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DB52DB52/T954—2014辣椒品种抗疫病温室接种鉴定技术规程Ruleforidentificationofpepperforresistancetopepperphytophthorablight2014-10-30发布2014-11-30实施贵州省质量技术监督局贵州省农业委员会I 1 1 1 2 2 5 61由辣椒疫霉(PhytophthoracapsiciLeonian)侵染引起的植株根系、茎基部、2用于人工接种鉴定的病原物或病原物的一部分,本文件特指辣椒疫霉孢子囊悬浮液,其浓度为净工作台、恒温生物培养箱、孔径规格为25mm×25mm×50mm的塑料泡沫漂浮育苗盘、直径7cm营养10%Na3PO4、NaClO、(NH4)2SO4、参鉴品种(材料)育苗采用漂浮育苗盘育苗。辣椒种子用10%磷酸三钠溶液浸种20min,用清珠岩混合,各成分所占比例分别为6070灭菌(121℃,30min播种后在辣椒种子上盖3mm左右的育苗基质,压实,然后将播种的漂浮盘放入营养液中。营养液配方为:每100kg清水加入50g硫酸铵、15g尿素、100g普通过磷酸钙、50g硫酸钾;配制营养液使用的清水应符合GB5084的蔬菜类灌溉水质要求。在18℃~25℃的自然条件下育3选取已分离鉴定属于不同生理小种的菌株回接到甜椒上复壮,待发病后从病果上直接挑取菌丝或切取一小块病组织置于选择性胡萝卜培养基(胡萝卜200g榨汁,琼脂18g,青霉素50mg/L,利福平接种前1d灌透水,接种时用玻璃棒在距幼苗茎基部约2cm处扎一深3cm左右的孔,用移液器吸取3mL含量为1.2×104/mL的孢子囊混合悬浮液注入孔中,置于温室中光暗交替培育。温室内白天为26℃~28℃,夜间为20℃~24℃,每天光照12h~14h,强度为15000Lux左右,空气相对湿度75%5.5.1调查时间4):):56

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