二轮专项分层特训卷•生物【统考版】专 题 八

eq\a\vs4\al(专)eq\a\vs4\al(题)eq\a\vs4\al(八)生物技术实践真题分类再回访课堂定时练规范———————————全国卷真题·再回访·寻趋势———————————1．[2022·全国乙卷]化合物S被广泛应用于医药、食品和化工工业。用菌株C可生产S，S的产量与菌株C培养所利用的碳源关系密切。为此，某小组通过实验比较不同碳源对菌体生长和S产量的影响，结果见表。碳源细胞干重(g/L)S产量(g/L)葡萄糖3.120.15淀粉0.010.00制糖废液2.300.18回答下列问题。(1)通常在实验室培养微生物时，需要对所用的玻璃器皿进行灭菌，灭菌的方法有______________________(答出2点即可)。(2)由实验结果可知，菌株C生长的最适碳源是________________；用菌株C生产S的最适碳源是________________。菌株C的生长除需要碳源外，还需要________________(答出2点即可)等营养物质。(3)由实验结果可知，碳源为淀粉时菌株C不能生长，其原因是________________。(4)若以制糖废液作为碳源，为进一步确定生产S的最适碳源浓度，某同学进行了相关实验。请简要写出实验思路：________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(5)利用制糖废液生产S可以实现废物利用，其意义是____________________________(答出1点即可)。2．[2022·全国甲卷]某同学从被石油污染的土壤中分离得到A和B两株可以降解石油的细菌，在此基础上采用平板培养法比较二者降解石油的能力，并分析两个菌株的其他生理功能。实验所用的培养基成分如下。培养基Ⅰ：K2HPO4，MgSO4，NH4NO3，石油。培养基Ⅱ：K2HPO4，MgSO4，石油。操作步骤：①将A、B菌株分别接种在两瓶液体培养基Ⅰ中培养，得到A、B菌液；②液体培养基Ⅰ、Ⅱ中添加琼脂，分别制成平板Ⅰ、Ⅱ，并按图中所示在平板上打甲、乙两孔。回答下列问题。(1)实验所用培养基中作为碳源的成分是________。培养基中NH4NO3的作用是为菌株的生长提供氮源，氮源在菌体内可以参与合成______________________________(答出2种即可)等生物大分子。(2)步骤①中，在资源和空间不受限制的阶段，若最初接种N0个A细菌，繁殖n代后细菌的数量是________。(3)为了比较A、B降解石油的能力，某同学利用步骤②所得到的平板Ⅰ、Ⅱ进行实验，结果如表所示(“＋”表示有透明圈，“＋”越多表示透明圈越大，“－”表示无透明圈)，推测该同学的实验思路是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。菌株透明圈大小平板Ⅰ平板ⅡA＋＋＋＋＋B＋＋－(4)现有一贫氮且被石油污染的土壤，根据上表所示实验结果，治理石油污染应选用的菌株是________，理由是___________________________________________________________。3．[2021·全国乙卷]工业上所说的发酵是指微生物在有氧或无氧条件下通过分解与合成代谢将某些原料物质转化为特定产品的过程。利用微生物发酵制作酱油在我国具有悠久的历史。某企业通过发酵制作酱油的流程示意图如下。回答下列问题：(1)米曲霉发酵过程中，加入大豆、小麦和麦麸可以为米曲霉的生长提供营养物质，大豆中的__________可为米曲霉的生长提供氮源，小麦中的淀粉可为米曲霉的生长提供________________。(2)米曲霉发酵过程的主要目的是使米曲霉充分生长繁殖，大量分泌制作酱油过程所需的酶类，这些酶中的________、________能分别将发酵池中的蛋白质和脂肪分解成易于吸收、风味独特的成分，如将蛋白质分解为小分子的肽和________。米曲霉发酵过程需要提供营养物质，通入空气并搅拌，由此可以判断米曲霉属于________(填“自养厌氧”“异养厌氧”或“异养好氧”)微生物。(3)在发酵池发酵阶段添加的乳酸菌属于________(填“真核生物”或“原核生物”)；添加的酵母菌在无氧条件下分解葡萄糖的产物是________。在该阶段抑制杂菌污染和繁殖是保证酱油质量的重要因素，据图分析该阶段中可以抑制杂菌生长的物质是________(答出1点即可)。4．[2021·全国甲卷]加酶洗衣粉是指含有酶制剂的洗衣粉。某同学通过实验比较了几种洗衣粉的去渍效果(“＋”越多表示去渍效果越好)，实验结果见下表。加酶洗衣粉A加酶洗衣粉B加酶洗衣粉C无酶洗衣粉(对照)血渍＋＋＋＋＋＋＋＋油渍＋＋＋＋＋＋＋＋根据实验结果回答下列问题：(1)加酶洗衣粉A中添加的酶是__________；加酶洗衣粉B中添加的酶是__________；加酶洗衣粉C中添加的酶是__________________________。(2)表中不宜用于洗涤蚕丝织物的洗衣粉有________，原因是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(3)相对于无酶洗衣粉，加酶洗衣粉去渍效果好的原因是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(4)关于酶的应用，除上面提到的加酶洗衣粉外，固定化酶也在生产实践中得到应用，如固定化葡萄糖异构酶已经用于高果糖浆生产。固定化酶技术是指________________________________________________________________________________________________________________________________________________。固定化酶在生产实践中应用的优点是________________________________________________________________________(答出1点即可)。5．[2020·全国卷Ⅰ]某种物质S(一种含有C、H、N的有机物)难以降解，会对环境造成污染，只有某些细菌能降解S。研究人员按照下图所示流程从淤泥中分离得到能高效降解S的细菌菌株。