2025版高考生物一轮复习课后集训37无菌操作技术实践含解析苏教版

PAGE4-课后限时集训(三十七)无菌操作技术实践(建议用时：25分钟)1．(2024·河北省高三期末)配制培育基时可依据某一种或某一类微生物的特别养分要求，加入某些物质或除去某些养分物质以抑制其他微生物的生长，也可以依据某些微生物对一些物理、化学因素的抗性，在培育基中加入某种化学物质，从而筛选出待定的微生物，这种培育基叫作选择培育基。依据有关内容回答以下问题：(1)制备牛肉膏蛋白胨培育基的一般步骤是计算、称量、溶化、________、________。(2)某同学在做微生物试验时，不当心把大肠杆菌和酵母菌混合在一起。请你完成分别得到纯度较高的大肠杆菌和酵母菌的试验步骤并回答有关问题：主要步骤：①制备两种培育基：一种________的培育基，另一种加青霉素的培育基。分别分成两份，依次标上A、A′、B、B′备用。培育基应采纳________法灭菌。②分别向A、B培育基中接种____________________________________。③接种后，放在恒温箱中培育3～4天。试说明视察到的培育结果：______________________________________________________________。④分别从A、B培育基的菌落中挑取生长良好的菌种，接种到A′、B′培育基中。⑤接种后，把A′、B′培育基放入恒温箱中培育3～4天。第④⑤两个步骤的目的是_______________________________________。[解析](1)制备牛肉膏蛋白胨固体培育基的一般步骤是计算、称量、溶化、灭菌、倒平板。(2)①青霉素不影响酵母菌的生长繁殖，但会抑制大肠杆菌的生长繁殖，大肠杆菌的代谢产物能与伊红美蓝发生特定的颜色反应，使菌落呈黑色，所以一种培育基加入伊红美蓝，一种培育基加入青霉素。对培育基一般采纳高压蒸汽灭菌法灭菌。②分别向A、B培育基中接种混合菌。③接种后培育的结果：伊红美蓝培育基上的黑色菌落是大肠杆菌，加青霉素的培育基上生长的菌落是酵母菌。⑤分别从A、B培育基的菌落中挑取生长良好的菌种，接种到A′、B′培育基中培育，目的是获得纯度较高的大肠杆菌和酵母菌。[答案](1)灭菌倒平板(2)①加入伊红美蓝高压蒸汽灭菌②混合菌③伊红美蓝培育基上的黑色菌落是大肠杆菌，加青霉素的培育基上生长的菌落是酵母菌⑤获得纯度较高的大肠杆菌和酵母菌2．(2024·安徽省定远重点中学高三模拟)聚对苯二甲酸乙二酯(PET)是塑料类水瓶的重要原料，科学家发觉了以PET为碳源和能量来源的细菌，该发觉对PET类材料的回收利用、环境治理意义重大。请回答下列问题：(1)试验小组欲从土壤中获得PET降解菌，需将土壤样品置于以________为唯一碳源的培育基中进行选择培育，其目的是______。(2)该试验小组选取PET浓度为800mg·L－1的富集液进行系列稀释，分别取10－3、10－4和10－5倍数的稀释液0.1mL涂布于培育基上，每个稀释倍数涂布三个平板，各平板的菌落数分别为(286、298、297)，(35、32、31)，(36、7、2)，不适合用于计数的为________倍数的稀释液，用另外两组稀释倍数的稀释液进行计数得到的细菌数不一样的缘由可能是________________________________。(3)倒平板时应使锥形瓶的瓶口通过火焰，目的是__________。在倒平板的过程中，假如培育基溅在皿盖与皿底之间的部位，则这个平板不能用来培育大肠杆菌，缘由是___________________。用平板划线法纯化PET降解菌的过程中，在其次次及其后的划线操作时，须从上一次划线的末端起先划线，缘由是____________________。(4)在保藏PET降解菌菌种时，可实行________的方法进行长期保存。[解析](1)欲从土壤中获得PET降解菌，需将土壤样品置于以PET为唯一碳源的培育基中进行选择培育，其目的是增加PET降解菌的浓度，以确保能分别得到目的菌。(2)为了保证结果精确，一般选择菌落数在30～300的平板进行计数，据此结合题意可知：不适合用于计数的为10－5倍数的稀释液。用另外两组稀释倍数的稀释液进行计数，得到的细菌数不一样的缘由可能是稀释倍数为10－3时，更多的菌落连在一起最终形成单菌落，导致结果小于稀释倍数为10－4组的结果。(3)倒平板时应使锥形瓶的瓶口通过火焰，其目的是灭菌，防止微生物污染。在倒平板的过程中，假如培育基溅在皿盖与皿底之间的部位，空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培育基上滋生，因此这个平板不能用来培育大肠杆菌。用平板划线法纯化PET降解菌的过程中，为使细菌数目随着划线次数的增加而渐渐削减，最终得到由单个细菌繁殖而成的菌落，在其次次及其后的划线操作时，须从上一次划线的末端起先划线。(4)对于须要长期保存的菌种，可以采纳甘油管藏的方法。