氯化钠、冰醋酸、组氨酸、磷酸氢二钠十二水化合物、纯水混合制成的缓冲液对层析6.3.1.3将稀释后的包涵体溶液上柱,通过层析系统、中低压制备液相、高压制备液相等控制蛋白液6.3.1.4使用缓冲液洗脱层析柱上的目标6.3.1.5纯化结束后用缓冲液冲洗色谱树脂,进行清洗46.3.2.1使用过滤孔径为0.001μm~0.1μm的过滤膜,在外界压力作用下截6.3.2.2超滤产生的滤过废液和少量
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