实验过程中需要甲、乙两种培养基，甲的组分为无机盐、水和S，乙的组分为无机盐、水、S和Y。回答下列问题：(1)实验时，盛有水或培养基的摇瓶通常采用________________的方法进行灭菌。乙培养基中的Y物质是________。甲、乙培养基均属于________培养基。(2)实验中初步估测摇瓶M中细菌细胞数为2×107个/mL，若要在每个平板上涂布100μL稀释后的菌液，且保证每个平板上长出的菌落数不超过200个，则至少应将摇瓶M中的菌液稀释________倍。(3)在步骤⑤的筛选过程中，发现当培养基中的S超过某一浓度时，某菌株对S的降解量反而下降，其原因可能是________________________________________________________(答出1点即可)。(4)若要测定淤泥中能降解S的细菌细胞数，请写出主要实验步骤：________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(5)上述实验中，甲、乙两种培养基所含有的组分虽然不同，但都能为细菌的生长提供4类营养物质，即______________________________________。6．[2019·全国卷Ⅰ]已知一种有机物X(仅含有C、H两种元素)不易降解，会造成环境污染。某小组用三种培养基筛选土壤中能高效降解X的细菌(目标菌)。Ⅰ号培养基：在牛肉膏蛋白胨培养基中加入X(5g/L)。Ⅱ号培养基：氯化钠(5g/L)，硝酸铵(3g/L)，其他无机盐(适量)，X(15g/L)。Ⅲ号培养基：氯化钠(5g/L)，硝酸铵(3g/L)，其他无机盐(适量)，X(45g/L)。回答下列问题。(1)在Ⅰ号培养基中，为微生物提供氮源的是____________________________。Ⅱ、Ⅲ号培养基中为微生物提供碳源的有机物是______________。(2)若将土壤悬浮液接种在Ⅱ号液体培养基中，培养一段时间后，不能降解X的细菌比例会__________，其原因是________________________________________________________________________________________________________________________________。(3)Ⅱ号培养基加入琼脂后可以制成固体培养基，若要以该固体培养基培养目标菌并对菌落进行计数，接种时，应采用的方法是________________。(4)假设从Ⅲ号培养基中得到了能高效降解X的细菌，且该菌能将X代谢为丙酮酸，则在有氧条件下，丙酮酸可为该菌的生长提供________________________和________________________。7．[2019·全国卷Ⅱ]物质W是一种含氮有机物，会污染土壤。W在培养基中达到一定量时培养基表现为不透明。某研究小组欲从土壤中筛选出能降解W的细菌(目标菌)。回答下列问题。(1)要从土壤中分离目标菌，所用选择培养基中的氮源应该是____________。(2)在从土壤中分离目标菌的过程中，发现培养基上甲、乙两种细菌都能生长并形成菌落(如图所示)。如果要得到目标菌，应该选择____________菌落进一步纯化，选择的依据是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(3)土壤中的某些微生物可以利用空气中的氮气作为氮源。若要设计实验进一步确定甲、乙菌能否利用空气中的氮气作为氮源，请简要写出实验思路、预期结果和结论，即________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(4)该小组将人工合成的一段DNA转入大肠杆菌，使大肠杆菌产生能降解W的酶(酶E)。为了比较酶E与天然酶降解W能力的差异，该小组拟进行如下实验，请完善相关内容。①在含有一定浓度W的固体培养基上，A处滴加含有酶E的缓冲液，B处滴加含有相同浓度天然酶的缓冲液，C处滴加____________，三处滴加量相同。②一段时间后，测量透明圈的直径。若C处没有出现透明圈，说明____________________________；若A、B处形成的透明圈直径大小相近，说明________________________________________________________________________________________________________________________________________________。8．[2019·全国卷Ⅲ]回答下列与细菌培养相关的问题。(1)在细菌培养时，培养基中能同时提供碳源、氮源的成分是__________(填“蛋白胨”“葡萄糖”或“NaNO3”)。通常，制备培养基时要根据所培养细菌的不同来调节培养基的pH，其原因是______________________。硝化细菌在没有碳源的培养基上________(填“能够”或“不能”)生长，原因是___________________________________________________________________________________________________________________________。(2)用平板培养细菌时一般需要将平板____________(填“倒置”或“正置”)。(3)单个细菌在平板上会形成菌落，研究人员通常可根据菌落的形状、大小、颜色等特征来初步区分不同种的微生物，原因是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(4)有些使用后的培养基在丢弃前需要经过________处理，这种处理可以杀死丢弃物中所有的微生物。9．[2020·全国卷Ⅱ]研究人员从海底微生物中分离到一种在低温下有催化活性的α­淀粉酶A3，并对其进行了研究。回答下列问题：(1)在以淀粉为底物测定A3酶活性时，既可检测淀粉的减少，检测应采用的试剂是____________，也可采用斐林试剂检测______________的增加。(2)在A3的分离过程中可采用聚丙烯酰胺凝胶电泳检测其纯度，通常会在凝胶中添加SDS，SDS的作用是______________________________和____________________。