DB22T 1607-2012 化妆品中单核细胞增生李斯特氏菌检测　　

备案号：35741-2013DB22DB22/T1607—2012化妆品中单核细胞增生李斯特氏菌检测Detectionoflisteriamonocytogenesincosmetics2012-12-01发布2013-01-01实施吉林省质量技术监督局发布I1GB/T6682分析实验室用水规）：3.10CAMP（Christle，Atkins，Munch-Peterse）：4.1恒温培养箱：25℃±1℃,30℃±1℃,35℃±1℃。4.3均质器或灭菌乳钵。2+3h。二次增菌，取0.1mL初次增菌的培养物，加入到10mLFraser培养液用接种环取培养过的Half-Fraser增菌液的表层培养物划线接种于牛津琼脂和ALOA琼脂两种选培养48h±2h。经48h恒温培养后，检查平板上有无可疑单核细胞增生李斯特氏菌菌落。培养24h的典型李斯特氏菌在牛津琼脂上为细小（1mm）的灰色菌落，其从每种选择性培养基的每一平板中选择5个以上疑似单核细胞增生李斯特氏菌的菌落。如板中少于5个疑似菌落，须确挑去所有菌落，分别接种在木糖和鼠李糖发酵管中35℃±2h；同时在TSA-YE上划线纯化，置30℃±1℃培养24h～48h。选择木糖间β-溶血作用增强者均可认为是阳性反应。单核细胞增生李斯特氏菌或西尔李斯特氏菌在靠近金黄色将上述可疑菌做进一步的生化实验，单核细胞增生李斯特氏菌与果选择生化鉴定试剂盒或全自动微生物生化鉴定系统，可根据6.4.1的初步判断结果，4++ + L.innocua-V---L.iuanuii+-+-+-+-L.welshimeri-V+--L.grayi L.murrayi-V---，（5A.1.1.1成份水将以上组份加热溶解，调节pH值至7.2～7A.1.2.1成份A.1.3.1成份6A.1.4.1成份水A.1.5柠檬酸铁(Ⅲ)铵A.1.5.1成份柠檬酸铁(Ⅲ)铵水A.1.5.2成份将柠檬酸铁(Ⅲ)铵溶于水中，过滤除菌。A.1.6.1成份基本成份（A.1.1）柠檬酸铁(Ⅲ)铵溶液（A.1.5）A.2.1.1成份7A.2.3柠檬酸铁(Ⅲ)铵溶液A.3.1.1成份柠檬酸铁(Ⅲ)铵水A.3.2.1成分8高压灭菌的琼脂基础（A.3.1）冷至47℃时，在无菌条件上加入添加剂（A.3.2充分混匀后到），A.4.1琼脂基础A.4.1.1成分水将上述组份加入水中，煮沸使其溶解。调节pH值至7A.4.3.1成分9A.4.4.1成分A.4.5.1成分A.4.6补充液后冷却至48℃~50℃。A.4.6.1成分琼脂基础（A.4.1）萘啶酸钠溶液（A.4.2）头孢他啶溶液（A.4.3）硫酸多粘菌素B溶液（A.4.4）放线菌酮溶液（A.4.5）A.5胰酪胨大豆酵母浸膏琼脂(TS6A.6胰酪胨大豆酵母浸膏肉汤(TS水A.7.1.1成份水将各组份和脱水基质加入水中加热，如需要调节pH值使其灭菌处理后25℃时pH值为7.3±0.2，分A.7.2.1组份脱纤维绵羊血（A.7.2）A.8.1.1组份水A.8.2糖溶液A.8.2.1组份糖（鼠李糖和木糖）对于每种糖，无菌条件下1倍体积糖溶液（A.将约10ml琼脂基础（A.7.1）加入无菌培养皿中，凝固后倒入一薄层绵羊血培养基（A只培养皿不多于3ml，凝固。如基础培养基是以前就准备好的，应先置于37℃温箱保温20min，然后1621或ATCC6939并非所有的金黄色葡萄球菌菌株都适用于CA或37℃培养24h～28h，或直到开始生