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DB22DB22/T3473—2023牛呼吸道合胞体病病原学诊断技术Pathogenicdiagnostictechniquesofbovinerespiratorysyncytialdisease2023-04-25发布2023-05-23实施吉林省市场监督管理厅发布I1GB/T6682分析实验室用水规NY/T541-2016兽医诊断样品采集、保存与运输BRSV：牛呼吸道合胞体病毒（BovineRespirat该病发生。牛、羊易感，犊牛最易感。主要传染源是病畜和带毒畜。直接接触和飞沫经呼吸道传播是235'-TGCTATGTGTTGCTG在样品制备区将经6.4.1或6.4.2处理过的待检样品、阳性对照、阴性对照按所选取的病毒RNA提取试剂盒说明书进行提取。提取的RN制反应体系。在样品制备区，依次将待检样品的模板RNA、BRSV阳性对照和阴性对照加入配置好的反12345864在产物分析区将5µL的6×上样缓冲液加入到RT-PCR产物中，混匀后取8µL加2000marker作为电泳参照物。调节电压5V/cm，电泳时间约25min。电泳结束后，用凝胶成像仪5’-ATTAGCAGCAGGTGATAGATC-3’5’-CCTACTACCTCCTCTAGTTGA-3’5’-FAM-GCCTCACTGCAGTCATTAGGAGAGCCA-BHQ1-3’在试剂准备区，冰浴条件下按照表4将除模版RNA以外的各组分加入至0.2mLPCR管，配制Real-timeRT-PCR反应体系。在样品制备区，依次将待检样品的模板RNA、BRSV阳性对照和阴1213154556576氯化钠（NaCl）氯化钾（KCl）磷酸二氢钾(KH2PO4)0.24g取青霉素1000000IU、链霉素1灭菌双蒸水g(资料性)试验成立条件图牛呼吸道合胞体病毒RT-PCR检测阳性参见图B.1。M:DL2000Marker;1:阳性样品；2:阴性样品图B.1牛呼吸道合胞体病毒RT-PCR检测结果参照图牛呼吸道合胞体病毒实时荧光RT-PCR检测结果参见图

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