(3)本实验中，研究人员在确定A3的最适pH时使用了三种组分不同的缓冲系统，结果如图所示。某同学据图判断，缓冲系统的组分对酶活性有影响，其判断依据是________________________________________________________________________。(4)在制备A3的固定化酶时，一般不宜采用包埋法，原因是________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________(答出1点即可)。10．[2020·全国卷Ⅲ]水果可以用来加工制作果汁、果酒和果醋等。回答下列问题：(1)制作果汁时，可以使用果胶酶、纤维素酶等提高水果的出汁率和澄清度。果胶酶是分解果胶的一类酶的总称，包括多聚半乳糖醛酸酶、________________________(答出2种即可)。纤维素酶可以分解植物________(填“细胞膜”或“细胞壁”)中的纤维素。(2)用果胶酶处理果泥时，为了提高出汁率，需要控制反应的温度，原因是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(3)现有甲乙丙三种不同来源的果胶酶，某同学拟在果泥用量、温度、pH等所有条件都相同的前提下比较这三种酶的活性。通常，酶活性的高低可用________________________________________________________________________________________________________________________________________________来表示。(4)获得的果汁(如苹果汁)可以用来制作果酒或者果醋，制作果酒需要________菌，这一过程中也需要O2，O2的作用是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。制作果醋需要醋酸菌，醋酸菌属于__________(填“好氧”或“厌氧”)细菌。———————————等级考真题·真体验·寻共性———————————1．[2022·湖南卷]黄酒源于中国，与啤酒、葡萄酒并称世界三大发酵酒。发酵酒的酿造过程中除了产生乙醇外，也产生不利于人体健康的氨基甲酸乙酯(EC)。EC主要由尿素与乙醇反应形成，各国对酒中的EC含量有严格的限量标准。回答下列问题：(1)某黄酒酿制工艺流程如图所示，图中加入的菌种a是________，工艺b是________(填“消毒”或“灭菌”)，采用工艺b的目的是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(2)以尿素为唯一氮源的培养基中加入________指示剂，根据颜色变化，可以初步鉴定分解尿素的细菌。尿素分解菌产生的脲酶可用于降解黄酒中的尿素，脲酶固定化后稳定性和利用效率提高，固定化方法有________________(答出两种即可)。(3)研究人员利用脲酶基因构建基因工程菌L，在不同条件下分批发酵生产脲酶，结果如图所示。推测________是决定工程菌L高脲酶活力的关键因素，理由是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(4)某公司开发了一种新的黄酒产品，发现EC含量超标。简要写出利用微生物降低该黄酒中EC含量的思路________________________________________________________________________________________________________________________________________________。2．[2022·广东卷]研究深海独特的生态环境对于开发海洋资源具有重要意义。近期在“科学号”考察船对中国南海科考中，中国科学家采集了某海域1146米深海冷泉附近沉积物样品，分离、鉴定得到新的微生物菌株并进一步研究了其生物学特性。回答下列问题：(1)研究者先制备富集培养基，然后采用________________法灭菌，冷却后再接入沉积物样品，28℃厌氧培养一段时间后，获得了含拟杆菌的混合培养物，为了获得纯种培养物，除了稀释涂布平板法，还可采用__________法。据图分析，拟杆菌新菌株在以________________为碳源时生长状况最好。(2)研究发现，将采集的样品置于各种培养基中培养，仍有很多微生物不能被分离筛选出来，推测其原因可能是______________________________。(答一点即可)(3)藻类细胞解体后的难降解多糖物质，通常会聚集形成碎屑沉降到深海底部。从生态系统组成成分的角度考虑，拟杆菌对深海生态系统碳循环的作用可能是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(4)深海冷泉环境特殊，推测此环境下生存的拟杆菌所分泌的各种多糖降解酶，除具有酶的一般共性外，其特性可能还有________________。3．[2021·湖南卷]大熊猫是我国特有的珍稀野生动物，每只成年大熊猫每日进食竹子量可达12～38kg。大熊猫可利用竹子中8%的纤维素和27%的半纤维素。研究人员从大熊猫粪便和土壤中筛选纤维素分解菌。回答下列问题：(1)纤维素酶是一种复合酶，一般认为它至少包括三种组分，即________________________。为筛选纤维素分解菌，将大熊猫新鲜粪便样品稀释液接种至以________为唯一碳源的固体培养基上进行培养，该培养基从功能上分类属于________培养基。(2)配制的培养基必须进行灭菌处理，目的是________________________。检测固体培养基灭菌效果的常用方法是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(3)简要写出测定大熊猫新鲜粪便中纤维素分解菌活菌数的实验思路________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(4)为高效降解农业秸秆废弃物，研究人员利用从土壤中筛选获得的3株纤维素分解菌，在37℃条件下进行玉米秸秆降解实验，结果如表所示。