2025年高考生物复习之发酵工程与细胞工程

2025年高考生物复习新题速递之发酵工程与细胞工

选择题（共18小题）

1.研究小组用作物秸秆、小型发酵瓶、纤维素分解菌和酵母菌生产燃料乙醇（葡萄糖的酒精发酵）。下列

叙述正确的是（）

A.对秸秆进行灭菌后直接用酵母菌进行酒精发酵

B.接种后采用高压蒸汽灭菌法对培养液进行灭菌

C.发酵过程中需要适时松开瓶口目的是提供氧气

D.酸性重铭酸钾检测酒精时需排除葡萄糖的影响

2.花生的根系在生长过程中会分泌苯甲酸、苯乙酮等物质（这些物质不是花生基本的生命活动所必需的）

以抑制某些病菌和其他植物的生长。同一片土地多年连续种植花生会导致这些有毒物质不断积累，造成

花生产量下降。某大学通过“采集根际土壤一选择培养一分离、纯化培养一菌种鉴定”筛选出可将苯甲

酸降解为无毒小分子（CO2、H2O等）的根际菌，分离、纯化培养的具体操作如图所示。下列相关叙述

错误的是（）

2mL2mL0.1mL

振荡20min多次纯

化培养

土壤10g90mL无菌水土壤悬浮液

A.花生根系分泌的苯甲酸、苯乙酮等物质属于次生代谢物

B.可从多年连续种植花生的土壤中寻找降解苯甲酸的根际菌

C.该实验需配制以苯甲酸为唯一碳源的选择培养基进行培养

D.若每次稀释10倍，图中的a为18,图中将土壤稀释了103倍

3.为筛选高效降解淀粉的微生物，提高“生化”处理的效率，研究人员将厨余垃圾机械化处理后加入装

有无菌水的锥形瓶中制备厨余垃圾浸出液，然后进行如图所示操作。下列叙述错误的是（）

挑矍翦鹫培养出大量

高效降解淀

滴加碘液粉的微生物

①X培养基

餐余垃圾X培养液丫培养基

浸出液

A.厨余垃圾浸出液接种在X培养基上，采用的是稀释涂布平板法

B.X培养基中①处菌落的周围没有透明圈，可能是自养型的杂菌

C.获得高效降解淀粉的微生物，应挑⑤处的菌落接种到丫培养基

D.微生物在丫培养基中与营养物质接触更充分，更容易形成菌落

4.制备筛选支原体的培养基时，需要在基础培养基里添加动物血清、酵母浸液、青霉素等。多数4〜5d

长出“油煎蛋”状菌落。下列相关叙述错误的是（）

A.动物血清可以提供营养和生长因子促进支原体的生长和增殖

B.可以在筛选支原体的培养基里添加青霉素以防止杂菌污染

C.实验时用无水乙醇对实验员的手消毒效果差且有安全隐患

D.临床上根据菌落特征确诊是否支原体感染是高效而准确的

5.某生物活动小组为探究当地农田土壤中分解尿素的细菌的数量，进行了取样、系列梯度稀释、涂布平

板、培养、计数等步骤，实验操作过程如图，下列说法正确的是（）

A.图中接种的培养基是以尿素为唯一氮源的固体培养基，能生长的微生物都能合成胭酶

B.若每支试管稀释10倍，则图中a的数值应为2.7,5号试管共稀释了倍

C.图中左上角培养基菌落连成一片，可能是稀释倍数不够造成的

D.若仅以4号试管接种培养基计数，5g该土壤中含分解尿素菌的估算数目是1.4X108个

6.传承数千年的传统发酵食品是中华饮食文化的重要载体，而在发酵食品制作过程中，控制发酵条件至

关重要。下列叙述正确的是（）

A.做泡菜时将盐水浸没全部菜料的目的是杀死菜料表面的杂菌

B.利用乳酸菌制作酸奶的过程中，先通气培养，后密封发酵

C.在制作米酒过程中，加酒曲之前需将蒸熟的糯米冷却以避免高温杀死菌种

D.利用米曲霉发酵生产酱油过程中，不断搅拌有利于其通过无氧呼吸快速繁殖

7.研究者从土壤中分离得到多株细菌，筛选出对草莓灰霉病病原体（G菌）有显著抑制作用的菌株Z,Z

菌株的发酵液对G菌的抑制效果如图。

注：图中牛津杯是一种无底金属环，内置发酵液

下列相关说法错误的是（）

A.从土壤中分离获得Z菌单菌落时可使用平板划线法

B.使用平板培养Z菌株后提取该菌株的发酵液

C.对照组应加入等量培养Z菌株的无菌培养基

D.实验组、对照组G菌接触发酵液前菌落直径应相同

8.尿素是一种重要的农业肥料，经细菌分解后能更好地被植物利用。某生物兴趣小组开展“土壤中分解

