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备案号：37938-2013DB22DB22/T1819—2013饲料用酶制剂中酸性蛋白酶活力的测定分光光度法DeterminationofacidicproteaseactivityinfeedenzymepreparationsSpectrophotometricmethod2013-05-15发布2013-09-0吉林省质量技术监督局发布I1在40℃、pH3.0条件下，酸性蛋白酶1min水解酪素生成1µg酪氨酸所需要的酶量为一个酶活力酸性蛋白酶水解酪素产生酪氨酸，在碱性条件下含有酚基的酪氨酸将福林试剂还原生成钼蓝与钨标准中所有试剂，除另有规定外均为分析纯试剂，实验用水应符合GB/T6682规定的三级25.12L-酪氨酸标准品（含量≥99.0%）CAS：60-18-4。），），至容量瓶中。在沸水浴中加热至完全溶解，冷却后用乳酸缓），6.6恒温水浴摇床：温控范围30℃~60℃,精度±0.2℃。3称取适量试样（精确至0.001g）置研钵中，用少量乳酸缓冲液（入15mL乳酸缓冲液（5.19）混匀，静置，将上层清液转移至100mL容量瓶中。沉渣部分继续重复上述操作至少3次，将试样全部转移入容量瓶中，用乳酸缓冲液（5.19）定容至刻度，摇匀。根据酶活力用℃、振摇速度100次/min的水浴摇床中预热2min，加入2.0mL三氯乙酸溶液（），℃、振摇速度100次/min的水浴摇床中预热2min，加1.0mL酪素溶液（5.20摇匀，再置水浴摇床中取2.0mL三氯乙酸溶液（5.16）加入上述比色管中，摇匀，准确量取滤液1.0mL置于另一比色管中，加5.0mL碳酸钠溶液（5.15加1.0mL福林工作溶液（5.14置温度40℃±0.2℃的水浴摇床中显色20min（准确计时作为样品mL碳酸钠溶液（5.15）和1.0mL福林工作溶液（5.14）mL，置40℃±0.2℃水浴摇床中显色20min（准用标准曲线回归方程计算出对应的L-酪氨酸X=......................................

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