在该条件下纤维素酶活力最高的是菌株________，理由是___________________________________________________________________________________________________________________________________。菌株秸秆总重(g)秸秆残重(g)秸秆失重(%)纤维素降解率(%)A2.001.5124.5016.14B2.001.5323.5014.92C2.001.4229.0023.324.[2021·河北卷，节选]葡萄酒生产过程中会产生大量的酿酒残渣(皮渣)。目前这些皮渣主要用作饲料或肥料，同时研究者也采取多种措施拓展其利用价值。回答下列问题：(1)皮渣中含有较多的天然食用色素花色苷，可用萃取法提取。萃取前将原料干燥、粉碎的目的分别是____________________________________________，萃取效率主要取决于萃取剂的__________。萃取过程需要在适宜温度下进行，温度过高会导致花色苷__________。研究发现，萃取时辅以纤维素酶、果胶酶处理可提高花色苷的提取率，原因是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(2)为了解皮渣中微生物的数量，取10g皮渣加入90mL无菌水，混匀、静置后取上清液，用稀释涂布平板法将0.1mL稀释液接种于培养基上。104倍稀释对应的三个平板中菌落数量分别为78、91和95，则每克皮渣中微生物数量为__________个。(3)皮渣堆积会积累醋酸菌，可从中筛选优良菌株。制备醋酸菌初筛平板时，需要将培养基的pH调至__________性，灭菌后须在未凝固的培养基中加入无菌碳酸钙粉末、充分混匀后倒平板，加入碳酸钙的目的是__________________________________________。培养筛选得到的醋酸菌时，在缺少糖源的液体培养基中可加入乙醇作为__________。5．[2021·广东卷]中国科学家运用合成生物学方法构建了一株嗜盐单胞菌H，以糖蜜(甘蔗榨糖后的废弃液，含较多蔗糖)为原料，在实验室发酵生产PHA等新型高附加值可降解材料，期望提高甘蔗的整体利用价值。工艺流程如图。回答下列问题：(1)为提高菌株H对蔗糖的耐受能力和利用效率，可在液体培养基中将蔗糖作为__________，并不断提高其浓度，经多次传代培养(指培养一段时间后，将部分培养物转入新配的培养基中继续培养)以获得目标菌株。培养过程中定期取样并用__________的方法进行菌落计数，评估菌株增殖状况。此外，选育优良菌株的方法还有____________________等。(答出两种方法即可)(2)基于菌株H嗜盐、酸碱耐受能力强等特性，研究人员设计了一种不需要灭菌的发酵系统，其培养基盐浓度设为60g/L，pH为10，菌株H可正常持续发酵60d以上。该系统不需要灭菌的原因是_________________________________________________________________________________________________________________________________。(答出两点即可)(3)研究人员在工厂进行扩大培养，在适宜的营养物浓度、温度、pH条件下发酵，结果发现发酵液中菌株H细胞增殖和PHA产量均未达到预期，并产生了少量乙醇等物质，说明发酵条件中__________可能是高密度培养的限制因素。(4)菌株H还能通过分解餐厨垃圾(主要含蛋白质、淀粉、油脂等)来生产PHA，说明其能分泌________________________________________________________________________。6．[2021·浙江1月，节选]回答下列(一)小题：(一)某环保公司从淤泥中分离到一种能高效降解富营养化污水污染物的细菌菌株，制备了固定化菌株。(1)从淤泥中分离细菌时常用划线分离法或________法，两种方法均能在固体培养基上形成________。对分离的菌株进行诱变、________和鉴定，从而获得能高效降解富营养化污水污染物的菌株。该菌株只能在添加了特定成分X的培养基上繁殖。(2)固定化菌株的制备流程如下：①将菌株与该公司研制的特定介质结合；②用蒸馏水去除________；③检验固定化菌株的__________________。菌株与特定介质的结合不宜直接采用交联法和共价偶联法，可以采用的2种方法是________________________________________________________________________。(3)对外，只提供固定化菌株有利于保护该公司的知识产权，推测其原因是________________________________________________________________________。7．[2020·江苏卷]产脂肪酶酵母可用于含油废水处理。为筛选产脂肪酶酵母菌株，科研人员开展了相关研究。请回答下列问题：(1)常规微生物实验中，下列物品及其灭菌方法错误的是________(填编号)。编号①②③④物品培养基接种环培养皿涂布器灭菌方法高压蒸汽火焰灼烧干热臭氧(2)称取1.0g某土壤样品，转入99mL无菌水中，制备成菌悬液，经________后，获得细胞密度不同的菌悬液。分别取0.1mL菌悬液涂布在固体培养基上，其中10倍稀释的菌悬液培养后平均长出了46个酵母菌落，则该样本中每克土壤约含酵母菌________个。(3)为了进一步提高酵母菌产酶能力，对分离所得的菌株，采用射线辐照进行________育种。将辐照处理后的酵母菌涂布在以________为唯一碳源的固体培养基上，培养一段时间后，按照菌落直径大小进行初筛，选择直径________的菌落，纯化后获得A、B两突变菌株。(4)在处理含油废水的同时，可获得单细胞蛋白，实现污染物资源化。为评价A、B两菌株的相关性能，进行了培养研究，结果如图。据图分析，应选择菌株________进行后续相关研究，理由是_________________________________________________________________________________________________________________________________________。