尿素的细菌分离与计数”的实验的具体操作流程如图所示。下列相关叙述错误的是（）

0.5mL0.5mL0.1mL

10g土样90mL无菌水土壤悬浮液

A.分解尿素的细菌能合成）R酶，JR酶能将尿素分解成NH3

B.振荡可使土样中的微生物均匀分布在无菌水中

C.稀释涂布平板法既能分离微生物，也能统计样品中活菌的数目

D.图中纯化培养得到的微生物均具有分解尿素的能力

9.大肠杆菌能在基本培养基上生长，X射线照射后产生的大肠杆菌不能在基本培养基上生长，但可以在

完全培养基上生长。夹层培养法多用于营养缺陷型菌株的筛选，其具体操作是：先在培养皿底部倒一薄

层已灭菌的基本培养基；待冷凝后，再添加一层内含菌液（经过X射线处理）的基本培养基；冷凝后

再加一薄层的基本培养基。培养一段时间后，对首次出现的菌落做好标记；然后再加一层完全培养基，

经培养后会长出形态不一的菌落（如图所示）。下列说法错误的是（）

A.X射线可能诱发基因突变导致大肠杆菌营养缺陷

B.夹层培养法不适用于对需氧型微生物进行筛选

C.首次出现的菌落做标记时，应在皿盖上做标记

D.最后培养基上形态较小的菌落可能是营养缺陷型菌株

10.我国研究人员利用“中华赛猴桃”和“美味掰猴桃”两个不同种培育出了更加优良的品种H,其过程

如图所示。已知用X射线处理会使染色体受影响而导致细胞失去分裂能力；用碘乙酰胺处理会使细胞

内的酶失活而抑制生长。下列有关叙述错误的是（）

A.图中②过程使用纤维素酶和果胶酶进行处理，得到原生质体B、D

B.过程③采用PEG、灭活病毒诱导融合等方法得到的两两融合的细胞有3种

C.①过程用X射线处理A,碘乙酰胺处理C,可筛选到F,以便获得优良品种H

D.培育优良品种H的过程运用了植物细胞的全能性和细胞膜的流动性

11.世界首例体细胞克隆猴在中国产生，体细胞克隆猴的成功将为人类健康做出巨大贡献，培育克隆猴的

流程如图所示。据图分析，下列叙述错误的是（）

猴A胚胎成

纤维细胞

注入Kd4d（组蛋白

卵母细胞

去甲基化酶）mRNA

注入TSA（组蛋白脱

乙酰化酶抑制剂）

A.将成纤维细胞注入去核卵母细胞前，用灭活的仙台病毒短暂处理的目的是利于细胞融合

B.克隆猴“中中”和“华华”的细胞质基因来自猴A和猴B

C.组蛋白的甲基化和乙酰化不利于重构胚完成细胞分裂和发育过程

D.体细胞克隆猴的成功便于建立某些疾病模型和药物筛选

12.骆驼蓬主要分布在干旱和半干旱地区，能防风固沙。骆驼蓬合成的多种生物碱具有抗肿瘤作用。科研

人员利用骆驼蓬下胚轴进行育苗和生物碱提取，过程如图所示。下列说法正确的是（）

提取生物碱

骆鸵蓬无忐|①.②③____________

愈伤组织—骆鸵蓬幼苗

下胚轴切段

A.下胚轴切段需用酒精和次氯酸钠进行灭菌处理

B.过程①和过程②分别发生了细胞的脱分化和再分化

C.由无毒下胚轴经组织培养获得的骆驼蓬无毒幼苗可抵抗病毒的侵染

D.骆驼蓬具有防风固沙的作用，体现生物多样性的间接价值

13.基因组印记（指基因根据亲代的不同而有不同的表达，印记基因的存在可导致细胞中等位基因一个表

达另一个不表达）阻碍了哺乳动物的孤雌生殖。某研究团队利用甲基化酶、去甲基化酶和基因编辑技术,

改变了小鼠生殖细胞的“基因组印记”，使其“变性”，然后将一个极体注入修饰后的次级卵母细胞（类

似受精作用），最终创造出“孤雌生殖”的小鼠。实验过程如图所示。下列叙述正确的是（）

第二极体

某些基因甲注入,完成减数

基化一$分裂口，

某些基因甲并融合，

去基化含蠹乙代孕母鼠孤雄小鼠

A.推测孤雌小鼠体细胞中染色体数目是卵母细胞中染色体数目的一半

B.体外培养卵母细胞时，培养皿甲需定期更换培养基以去除代谢产物

C.图中乙为囊胚，其中内细胞团的部分细胞将来发育为胎盘、胎膜

D.基因组印记导致一对等位基因中的一个基因发生突变而不能表达

14.在甲型流感单克隆抗体的制备过程中，杂交瘤细胞在克隆化培养时来自B淋巴细胞的染色体往往出现

随机丢失现象。不考虑基因间的影响和其他变异，下列叙述错误的是（)

