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文档简介
DB14山西省市场监督管理局发布I 1 1 1 1 1 2 3 4本标准由山西省农业农村厅提出并监督实施。1猪流行性腹泻病毒抗体ELISA检测方法本标准规定了应用间接酶联免疫吸附法检测血清中猪流行性腹泻病毒抗体方法的缩略语、实验原OD：光密度值(opticaldenHRP：辣根过氧化物酶(horseradishperoxidas本标准采用间接酶联免疫吸附法（间接ELISA），该方法利用抗原抗体反应具有特特异性的猪流行性腹泻病毒S蛋白包被固相载体酶标板，加入待检血清后，如果样品中含有猪流行性腹相应的抗体量成正比，可借助OD450nm值的实验操作在15℃~25℃下进行。未灭活的感染性材料的实验活动，应在Ⅱ级生物安全柜内进行。4.2仪器5.2样品准备2取动物全血，待血液充分凝固后，4000r/min离心10min，收集血清。也可等5.3包被用包被液将包被抗原稀释至工作浓度1.5μg/mL，加至抗原包被板5.4封闭5.5待检血清的稀释5.6操作步骤5.6.1加样5.6.2洗涤5.6.4洗涤每个反应孔加入底物液100μL，置20℃~25℃下避光显色10min。试验成立的条件：阳性对照OD450nm值≥0.8，阴性对照OD若被检样品（S-N）/(P-N)≥0.2，该样品判为猪流行性腹泻病毒抗体阳性；若被检样品（S-N）/(P-N)<0.2该样品判为猪流行性腹泻病毒抗3S=样品孔OD450nm值，N=阴性对照孔平均OD450操作区应有专门的固体和液体废弃物收集容器，废4试剂配制方法A.1包被液加800mL蒸馏水充分溶解，定容至10A.2洗涤液氯化钠（NaCl）十二水磷酸氢二钠（Na2HPO4•12H2A.3底物液A.4终止液A.5样品稀释液A.6封闭液牛血清白蛋白（BSA）5A.7
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