8．[海南卷]回答下列问题。(1)玫瑰精油可用玫瑰花瓣为原料，采用水蒸气蒸馏法提取。水蒸气蒸馏法的原理是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。在进行蒸馏时，冷凝管的进水口比出水口________(填“高”或“低”)。蒸馏收集到的乳浊液是玫瑰精油和水的混合物，要得到玫瑰精油，需要向乳浊液中加入NaCl，其目的是________________________________________________________________________；得到的油层还需要加入无水Na2SO4，其目的是________________________。(2)某同学在通过发酵制作果酒时，发现在制作原料中添加一定量的糖，可以提高酒精度，原因是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。在家庭以葡萄为原料制作葡萄酒时，可以不添加酵母菌，原因是________________________________________________________________________；在制作葡萄酒的过程中，如果密封不严混入空气，发酵液会变酸，可能的原因是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。9．[浙江4月选考，32节选]回答与果胶和果胶酶有关的问题：(1)通常从腐烂的水果上分离产果胶酶的微生物，其原因除水果中果胶含量较高外，还有________________________________________________________________________。(2)为了获得高产果胶酶微生物的单菌落，通常对分离或诱变后的微生物悬液进行________________________________________________________________________。(3)在某种果汁生产中，用果胶酶处理显著增加了产量，其主要原因是果胶酶水解果胶使________________________________________________________________________。果汁生产中的残渣果皮等用于果胶生产，通常将其提取液浓缩后再加入________________________________________________________________________。使之形成絮状物，然后通过离心、真空干燥等步骤获得果胶制品。(4)常用固定化果胶酶处理含果胶的污水，其主要优点有____________________和可连续处理等。在建立和优化固定化果胶酶处理工艺时，除考虑果胶酶的活性和用量、酶反应的温度、pH、作用时间等因素外，还需考虑的主要有________和__________。专项分类强化练课内课外提能力———————————非选择题分类·规范提升练———————————类型概述析因推理探究综合类1．[2022·江西南昌一模]苯酚等酚类化合物在农药等方面应用广泛，苯酚对许多生物体有毒害作用，含大量苯酚污染物的污水排放到河流和土壤，严重污染环境和危害人类健康。科研人员以黄河三角洲盐碱地芦苇为材料，筛选出具有较强降解苯酚污染物能力的菌株。回答下列问题：(1)为筛选苯酚降解菌，需将经处理的芦苇材料样品稀释液接种至以________为唯一碳源的固体培养基进行培养。一段时间后，能够降解苯酚的细菌比例会________，原因是________________________。(2)通常制备培养基时需依据所培养细菌的不同来调节培养基的pH，原因在于____________________________________________________。用平板培养细菌时一般需将平板________(填“倒置”或“正置”)。(3)简要写出测定芦苇内生苯酚降解菌活菌数的实验思路。________________________________________________________________________________________________________________________________________________。2．猕猴桃被誉为“水果之王”“维C之王”等。宝鸡眉县气候温和、雨量适中、土层深厚肥沃，是猕猴桃的最佳优生区之一。眉县大力推进猕猴桃产业化经营，实现多层次增值。建成多家猕猴桃加工企业，生产的猕猴桃果汁、果酒等系列产品畅销国内外。请回答相关问题：(1)猕猴桃果汁制作中可加入适量的果胶酶、纤维素酶来提高出汁率和澄清度。果胶酶是分解果胶的一类酶的总称，包括多聚半乳糖醛酸酶、果胶分解酶、____________。调配好的果汁要加热到70～80°C，保持15分钟，然后迅速装罐并封好罐口。该过程不用高压蒸汽灭菌法的原因主要是________________________。(2)猕猴桃果酒的加工流程如下：选果→清洗、消毒→破碎→发酵→压榨分离→陈酿调配→过滤→装瓶→成品①在“选果”时要剔除腐烂变质的果子，原因是______________。②大规模生产时，要向发酵罐中加入活化的________。为了提高生产效率，在发酵初期应先进行________(填“有氧”或“无氧”)发酵，以提高菌种的数量。③在发酵前还要加入一定量的糖(白砂糖)，下图表示果酒发酵时发酵液中糖度(糖的浓度)和酒精度(酒精浓度)随时间的变化关系，96h后糖度和酒精度的变化都趋于平缓，原因可能是______________。(3)猕猴桃的深加工可以缓解滞销、难储存等问题，除用于生产果汁和果酒以外，利用猕猴桃还能加工成哪些产品？请你给加工企业提出建议。__________________________________________________________________________________________________________________(至少答三点)。3．[2022·贵阳市五校高三联考]葡萄营养丰富，可用来酿酒和做果汁，葡萄皮中的色素可提取用于食品色素。