[答案](1)PET增加PET降解菌的浓度，以确保能分别得到目的菌(2)10－5稀释倍数为10－3时，更多的菌落连在一起最终形成单菌落，导致结果小于稀释倍数为10－4组的结果(3)灭菌，防止微生物污染空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培育基上滋生使细菌数目随着划线次数的增加而渐渐削减，最终得到由单个细菌繁殖而成的菌落(4)甘油管藏3．(2024·湖北省高三期末)酸牛奶酒是在牛奶中加入乳酸菌和酵母菌混合发酵而成的一种乳饮料。回答下列有关问题：(1)发酵所用牛奶在加入菌种前应进行________(填“消毒”或“灭菌”)。(2)已知“改良MC琼脂培育基”中含有碳酸钙，遇酸溶解而使培育基变得透亮；“孟加拉红琼脂培育基”含氯霉素，可抑制绝大多数细菌的生长。对乳酸菌进行计数时应选择上述________培育基，用________法接种，选择出________的菌落进行计数。(3)对乳酸菌、酵母菌双菌混合培育和各自单独培育过程中的活菌数进行定时检测，结果如图。由图可知，双菌培育时两种菌的最大活菌数均高于其单独培育时，从代谢产物角度分析，其缘由可能是____________________________。共同培育过程中两种生物的种间关系是________、________。图甲发酵液中乳酸菌的数量改变图乙发酵液中酵母菌的数量改变[解析](1)牛奶在发酵前应先进行消毒处理，除去其他微生物，再加入菌种进行发酵。(2)乳酸菌进行无氧呼吸可以产生乳酸，遇碳酸钙可以使培育基变得透亮，故应当选择改良MC琼脂培育基对乳酸菌进行计数，要对乳酸菌进行计数应当选择稀释涂布平板法进行接种，乳酸菌可以使MC琼脂培育基出现透亮圈，故可以选择出具有透亮圈的菌落进行计数。(3)依据图中曲线可以推想，酵母菌和乳酸菌可以相互利用对方的代谢产物，从而相互促进生长，故双菌培育时两种菌的最大活菌数均高于其单独培育时。共同培育过程中，乳酸菌和酵母菌既竞争资源空间又可以相互利用对方的代谢产物，故同时存在竞争和共生关系。[答案](1)消毒(2)改良MC琼脂稀释涂布平板具有透亮圈(3)酵母菌和乳酸菌可以相互利用对方的代谢产物，从而相互促进生长共生竞争4．(2024·湖北模拟)戴口罩、勤洗手是预防新型冠状病毒的有效措施。某公司在防疫期间推出一款新型免洗手凝胶。为衡量该凝胶的清洗效果，探讨人员检测了用凝胶洗手前后手部细菌的含量。凝胶洗手前的检测流程如图。回答下列问题：(1)在进行试验前须要配制培育基，培育基指的是_____________________________________________________________________________________________________________________________________________________。各种培育基的详细配方不同，但一般都含有水、碳源、氮源、________________。假如培育乳酸杆菌，还须要在培育基中添加________________。(2)为统计洗手前手部细菌的数量，应选择的接种方法是________________(填“稀释涂布平板法”或“平板划线法”)。利用该方法统计活菌数量的原理是____________________________________________________。(3)依据如图所示的步骤得出的试验结果可信度较低，为了提高试验结果的可信度，请给出两点建议：___________________________________________________________________________________________________________。(4)培育一段时间后可依据____________________________________(至少填两项)等菌落特征初步推断培育基上菌种的类型。为了计算洗手前手部单位面积的细菌数量，除如图所给的信息外，还须要知道__________________________________________________________________________________________。[解析](1)培育基是指人们依据微生物对养分物质的需求不同，配制出的供其生长繁殖的养分基质。一般培育基中均含有碳源、氮源、水和无机盐，在培育乳酸杆菌时还须要额外添加维生素。(2)平板划线法无法得知稀释倍数，因此不能用于活菌计数。稀释涂布平板法用于活菌计数的原理是当样品的稀释度足够高时，培育基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落数，就可以推想出样品中大约含有多少个活菌。(3)试验设计须要遵循比照原则和平行重复原则，因此须要的改进措施：①同一稀释度下涂布三个平板，取三个平板上菌落数的平均值；②设置一组未接种的空白培育基，解除杂菌污染对试验结果造成的干扰。(4)菌落的特征包含菌落的大小、形态、颜色和隆起程度。洗手前手部单位面积的细菌数量＝(平板上的菌落数÷涂布时取样的体积×稀释倍数×10mL)÷取样的面积，因此，除图中所给信息外，还须要知道稀释倍数和涂布平板时所取的稀释液体积。[答案](1)人