A.B淋巴细胞可从多次间歇注射甲型流感疫苗的动物脾脏中筛选获得

B.利用细胞融合技术制备的甲型流感单克隆抗体可用于治疗甲型流感

C.利用抗体检测筛选的杂交瘤细胞经克隆化培养，具有持续产生甲型流感单克隆抗体的能力

D.若杂交瘤细胞丢失某染色体后不能分泌单克隆抗体，则该抗体的基因可能位于该染色体上

15.治疗性克隆对解决供体器官缺乏和器官移植后免疫排斥反应具有重要意义，具体流程如图所示，下列

叙述错误的是（）

移植

囊胚

A.个体A提供的卵母细胞通常是指MII期的卵母细胞

B.胚胎干细胞一般来自囊胚中的内细胞团

C.若将图中获得的组织器官移植至个体B,一般不会发生免疫排斥反应

D.我国禁止生殖性克隆，因为其面临伦理问题，而治疗性克隆不会面临伦理问题

16.非对称细胞融合技术是指利用射线照射某原生质体，破坏其细胞核；用蕊香红6G处理另一原生质体,

使其细胞质失活，然后诱导两原生质体融合。研究者利用该技术获得了抗三嗪类除草剂（芸苔叶绿体基

因控制）的萝卜新品种。下列说法错误的是（）

A.用纤维素酶和果胶酶处理两种植物的组织细胞获得原生质体

B.用射线照射芸苔原生质体，用蕊香红6G处理萝卜原生质体

C.可用聚乙二醇、灭活的病毒、电激等方法诱导原生质体融合

D.融合后的原生质体必须经过筛选才可获得杂种细胞的原生质体

17.我国科学家成功地用iPS细胞克隆出了活体小鼠，部分流程如图所示，其中Kdm4d为组蛋白去甲基化

酶，TSA为组蛋白脱乙酰酶抑制剂。下列说法正确的是（）

小分子化合物

小鼠成纤I①.细而

Kdm4d的mRNA

维细胞A1PS细胞

重构胚一^-克隆鼠

卵母细胞」^去核卵母细胞

TSA

A.组蛋白脱乙酰化和去甲基化有利于重构胚后续的胚胎发育过程

B.用电刺激、Ca?+载体等方法激活重构胚，使其完成细胞分裂和发育进程

C.iPS细胞可以发育成克隆鼠，具有全能性

D.图示流程运用了重组DNA、体细胞核移植、胚胎移植等技术

18.为实现对濒危种质资源的抢救性保护，我国科学家首次成功克隆出西藏濒危牛种，突破了高原牛种体

细胞克隆技术难题。下列叙述正确的是（）

①从西藏濒危牛身体某一部位上取体细胞注入去核卵母细胞中即可完成发育进程

②体细胞核移植比胚胎细胞核移植难度大是因为体细胞的分化程度比胚胎细胞的高

③进行胚胎移植前，需要对供体和受体进行免疫检查，以防止发生免疫排斥反应

④对濒危牛的桑甚胚或囊胚进行胚胎分割后培养可获得多个具有相同遗传物质的后代

A.①②B.①③C.②③D.②④

解答题（共2小题）

19.如图为单克隆抗体制备流程示意图。据图回答问题:

@骨髓癌细胞

将特定的抗@@@（不能在HAT培

@@@养基上生长）

原注入小鼠杂交瘤

细胞分

混合并进行

细胞融合，-

,HAT

某些淋巴细胞培养基上未融合选育出产生

（产生特异抗体）培养。细胞死亡高特异性抗

杂交瘤体的细胞

细胞生长

（1）给小鼠注射抗原后使其产生分泌相应抗体的B淋巴细胞准确地说是一种细胞，此过程属

于特异性免疫中的免疫。

（2）制备单克隆抗体过程中要用到动物细胞培养和细胞融合技术，利用这种方法所得的杂交瘤细胞的

主要特点是o

（3）在进行细胞培养时，一般会出现贴壁生长和现象；培养液通常含有葡萄糖、氨基酸、

无机盐、维生素、促生长因子等营养物质，此外还要加入；培养时要向培养液中通入

95%的空气和5%的C02的混合气体，其中通入空气的原因是o

（4）细胞融合是随机的过程，在HAT培养基中培养，目的是,而为选育出能产生高

特异性抗体的细胞，要将从HAT培养基上筛选出的细胞稀释到7〜10个细胞/mL,每孔滴入0.1mL细

胞稀释液，其目的是o

20.米诺环素（分子式：C23H27N3O7）是一种四环素类抗生素，一般用于人类疾病治疗和畜禽养殖。米诺

环素进入人体或动物体内后不能完全被吸收，其进入环境后会在环境中残留，造成环境污染。某研究人

员在自然水域中通过筛选和分离得到了一种米诺环素高效降解菌DM13,并对该菌进行了相关研究。如

表是相关过程中使用的培养基种类及培养基配方，回答下列问题。

培养基种类配方

BPM培养基蛋白腺5.0g、牛肉膏3.0g、氯化钠5.0g,蒸镭水定容至1000mL

BPMA培养基蛋白豚5.0g、牛肉膏3.0g、氯化钠5.0g、琼脂25.0g,蒸储水定容至1000mL

无机盐培养基MgSO4・7H2O0.15g、FeSO4.7H2OO.Olg>CaC120.02g>KH2PO41g、Na2Hpe）41g、

NH4NO31g>葡萄糖0.5g,蒸储水定容至1000mL

（1）培养基的配制：按配方通过计算、称量、溶解等步骤配制培养基，培养基经灭菌后

使用。

（2）扩大培养：在BPM培养基中添加一定浓度的,对采集的水样中的微生物进行选

择培养，该物质可以为微生物生长提供o

（3）分离高效降解菌：用法接种经上述选择培养得到的微生物，该步骤选择的

培养基为（填“BPM”“BPMA”或“无机盐”）培养基。

（4）测定降解效果:为了测定菌株DM13在自然水体中降解米诺环素的效果，应该用配

制四种不同初始质量浓度的米诺环素溶液。进行实验：

①8h处理后，在米诺环素溶液初始质量浓度为100ug/L的水体中，空白对照组测得的米诺环素溶液质

量浓度为4L8ng/L,加入菌株DM13的实验组测得的质量浓度为24.3咫/L,相较于空白对照组，米诺环

素降解菌DM13的降解率为（用百分数表示，保留一位小数）。

②为了测定菌株DM13的实际降解效果，可选择表中的无机盐培养基替换自然水体，这样做的目的

是O

2025年高考生物复习新题速递之发酵工程与细胞工程（2024年9月）

参考答案与试题解析

一.选择题（共18小题）

1.研究小组用作物秸秆、小型发酵瓶、纤维素分解菌和酵母菌生产燃料乙醇（葡萄糖的酒精发酵）。下列

叙述正确的是（）

A.对秸秆进行灭菌后直接用酵母菌进行酒精发酵

B.接种后采用高压蒸汽灭菌法对培养液进行灭菌

C.发酵过程中需要适时松开瓶口目的是提供氧气

D.酸性重铭酸钾检测酒精时需排除葡萄糖的影响

【考点】果酒、果醋的制作；发酵工程在食品、医药、农牧业等工业上的应用.