请根据有关材料回答下列问题：(1)在葡萄酒生产过程中，为提高果酒的品质，可以直接在果汁中加入人工培养的纯净的酵母菌种。要筛选得到纯净的酵母菌种，通常使用的培养基按功能来分称为________________，如在培养基中加入________________可从细菌和酵母菌的混合液中分离酵母菌。(2)为提高果汁的出汁率及澄清度，在果汁生产中常用到________。为提高品质及节约成本，厂家已尝试使用固定化细胞技术，酵母细胞的固定多采用________法，选用该方法的原因是__________________。(3)葡萄皮中的花青素易溶于有机溶剂，可以用________法提取，需要对原材料进行________和________处理。4．[2022·广东省惠州市高三调研考试]米醋是众多种类的醋中营养价值较高的一种，制作米醋的主要流程：蒸熟拌曲→入坛发酵→加水醋化。回答下列问题：(1)“蒸熟拌曲”阶段中拌入的“酒曲”中含有酵母菌，从呼吸作用类型看，该微生物属于____________型生物。“拌曲”前常用糖化酶将蒸熟后的大米处理得到葡萄糖，目的是更好地为微生物提供________。(2)“入坛发酵”阶段总是先“来水”后“来酒”原因是__________________________________________________________。该阶段虽未经灭菌，但在______________的发酵液中，酵母菌能生长繁殖，绝大多数其他微生物都因无法适应这一环境而受到抑制。(3)“加水醋化”阶段中醋酸发酵前，要对米酒进行加水稀释，目的是________________________________________________。进入该阶段需要的发酵条件为温度设置为30～35℃和________________。请写出该阶段中醋酸菌利用酒精生产醋酸的化学反应式：____________________________。5．[2022·广东省六校高三联考]餐厨垃圾是家庭、公共食堂和餐饮行业等产生的食物废弃物的总称。国内传统的餐厨垃圾处理上，大部分城市会将餐厨垃圾运往养殖场，直接作为饲料饲养禽畜，这样有可能导致人类和动物某些疾病的互相感染。近年来一些城市已经开始研究餐厨垃圾资源化利用的新模式。某研究团队将垃圾处理厂的土壤经初步筛选得到6株产淀粉酶菌株，通过二次培养得到以下结果，请回答：表产淀粉酶菌株筛选结果(1)为筛选产淀粉酶菌株，将土壤稀释液接种至以________为唯一碳源的固体培养基上进行培养，该培养基从功能上分类属于________培养基。(2)根据表格信息判断，菌株________最适合用于分解厨余垃圾，原因是________________________________________________________________________。(3)将上述筛选出的菌株进行DNA测序和基因库比对，再结合菌落的____________________________等特征，可确定为黑曲霉。(4)餐厨垃圾除了含有产淀粉酶菌株外，还含有一些致病菌，它们可能导致人类和动物某些疾病的相互感染。因此，我们可以通过对餐厨垃圾进行________________(填“煮沸消毒”或“高压蒸汽灭菌”)处理，从而减少疾病的传播。6．[2022·云南省曲靖市高三质量监测]请回答下列有关物质提取的问题：(1)在血红蛋白的提取和分离实验中，首先对红细胞进行洗涤的目的是____________。释放血红蛋白的操作中，除加入蒸馏水外，还需加入40%体积的甲苯，其作用是________________________。收集的血红蛋白溶液可以在透析袋中透析，透析的目的是__________________________。(2)玫瑰精油适合用水蒸气蒸馏法来提取，水蒸气蒸馏后，锥形瓶中收集到的液体不是纯的玫瑰精油，原因是____________________________________________。密封不严的瓶装玫瑰精油保存时最好存放在温度较________的地方。(3)橘皮油的主要成分是________，通常用压榨法来提取。为了提高出油率，压榨前需要对新鲜的柑橘皮做的处理是________________________________。将橘皮压榨后可得到糊状液体，为了获得乳状液，可以先用普通布袋________除去固体物和残渣，然后通过________进一步除去质量较小的残留固体物。非常“组合4”主观题模拟真演练(一)1．[2022·山西晋中一模]厨余垃圾富含多种有机物，利用微生物发酵处理不仅可以减少环境污染，还可以生产有机肥料或菌体蛋白饲料，实现厨余垃圾的无害化和资源化利用。我市某校学生开展了“减少污染废变宝”的主题项目学习活动，积极寻找分解不同厨余垃圾的菌种。下面是两个学习小组在完成项目学习的部分研究过程。甲组同学开展了“垃圾分类处理—寻找分解剩菜叶的菌种”项目。乙组同学开展了“垃圾分类处理—寻找分解剩面食的菌种”项目。(1)甲组同学将土壤浸出液接种到仅含有________作为唯一碳源的培养基上进行培养。在筛选菌种时，发现很多产生透明圈的菌落，测得A、B、C3种菌株的菌落直径与刚果红透明圈直径，结果如下表：菌株编码菌落直径(d)/cm刚果红透明圈直径(D)/cmD/dA3.535.531.57B2.966.722.27C1.864.862.61经筛选，小组成员认为菌________(填“A”“B”或“C”)最适合作为目的菌，为了进一步确定得到的是能分解剩菜叶的目的菌，他们还要进行______________的实验。(2)乙组同学欲从土壤中筛选产淀粉酶活性高的目的菌，将土壤样品稀释液接种至以________为唯一碳源的固体培养基上进行培养，除碳源外，该培养基还含有氮源、水、无机盐和________。(3)乙组同学通过筛选获得了一目的菌株，经专家鉴定，能同时产生两种不同的淀粉酶X和Y，其相对分子量分别为45000和58000。若采用凝胶色谱法将这两种淀粉酶分离，先洗脱出来的是淀粉酶________(填“X”或“Y”)，其原因是____________________________________。2．[2022·河南开封二模]葡萄大量成熟不能及时销售出去时，种植者便制作葡萄酒服务于“农家乐”等周边游。但受酵母菌种和工艺所限，葡萄酒品质有待提高。