DB41T 873-2013 樱桃无病毒苗木繁育技术规范

DB41Technicalspecificationforpropagatiomofvirus-freeseedingofcherry河南省质量技术监督局发布I本标准主要起草人：赵改荣、李明、刘聪利、黄贞光、1樱桃无病毒苗木繁育技术规范NY/T328苹果无病毒苗木繁育不携带李矮缩病毒(Prunedwarfvirus,PDV)、李属坏死环斑病毒(Prunusnecroticringspotvirus,CGRMV）、樱桃病毒A(CherryvirusA,CVA)、樱桃坏死锈斑病毒(CCNRMV)、苹果褪绿叶斑病毒(Applechloroticleafspotviru2应经有资质的检测机构检测认证，确定不带上每株编号、挂牌标识，绘制定植图。加强肥水管理，保证树势无病毒原种圃常用工具要专用，剪枝剪等修剪工具每株使用前用70%酒精溶液消毒。工作人员进4无病毒母本圃建立4.1无病毒母本圃圃地选择4.2无病毒母本圃设计规划4.3无病毒母本圃苗木来源4.4无病毒母本圃定植无病毒品种采穗圃和砧木采种圃株行距为1m～2m×2m～4m；无性系砧木圃株行距为0.5m~4.5无病毒母本圃管理4.5.1加强母本圃肥水管理和病虫害防治，保证4.5.2无病毒无性系砧木圃的树体，应每年短截更新，其方法与普通无性系砧木母株相同。不允许在4.5.3无病毒母本圃常用工具要专用，剪枝剪等修剪工具每35.1苗圃建立各级道路、排灌系统，并统筹安排。平整土地，改良土壤，土壤消毒及增施5.2实生砧木苗培育5.3无性系砧木苗培育株编号分别繁殖。绘制各品种及株系分布图，田间插牌标记，不得压条、分株繁殖法组织培养法扦插繁殖法5.4嫁接在阴凉处立即剪去叶片。按品种扎成捆，挂牌标记母株编号。接穗存放同普通樱桃接穗。5.4.2嫁接应分品种及不同母株分别嫁接。采用带木质部芽接法嫁接，嫁接位置距地面10cm～20cm处。嫁4接后应按品种及母株编号分别记载。补接时，应与原来嫁接的接穗来源相5.5苗圃管理绿叶斑病毒可以采用木本指示植物检测法进能获得抗血清的樱桃病毒可以采用A蛋白酶联免检测。每2年对每株母本树进行一次病毒检测。7.4.1每年在生长季节对无病毒苗木进行两次全面观察，发现有病毒症状（参见56A.3解剖镜放置在超净台上，用棉球蘸消毒酒精擦拭手及台A.4将外植体接种于接种培养基（表A.1、表A.2）上，2527NAA----8定32℃,白昼温度每天增加1℃,达到37℃时，保持在白昼37℃16h/d、黑暗32℃8h/d、湿9于温室内，温室温度白天20℃~28℃,夜间9℃~15℃。Na2CO30.159gNaHCO30.294gNaClNaH2PO4·12H2OK2HPO4NaN3pH7.4gggggPBST+2%聚乙烯吡咯烷酮+0.2%卵蛋白(或牛血清蛋白BSA)NaH2PO4·12H2O8.689gD.1.7终止液（2mol/LH2SO4100mL）D.2.3加抗原样品，取樱桃嫩叶或一年生休眠枝条内皮白对照。4℃冰箱过夜，冲洗方法同D.2.1D.2.7终止反应：每孔加25μL2moD.2.8目测比色后，用酶标光度计测定读数，波长492nm，OD值大于2倍阴性对照值（即P/N>2）E.1十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)溶液配制2带毒性；与阴性对照ddH2O一样，未观察到目的条带的样品为阴性，无病毒；与阴性对照无病毒PNRSVACGCGCAAAAGTGTCGAAATPNRSV-RPDV-RATGGATGGGATGGATAAAATAAGTCTACAGGCTATTTATTATAARPII-RF.1李矮缩病毒（Prunedwarfvirus,PDV）F.2李属坏死环斑病毒（PrunusnecroticringspotvirF.3樱桃小果病毒（Littlecherryvirus,影响的果实呈现暗红色，三角状，口味下降，果实成熟过晚等F.4樱桃绿环斑驳病毒（CherrygreenringmottleF5