【专题】正推法；果酒、果醋、腐乳和泡菜的制作.

【答案】D

【分析】果酒的制作离不开酵母菌，酵母菌是兼性厌氧微生物，在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，

大量繁殖，把糖分解成二氧化碳和水；在无氧条件下，酵母菌能进行酒精发酵。故果酒的制作原理是酵

母菌无氧呼吸产生酒精，酵母菌最适宜生长繁殖的温度范围是18〜30℃；生产中是否有酒精的产生，

可用酸性重铭酸钾来检验，该物质与酒精反应呈现灰绿色。

【解答】解：A、酵母菌不能直接对秸秆进行分解，需要将秸秆分解成葡萄糖才可以利用，A错误；

B、接种前采用高压蒸汽灭菌法对培养液进行灭菌，B错误；

C、发酵过程中需要适时松开瓶口目的是排出二氧化碳，C错误；

D、酸性重铭酸钾检测酒精时需排除葡萄糖（含有还原性）的影响，避免出现误差，D正确。

故选：D。

【点评】本题考查酵母菌发酵的相关知识，意在考查学生的识记能力和判断能力，运用所学知识综合分

析问题的能力是解答本题的关键。

2.花生的根系在生长过程中会分泌苯甲酸、苯乙酮等物质（这些物质不是花生基本的生命活动所必需的）

以抑制某些病菌和其他植物的生长。同一片土地多年连续种植花生会导致这些有毒物质不断积累，造成

花生产量下降。某大学通过“采集根际土壤一选择培养一分离、纯化培养一菌种鉴定”筛选出可将苯甲

酸降解为无毒小分子（CO2、H2O等）的根际菌，分离、纯化培养的具体操作如图所示。下列相关叙述

错误的是（）

2mL2mL0.1mL

一多次纯

化培养

土壤10g90mL无菌水土壤悬浮液X凿

amL无菌水

①②③④⑤

A.花生根系分泌的苯甲酸、苯乙酮等物质属于次生代谢物

B.可从多年连续种植花生的土壤中寻找降解苯甲酸的根际菌

C.该实验需配制以苯甲酸为唯一碳源的选择培养基进行培养

D.若每次稀释10倍，图中的a为18,图中将土壤稀释了1。3倍

【考点】选择培养基.

【专题】模式图；微生物的分离、培养和应用.

【答案】D

【分析】1、培养微生物的培养基按照物理性质划分可分为固体培养基、液体培养基和半固体培养基，

固体培养基具有容易观察和记录细胞的生长形态和行为；按照功能划分分为选择培养基和鉴别培养基，

选择培养基是指根据某种（类）微生物特殊的营养要求或对某些特殊化学、物理因素的抗性而设计的，

能选择性区分这种（类）微生物的培养基。利用选择性培养基，可使混合菌群中的某种（类）微生物变

成优势种群，从而提高该种（类）微生物的筛选效率。

2、植物代谢会产生一些一般认为不是植物基本的生命活动所必需的产物一次生代谢物。次生代谢物是

一类小分子有机化合物（如酚类、菇类和含氮化合物等），在植物抗病、抗虫等方面发挥作用，也是很

多药物、香料和色素等的重要来源。

【解答】解：A、因为花生根系分泌的苯甲酸、苯乙酮等物质是其生存非必需的物质，所以属于次生代

谢物，A正确；

B、降解苯甲酸的根际菌大多分布在富含苯甲酸的环境中，多年连续种植花生的土壤中苯甲酸含量相对

较高，因此从这种土壤中获得降解苯甲酸的微生物的几率要高于普通环境，B正确；

C、为确保能够分离得到苯甲酸分解微生物，常将土壤稀释液先进行选择培养，该培养基应以苯甲酸为

唯一碳源，其他营养物质适宜，C正确；

D、分离、纯化培养时，采用稀释涂布平板法接种，先进行等浓度梯度稀释，如果每次稀释10倍，则

取2mL菌液需要添加18mL无菌水，图中一共稀释了4次，因此总共稀释了IO4倍，D错误。

故选：D。

【点评】本题考查微生物培养的相关知识，意在考查学生的识记能力和判断能力，运用所学知识综合分

析问题的能力是解答本题的关键。

3.为筛选高效降解淀粉的微生物，提高“生化”处理的效率，研究人员将厨余垃圾机械化处理后加入装

有无菌水的锥形瓶中制备厨余垃圾浸出液，然后进行如图所示操作。下列叙述错误的是（）

培养一R④

或时间②方都挑里.落B-

滴加碘液史9⑤接种夫褊微生砺

餐余垃圾X培养液°X培养基丫培养基

浸出液

A.厨余垃圾浸出液接种在X培养基上，采用的是稀释涂布平板法

B.X培养基中①处菌落的周围没有透明圈，可能是自养型的杂菌

C.获得高效降解淀粉的微生物，应挑⑤处的菌落接种到丫培养基

D.微生物在丫培养基中与营养物质接触更充分，更容易形成菌落

【考点】微生物的选择培养（稀释涂布平板法）.