为了解决该问题，生物学综合实践社团的同学们开展了下列实验，请你参与献策。(1)欲从土壤中分离出高效酵母菌，做了如图1所示的实验(Ⅰ～Ⅴ表示过程)。①上述实验中需注意无菌操作，其中需干热灭菌处理的实验用具包括__________________。②铲取葡萄树下表层土壤，配制甲的土壤悬液。第Ⅰ步接种最常用的方法是__________。乙、丙装置所用培养基如下表，其中作为主要碳源的是________，在配制该培养基时，pH调至5.0～6.0，并加入链霉素的目的是__________________。KH2PO4MgSO4·7H2O蛋白胨葡萄糖琼脂H2O1g0.5g5g10g15～20g1000mL③若经第Ⅱ步培养后发现菌落铺满了整个培养基，无法分辨出单菌落，则应在第Ⅰ步之前________，再进行接种。④取第Ⅳ步中生长较好的六个菌落，分别接入编号1～6号试管中(0.05mol/L葡萄糖溶液)培养，3d后斐林试剂检测结果如下。其中第________号试管中的酵母菌最高效。编号123456砖红色相对深度＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋注：“＋”号越多相对深度越大。(2)为使高效酵母菌种可以反复利用，同学们设计了酵母菌的固定化及其生产葡萄酒的相关装置(如图2)。①图中a是利用海藻酸钠固定的酵母菌，一般采用的方法是________固定化。②图中“长导管”的作用是____________________________。③能否直接利用该装置生产葡萄醋？________。请说明理由？______________________________________。3．[2022·甘肃一模]我省甘谷县盛产辣椒，“甘谷辣椒”已被评为中国国家地理标志产品。辣椒油是传统调味佳品，制作方法相当考究。传统的辣椒油在制作时需将辣椒绞碎，再与食用油混合炒制，但辣椒中的辣椒素类物质(辣椒油中引起辛辣感和灼烧感的物质统称为辣椒素类物质，主要成分是辣椒素和二氢辣椒素)的提取效率较低。若在炒制前使用果胶酶处理绞碎的辣椒，则可明显提高提取效率。请回答问题：(1)辣椒素类物质难溶于水，而易溶于有机溶剂，推测可用________法提取。(2)果胶酶是分解果胶的一类酶的总称，包括多聚半乳糖醛酸酶、____________和____________等。它能分解果胶，破坏辣椒细胞的____________________，从而促进辣椒素类物质的释放。(3)为使果胶酶能反复利用，常用到固定化技术，固定化酶一般不用________法，这是因为________________________________。(4)某研究小组为探究果胶酶处理辣椒的最适pH，进行了相关实验，结果如图所示。有同学认为，图中若pH继续降低，曲线会与x轴相交。你认为这种说法________(填“正确”或“错误”)，理由是________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(5)辣椒素与二氢辣椒素的分子式分别为C18H27NO3、C18H29NO3，结合所学知识推测，凝胶色谱法________________(填“适用于”或“不适用于”)分离辣椒素与二氢辣椒素，理由是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。4．[2022·吉林长春二模]门冬胰岛素注射液是通过转基因技术，利用酵母菌生产的胰岛素类似物，生产流程如图所示。请回答：(1)大罐培养过程中酵母菌会大量增殖，在此阶段其主要进行________呼吸，酵母菌通过________方式分泌胰岛素原。(2)在使用胰蛋白酶和羧肽酶处理过程中要注意反应的温度，原因是______________________________________________________________________________________。门冬胰岛素是一种分子量较小的蛋白质，在与其他大分子蛋白质分离时，色谱柱中门冬胰岛素的迁移速度________，时间________。(3)在获得人胰岛素产品后，可采用聚丙烯酰胺凝胶电泳检测其纯度，往往会在凝胶中添加SDS，其作用是__________________________________。获得的人胰岛素产品需鉴定是否被杂菌污染，方法是________________________________________。(4)科学家用高血糖小鼠验证门冬胰岛素的作用，该实验因变量的观察指标是________________________________________。非常“组合4”主观题模拟真演练(二)1．[2022·江西模拟预测]勤洗手是预防病毒感染的有效措施。某公司在防控新型冠状病毒(2019­nCOV)期间推出一款新型免洗洗手凝胶。为衡量该凝胶的清洗效果，研究人员设计了相关实验。凝胶洗手前的检测流程见下图。请根据下表实验回答相关问题。实验组别对照设置接种处理数据统计求平均值A不洗手按上述实验步骤处理，每组设置三个平板B用水洗手C用洗手凝胶洗手D空白不接种(1)用洗手凝胶洗手杀死手表面的部分微生物(不包括芽孢和孢子)，该方法属于________(“消毒”或“灭菌”)。在实验中配制好的培养基需要灭菌处理，常用的方法是________________。(2)为统计手部的细菌数量，应选择的接种方法是________________，利用该方法进行计数统计的是________(“活菌”或“死菌”)的数量。(3)实验中添加D组的目的是__________________________。(4)如果想了解手部是否有大肠杆菌应该如何处理？____________________________________________。(5)新型冠状病毒为什么不能用基本培养基培养？______________________________________________。2．[2022·四川成都七中二模]醪糟是以糯米为原料，利用酒曲(主要菌种有好氧霉菌、酵母菌和乳酸菌)发酵而成，家庭制作醪糟的流程为：糯米→淘洗→浸泡→蒸饭→冷却→拌入酒曲→发酵→醪糟。回答下列问题：(1)霉菌产生的________能将糯米中的淀粉分解为葡萄糖从而使醪糟具有甜味，而酵母菌可将淀粉分解生成的葡萄糖转化为酒精，该过程发生的场所为________________________。