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DB22DB22/T2912—2018贝类中霍乱弧菌检测微滴数字PCR法DeterminationofVibriocholeraeinshellfish-dropletdigitalPCRmethod吉林省市场监督管理厅发布I1警示——使用本标准的人员应有正规实验室工作的实践经验。本标准并未指出所有可能的安全问本标准规定了贝类中霍乱弧菌检测微滴数字PCR法的试剂和材料、仪器和设备、样品、试验步GB4789.1-2016食品安全国家标准食品卫生SN/T2425-2010进出口食品中霍乱弧菌快速及鉴定监WS/T230-2002临床诊断中聚合酶链反应（PCR）技微滴式数字PCR平台通过产生微小油包水体系实现反应体系的分割，根据霍乱弧菌的溶血性特异性基因序列对贝类中霍乱弧菌进行鉴定。经PCR扩增后，根据泊松分布原理及阳性微滴的个数与比例即可4.1裂解液,成分包括：2%CTAB(cetyltrithylammoniumbromideEDTA(ethylenediaminetet24.6异丙醇。4.9霍乱弧菌旋转酶（gyrase）基因引4.10上游引物：5’-GCCAAAATTGTGCGTATCAG-3’下游引物：5’-ATAATCTTGGGCAATCGCA-3’探针：5’-（FAM）-AACTGGCTTCCAAACTGACGATAACC-（TAMRA）-3’7.2.2按照GB/T19495.3的规定进行CTAB提取按照GB/T19495.3的规定，用核酸蛋白分析仪或紫外分光光度计（5.4）260nm和280nm的测定311152/s12℃保存反应产物。体系完成后，进行数字PCR

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