【专题】模式图；微生物的分离、培养和应用.

【答案】D

【分析】微生物常见的接种的方法：

①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始

部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。

②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌

落。

【解答】解：A、分析题图可知，X培养基上接种细菌采用稀释涂布平板法，A正确；

B、X培养基中①处菌落的周围没有透明圈，可能该微生物可以利用空气中的二氧化碳作为碳源，是自

养型的杂菌，B正确；

C、⑤处透明圈最大，说明降解淀粉的能力最强，故为获得高效降解淀粉的微生物，应挑⑤处的菌落接

种到丫培养基，C正确；

D、丫培养基是液体培养基，不能形成菌落，D错误。

故选：D。

【点评】本题考查微生物培养的相关知识，意在考查学生的识记能力和判断能力，具备运用所学知识综

合分析问题的能力是解答本题的关键。

4.制备筛选支原体的培养基时，需要在基础培养基里添加动物血清、酵母浸液、青霉素等。多数4〜5d

长出“油煎蛋”状菌落。下列相关叙述错误的是（）

A.动物血清可以提供营养和生长因子促进支原体的生长和增殖

B.可以在筛选支原体的培养基里添加青霉素以防止杂菌污染

C.实验时用无水乙醇对实验员的手消毒效果差且有安全隐患

D.临床上根据菌落特征确诊是否支原体感染是高效而准确的

【考点】选择培养基.

【专题】正推法；微生物的分离、培养和应用.

【答案】D

【分析】1、固体培养甚主要用于微生物的分离、鉴定。

2、选择培养基是根据某种微生物的特殊营养要求或其对某化学、物理因素的抗性而设计的培养基使混

合菌样中的劣势菌变成优势菌，而提高该菌的筛选率。

【解答】解：A、支原体的生长和增殖需要培养基中提供营养和生长因子，动物血清可以满足，A正确;

B、添加青霉素可以杀死其他杂菌，可以筛选出支原体，B正确；

C、对实验员的手消毒需要用70%的酒精，不能用无水乙醇，C正确；

D、临床上筛选支原体感染，需要制备筛选支原体的培养基，过程繁琐，且支原体菌落特征不明显，不

好区分其他杂菌的菌落，运用核酸和抗原检测是高效且准确的，D错误。

故选：Do

【点评】本题考查选择培养基的相关知识，意在考查学生的识记能力和判断能力，运用所学知识综合分

析问题的能力是解答本题的关键。

5.某生物活动小组为探究当地农田土壤中分解尿素的细菌的数量，进行了取样、系列梯度稀释、涂布平

板、培养、计数等步骤，实验操作过程如图，下列说法正确的是（）

0.3nL

0.2mL

A.图中接种的培养基是以尿素为唯一氮源的固体培养基，能生长的微生物都能合成服酶

B.若每支试管稀释10倍，则图中a的数值应为2.7,5号试管共稀释了倍

C.图中左上角培养基菌落连成一片，可能是稀释倍数不够造成的

D.若仅以4号试管接种培养基计数，5g该土壤中含分解尿素菌的估算数目是1.4X108个

【考点】微生物的选择培养（稀释涂布平板法）.

【专题】模式图；微生物的分离、培养和应用.

【答案】B

【分析】用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中的细菌数时，在每一个梯度浓度内，至少要涂布3个平

板，选择菌落数在30〜300的进行记数，求其平均值，再通过计算得出土壤中细菌总数。

【解答】解：A、本实验是探究当地农田土壤中分解尿素的细菌的数量，因此图中接种的培养基是以尿

素为唯一氮源的固体培养基，在此培养基上能生长的微生物不一定都能合成胭酶，如固氮菌也能生存，

A错误；

B、若每支试管稀释10倍，即将0.3mL菌液与amL无菌水混合稀释10倍，需要a的数值为2.7,5g土

壤溶于溶剂形成50mL溶液被稀释了10倍，故5号试管共稀释了106倍，B正确；

C、图中左上角培养基菌落连成一片，可能是涂布不均匀造成的，C错误；

D、若仅以4号试管接种培养基计数，5g该土壤中含分解尿素菌的估算数目是(275+285+280)+3+

0.2X105X5=7X1()8个，D错误。

故选：Bo

【点评】本题考查微生物培养的相关知识，意在考查学生的识记能力和判断能力，运用所学知识综合分

析问题的能力是解答本题的关键。

6.传承数千年的传统发酵食品是中华饮食文化的重要载体，而在发酵食品制作过程中，控制发酵条件至

关重要。下列叙述正确的是()

A.做泡菜时将盐水浸没全部菜料的目的是杀死菜料表面的杂菌

B.利用乳酸菌制作酸奶的过程中，先通气培养，后密封发酵

C.在制作米酒过程中，加酒曲之前需将蒸熟的糯米冷却以避免高温杀死菌种

D.利用米曲霉发酵生产酱油过程中，不断搅拌有利于其通过无氧呼吸快速繁殖

【考点】制作泡菜；果酒、果醋的制作.

【专题】正推法；果酒、果醋、腐乳和泡菜的制作.

