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DB22DB22/T3091—2019鹿结核病病原菌实时荧光PCR检测方法Real-timePCRmethodforthedetectionofTuberculosispathogenicorganismindeer吉林省市场监督管理厅发布I1PBS磷酸盐缓冲液（phospha以DNA为模板进行PCR扩增，通过该反应，利用荧光标2上游引物5’-AGACCCCGGGACCTTCACTACAAC-3’下游引物5’-AACGACTCCGCCCCAACTG-3’探针5’-FAM-ACGGTTTGTGTAGGATAGGTGGGA-TAMRA-3’上游引物5’-CGGGCGTTTTGTCGCATCC-3’下游引物5’-GGGCGTGGGCAGACTTCGT-3’探针5’-FAM-CTTGCGGAGGAGGTTGGGGACA–TAMRA-3’7.3台式低温高速离心机（4℃,13000r/min）。3使用EDTA作为抗凝剂，无菌采集静脉血不少于5mL，样品采集后于2℃~8℃冷藏保存，然后4555待检样品能够扩增出结核分枝杆菌或牛分枝杆菌S型曲线，并且Ct值在预期的范围之内(≤6

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