【答案】C

【分析】酵母菌能进行无氧呼吸产生酒精，因此可参与果酒的制作。当氧气和糖源都充足时，醋酸菌将

葡萄汁中的糖分解成醋酸；当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。泡菜制作过程

中，乳酸发酵过程即为乳酸菌进行无氧呼吸产生乳酸的过程。

【解答】解：A、做泡菜时将盐水浸没全部菜料的目的主要是营造无氧条件，A错误；

B、乳酸菌为厌氧菌，利用乳酸菌制作酸奶的过程中，不能通气培养，B错误；

C、酿制米酒时，将糯米蒸熟后立即加入酒曲，容易杀死酵母菌种，因此加酒曲之前需将蒸熟的糯米冷

却以避免高温杀死菌种，C正确；

D、利用米曲霉发酵生产酱油过程中，不断搅拌会使发酵液中溶解氧增多，有利于其通过有氧呼吸快速

繁殖，D错误。

故选：Co

【点评】本题考查传统发酵技术的相关知识，要求考生识记果酒、果醋、腐乳和泡菜的制作原理等知识，

意在考查考生的识记和分析能力。

7.研究者从土壤中分离得到多株细菌，筛选出对草莓灰霉病病原体（G菌）有显著抑制作用的菌株Z,Z

菌株的发酵液对G菌的抑制效果如图。

对照组实验组

注：图中牛津杯是一种无底金属环，内置发酵液

下列相关说法错误的是（）

A.从土壤中分离获得Z菌单菌落时可使用平板划线法

B.使用平板培养Z菌株后提取该菌株的发酵液

C.对照组应加入等量培养Z菌株的无菌培养基

D.实验组、对照组G菌接触发酵液前菌落直径应相同

【考点】选择培养基；微生物的选择培养（稀释涂布平板法）.

【专题】模式图；微生物的分离、培养和应用.

【答案】B

【分析】微生物常见的接种筛选的方法

①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始

部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。

②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌

落。

【解答】解：A、从土壤中分离获得Z菌单菌落时可使用平板划线法或稀释涂布平板法，A正确；

B、Z菌株的发酵液应该用液体培养基培养，B错误；

C、根据题意可知，对照组应加入等量培养Z菌株的无菌培养基，C正确；

D、该实验的目的是观察Z菌株的发酵液对G菌株的影响，所以实验组、对照组G菌接触发酵液前菌

落直径应相同，D正确。

故选：Bo

【点评】本题考查微生物的分离和培养，要求考生识记接种微生物常用的两种方法，能结合所学的知识

准确答题。

8.尿素是一种重要的农业肥料，经细菌分解后能更好地被植物利用。某生物兴趣小组开展“土壤中分解

尿素的细菌分离与计数”的实验的具体操作流程如图所示。下列相关叙述错误的是（）

0.5mL0.5mL0.1mL

叫土样90mL无菌水土壤悬浮液4.5荔菌水纯化培养

A.分解尿素的细菌能合成胭酶，麻酶能将尿素分解成NH3

B.振荡可使土样中的微生物均匀分布在无菌水中

C.稀释涂布平板法既能分离微生物，也能统计样品中活菌的数目

D.图中纯化培养得到的微生物均具有分解尿素的能力

【考点】微生物的选择培养（稀释涂布平板法）.

【专题】模式图；微生物的分离、培养和应用.

【答案】D

【分析】土壤中分解尿素的细菌的分离与计数实验中，需要使用以尿素为唯一氮源的选择培养基，计数

的关键是经梯度稀释后的倍数要合适，计数时通常选择菌落数在30〜300之间的实验组平板进行计数。

【解答】解：A、分解尿素的细菌能合成JR酶，在服酶的催化下能将尿素分解成NH3和二氧化碳，A正

确；

B、振荡可使土样中的微生物均匀分布在无菌水中，有利于后续的梯度稀释，B正确；

C、稀释涂布平板法既能分离微生物，也能统计样品中活菌的数目，一般情况下该方法统计的活菌数目

比实际值偏低，C正确；

D、图中纯化培养得到的微生物未必都具有分解尿素的能力，因此还需要对得到的微生物进行鉴定，D

错误。

故选：D。

【点评】本题考查微生物培养的相关知识，意在考查学生的识记能力和判断能力，运用所学知识综合分

析问题的能力是解答本题的关键。

9.大肠杆菌能在基本培养基上生长，X射线照射后产生的大肠杆菌不能在基本培养基上生长，但可以在

完全培养基上生长。夹层培养法多用于营养缺陷型菌株的筛选，其具体操作是：先在培养皿底部倒一薄

层已灭菌的基本培养基；待冷凝后，再添加一层内含菌液（经过X射线处理）的基本培养基；冷凝后

再加一薄层的基本培养基。培养一段时间后，对首次出现的菌落做好标记；然后再加一层完全培养基，

经培养后会长出形态不一的菌落（如图所示）。下列说法错误的是（）

A.X射线可能诱发基因突变导致大肠杆菌营养缺陷

B.夹层培养法不适用于对需氧型微生物进行筛选

C.首次出现的菌落做标记时，应在皿盖上做标记

D.最后培养基上形态较小的菌落可能是营养缺陷型菌株

【考点】微生物的选择培养（稀释涂布平板法）.

【专题】模式图；微生物的分离、培养和应用.

【答案】C

【分析】培养基是人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质；根据物理

性质分为固体培养基和液体培养基，培养基中一般含有水、碳源、氮源和无机盐。在提供上述几种主要

营养物质的基础上，培养基还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质和氧气的要求。例如，培养乳

酸杆菌时需要在培养基中添加维生素，培养霉菌时需将培养基的pH调至酸性，培养细菌时需将pH调

至中性或微碱性，培养厌氧微生物时则需要提供无氧的条件。

【解答】解：A、X射线可能诱发基因突变导致大肠杆菌营养缺陷，A正确；

B、夹层培养法菌株生长在两层培养基之间，氧气较少，因此夹层培养法不适用于对需氧型微生物进行

筛选，B正确；

C、首次出现的菌落做标记时应标记在皿底上，C错误；

D、营养缺陷型菌株在基本培养基不能生长，只有后期加入完全培养基后才能生长，形态较小，D正确。

故选：Co

【点评】本题考查微生物培养的相关知识，意在考查学生的识记能力和判断能力，运用所学知识综合分

析问题的能力是解答本题的关键。

10.我国研究人员利用“中华舜猴桃”和“美味然猴桃”两个不同种培育出了更加优良的品种H,其过程

如图所示。已知用X射线处理会使染色体受影响而导致细胞失去分裂能力；用碘乙酰胺处理会使细胞

内的酶失活而抑制生长。下列有关叙述错误的是（）

A.图中②过程使用纤维素酶和果胶酶进行处理，得到原生质体B、D

B.过程③采用PEG、灭活病毒诱导融合等方法得到的两两融合的细胞有3种

C.①过程用X射线处理A,碘乙酰胺处理C,可筛选到F,以便获得优良品种H

D.培育优良品种H的过程运用了植物细胞的全能性和细胞膜的流动性

【考点】植物体细胞杂交技术及应用.

【专题】模式图；植物的组织培养.

【答案】B

【分析】分析题图：图示表示植物体细胞杂交的具体过程，其中E为正在融合的原生质体，F表示杂种

细胞，G是培养得到的愈伤组织，H表示杂种植株。

【解答】解：A、图中②去除细胞壁过程，使用纤维素酶和果胶酶进行处理，得到原生质体B、D,A

正确；

B、过程③为诱导原生质体融合，可采用PEG诱导融合，不能用灭活病毒，B错误；

C、射线处理会使胞失去分裂能力，碘乙酰胺处理会使细胞内的酶失活而抑制生长，对“中华狮猴桃”

用X射线处理，对“美味舜猴桃”用碘乙酰胺处理，它们自身融合的细胞无法生长，只有当两个不同

种的原生质体融合才能生长，筛选到杂种细胞F以便最终能获得优良杂种植株H,C正确；

D、培育优良品种H的过程为职务体细胞杂交过程，运用了植物细胞的全能性和细胞膜的流动性，D正

确。

故选：Bo

【点评】本题主要考查植物体细胞杂交的相关知识，意在考查学生基础知识的掌握情况，要求学生熟练

掌握相关知识，通过分析图示获取信息，再结合所学的知识准确答题。

11.世界首例体细胞克隆猴在中国产生，体细胞克隆猴的成功将为人类健康做出巨大贡献，培育克隆猴的

流程如图所示。据图分析，下列叙述错误的是（）

猴B

注入Kd4d（组蛋白髓片卵母细胞

去甲基化酶）mRNA

去核卵母细胞

注入TSA（组蛋白防

乙酰化酶抑制剂）

中中华华

代孕猴C

A.将成纤维细胞注入去核卵母细胞前，用灭活的仙台病毒短暂处理的目的是利于细胞融合

B.克隆猴“中中”和“华华”的细胞质基因来自猴A和猴B

C.组蛋白的甲基化和乙酰化不利于重构胚完成细胞分裂和发育过程

D.体细胞克隆猴的成功便于建立某些疾病模型和药物筛选

【考点】动物细胞核移植技术.

【专题】模式图；克隆技术.

【答案】C

【分析】图示过程为体细胞克隆猴过程，该过程中应用了动物细胞培养（卵母细胞等的培养）、动物细

胞融合（去核卵母细胞与成纤维细胞融合）和胚胎移植等技术。

【解答】解：A、灭活的仙台病毒具有促融的作用，因此，将成纤维细胞注入去核卵母细胞前，用灭活

的仙台病毒短暂处理的目的是利于细胞融合，A正确；

B、据图可知，体细胞克隆猴是由去核卵母细胞和成纤维细胞融合而成，故体细胞克隆猴的线粒体DNA

来自提供卵母细胞的母猴和成纤维细胞，即克隆猴“中中”和“华华”的细胞质基因来自猴A和猴B,

B正确；

C、结合题图，重构胚在加入Kd4d的mRNA和TSA后，发育成克隆猴，而Kd4d的mRNA表达产物

为组蛋白去甲基化酶，可以使组蛋白去甲基化，TSA为组蛋白脱乙酰酶抑制剂，抑制组蛋白脱乙酰化

酶的作用，保持组蛋白乙酰化，即组蛋白乙酰化和去甲基化有利于重构胚完成细胞分裂和发育过程，C

错误；

D、克隆特定疾病模型的动物，可为研究该疾病的致病机制和开发相应的药物提供帮助，因此体细胞克

隆猴的成功便于建立某些疾病模型和药物筛选，D正确。

故选：Co

【点评】本题考查细胞核移植技术，要求考生识记细胞核移植技术的概念、过程、类型及应用，能结合

题图准确答题。

12.骆驼蓬主要分布在干旱和半干旱地区，能防风固沙。骆驼蓬合成的多种生物碱具有抗肿瘤作用。科研

人员利用骆驼蓬下胚轴进行育苗和生物碱提取，过程如图所示。下列说法正确的是（）

提取生物碱

骆鸵蓬无忐|①.②③_____________

愈伤组织—骆鸵蓬幼苗

下胚轴切段

A.下胚轴切段需用酒精和次氯酸钠进行灭菌处理

B.过程①和过程②分别发生了细胞的脱分化和再分化

C.由无毒下胚轴经组织培养获得的骆驼蓬无毒幼苗可抵抗病毒的侵染

D.骆驼蓬具有防风固沙的作用，体现生物多样性的间接价值

【考点】植物的组织培养；生物多样性的内容和价值.

【专题】模式图；植物的组织培养.

【答案】D

【分析】植物细胞工程技术的应用：植物繁殖的新途径（包括微型繁殖、作物脱毒、人工种子等）、作

物新品种的培育（单倍体育种、突变体的利用）、细胞产物的工厂化生产。

【解答】解：A、下胚轴切段需用酒精和次氯酸钠进行消毒处理，非灭菌处理，A错误；

B、过程①发生的是细胞的脱分化，过程②是愈伤组织的扩大培养，不是再分化过程，B错误；

C、由无毒下胚轴经组织培养获得的骆驼蓬无毒幼苗只是不带病毒，并不是能抵抗病毒的侵染，C错误;

D、骆驼蓬具有防风固沙的作用，这属于生态功能，体现生物多样性的间接价值，D正确。

故选：D。

【点评】本题主要考查植物细胞工程等相关知识点，意在考查学生对相关知识点的理解和掌握。

13.基因组印记（指基因根据亲代的不同而有不同的表达，印记基因的存在可导致细胞中等位基因一个表

达另一个不表达）阻碍了哺乳动物的孤雌生殖。某研究团队利用甲基化酶、去甲基化酶和基因编辑技术,

改变了小鼠生殖细胞的“基因组印记”，使其“变性”，然后将一个极体注入修饰后的次级卵母细胞（类

似受精作用），最终创造出“孤雌生殖”的小鼠。实验过程如图所示。下列叙述正确的是（）

第二极体

某些基因甲注入］完成减数

基化Y分裂n

某些基因甲并融合

次级卵

去基化孤雄小鼠

母细胞代孕母鼠

A.推测孤雌小鼠体细胞中染色体数目是卵母细胞中染色体数目的一半

B.体外培养卵母细胞时，培养皿甲需定期更换培养基以去除代谢产物

C.图中乙为囊胚，其中内细胞团的部分细胞将来发育为胎盘、胎膜

D.基因组印记导致一对等位基因中的一个基因发生突变而不能表达

【考点】动物细胞培养的条件与过程；胚胎的早期发育；表观遗传.

【专题】模式图；胚胎工程.

【答案】B

【分析】题图分析，从卵泡中取出卵母细胞，再将经过甲基化处理的卵母细胞进行早期胚胎培养、胚胎

移植等获得孤雌小鼠。表观遗传是指DNA序列不发生变化，但基因的表达却发生了可遗传的改变，即

基因型未发生变化而表现型却发生了改变，如DNA的甲基化，甲基化的基因不能与RNA聚合酶结合,

故无法进行转录产生mRNA,也就无法进行翻译，最终无法合成相应蛋白，从而抑制了基因的表达。

【解答】解：A、“孤雌小鼠”是由修饰后的次级卵母细胞和一个第二极体结合后发育形成的，孤雌小

鼠体细胞中染色体数目和卵母细胞中染色体数目相同，A错误；

B、体外培养卵母细胞时，培养皿甲需定期更换培养基以去除代谢产物，有利于卵母细胞的培养，B正

确；

C、图中乙为囊胚，其滋养层细胞将来发育为胎盘、胎膜，C错误；

D、基因组印记导致一对等位基因中的一个基因发生甲基化而不能表达，没有发生基因突变，D错误。

故选：B=

【点评】本题考查胚胎工程的相关知识，意在考查学生的识记能力和判断能力，具备运用所学知识综合

分析问题的能力是解答本题的关键。

14.在甲型流感单克隆抗体的制备过程中，杂交瘤细胞在克隆化培养时来自B淋巴细胞的染色体往往出现

随机丢失现象。不考虑基因间的影响和其他变异，下列叙述错误的是（）

A.B淋巴细胞可从多次间歇注射甲型流感疫苗的动物脾脏中筛选获得

B.利用细胞融合技术制备的甲型流感单克隆抗体可用于治疗甲型流感

C.利用抗体检测筛选的杂交瘤细胞经克隆化培养，具有持续产生甲型流感单克隆抗体的能力

D.若杂交瘤细胞丢失某染色体后不能分泌单克隆抗体，则该抗体的基因可能位于该染色体上

【考点】单克隆抗体及其应用.

【专题】免疫调节；克隆技术.

【答案】c

【分析】在制备单克隆抗体时，首先要给小鼠免疫，产生相应的B细胞，然后将B细胞与骨髓瘤细胞

融合，经过选择培养基两次筛选，最后获得能产生所需抗体的杂交瘤细胞。在单克隆抗体的制备过程中，

使用了动物细胞培养和动物细胞融合等动物细胞工程技术。

【解答】解：A、抗原能激发机体的特异性免疫过程，对动物进行间歇注射抗原处理，以刺激动物机体

产生相应的B淋巴细胞，A正确；

B、抗体与抗原能特异性结合，细胞融合技术制备的甲型流感单克隆抗体可以治疗甲型流感，B正确；

C、杂交瘤细胞在克隆化培养过程中来自B淋巴细胞的染色体往往出现随机丢失现象，若丢失的染色体

含有产生甲型流感抗体的基