(2)酒曲需浸水活化，活化的目的是____________________________________；拌入酒曲之前，需将蒸熟的糯米进行冷却，目的是____________________________。(3)将酒曲与糯米混合好后放入容器后，在中间挖一个洞有利于________________大量繁殖。若室内温度在10℃以下，可用棉絮将容器包裹起来，因为酵母菌进行酒精发酵的最适温度范围是________℃。(4)醪糟酒精度数一般不会很高，原因是____________________________________。(5)发酵好的醪糟可转移到灭菌玻璃瓶中并密封，密封之前应对瓶口进行________灭菌，然后放于冰箱中保存。3．[2022·新疆一模]油茶是我国特有的木本油料作物，从油茶树种子(油茶籽)中提取的油茶籽油是一种健康的食用油。(1)借助机械加压，将油分从油茶籽中挤压出来的方法称为________。(2)萃取法提取油茶籽油的过程中，油茶籽经________、粉碎，在适宜温度下置于有机溶剂中浸泡，浸泡的目的是____________________________。浸泡后经________除去杂质，再利用蒸馏装置________________浓缩得到油茶籽油。(3)上述过程存在着出油率低或有机溶剂污染的问题，利用水酶法可有效解决这些问题。水酶法先将油茶籽充分磨碎，用水浸泡使其吸水膨胀，再加酶破坏细胞结构，使细胞中的油分释放出来。由于____________________________，所以能通过离心分离获得油茶籽油。为充分破坏细胞结构，防止提取油茶籽油过程中油脂和蛋白质、淀粉形成油水之间的乳化层，加入的酶应包括________。A．纤维素酶 B．果胶酶C．淀粉酶 D．蛋白酶E．脂肪酶下图是酶用量对出油率的影响：当酶添加量超过a2时，油茶籽油的出油率开始出现下降趋势，原因是________________________形成了乳化层。4．[2022·陕西宝鸡二模]甘蔗既是人们喜爱的一种食品，又是制取蔗糖的重要原材料。甘蔗渣用途广泛，除用作燃料、造纸等之外，近年来研究人员还发现有其他经济价值。回答下列问题：(1)甘蔗渣中含有一种多酚类物质，该物质具有预防鸡和鸡蛋感染沙门氏菌的作用，因而能够降低鸡的死亡率。该物质可用萃取法提取。萃取前需将原料干燥和粉碎，干燥和粉碎目的是__________________________________________，萃取效率主要取决于萃取剂的______________。(2)为了解甘蔗渣中微生物的数量，称取1g甘蔗渣样品，转入99mL无菌水中，经梯度稀释后，获得细胞密度不同的菌悬液。分别取0.1mL菌悬液涂布在固体培养基上，其中10倍稀释的菌悬液培养后平均长出了32个菌落，每克甘蔗渣中微生物数量为________个。(3)甘蔗渣中富含纤维素，人们发现醋酸菌也能合成纤维素，因此筛选优良菌株可以用于工业化生产细菌纤维素。制备醋酸菌初筛平板时，需要将培养基的pH调至________________性，灭菌后需在未凝固的培养基中加入无菌碳酸钙粉末、充分混匀后倒平板，加入碳酸钙的目的是______________________________________。培养筛选得到的醋酸菌，在缺少糖源的液体培养基中可加入乙醇作为________。(4)甘蔗渣堆积过程中会积累某些兼性厌氧型乳酸菌。初筛醋酸菌时，乳酸菌有可能混入其中，且两者菌落形态相似。请设计一个简单实验，区分筛选平板上的醋酸菌和乳酸菌。(简要写出实验步骤和预期结果)________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________。非常“组合4”主观题模拟真演练(三)1．[2022·河南模拟预测]由于微生物的生命活动而引起或促进材料腐蚀进程的现象统称为微生物腐蚀(MIC)。MIC现象中的厌氧菌主要是SRB，SRB是一些能将SOeq\o\al(\s\up1(2－),\s\do1(4))还原为H2S而自身获得能量的各种细菌的统称，是一种以有机物为养料的厌氧菌。请回答下列问题：(1)根据利用的底物不同，SRB可分为四类：一是氧化氢的SRB(HSRB)，二是氧化乙酸的SRB(ASRB)，三是氧化较高级脂肪酸的SRB(FASRB)，四是氧化芳香族化合物的SRB(PSRB)。为了获取纯ASRB，制作培养基时应以________为唯一碳源，该培养基按功能划分，属于________培养基。(2)在做“SRB分离与计数”实验中，有两种对照设计，请完成下表：对照组作用现象结论未接种的培养基判断培养基是否被污染①________________________培养基未被污染接种的培养基②________________对照组培养基上的菌落数大于选择培养基上的菌落数③______________________(3)目前，SRB已经广泛应用于废水中硫酸盐的去除，由于SRB属于异养型微生物，所以在SRB法处理含硫酸盐废水的过程中，需要添加一定量的________________(从培养基成分分析)。为降低成本，可用包埋法固定SRB，即将SRB均匀地包埋在________(填“溶于”或“不溶于”)水的多孔性载体中。若用海藻酸钠做载体，哪些原因可能导致凝胶珠形态异常：________________________________________________(答出2点)。2．[2022·广西壮族自治区南宁市高三摸底测试]果汁、果酒、果醋是人们日常生活中常见的饮品，回答下列问题：(1)在使用果胶酶生产果汁的生产过程中，除考虑影响酶活性的因素外，还需要考虑____________(写出一点)。果胶酶在果汁加工中的主要作用是____________________________________。(2)酵母菌是果酒和果醋生产中常用的菌种，对其计数时通常计数培养基中的菌落数目，菌落是指________________________________。欲知道这种微生物的繁殖速度，可用________________________________________________(填方法名称)对酵母菌进行计数。对培养到某一时期的培养液制备成10－5的稀释液进行涂布分离，接种量0.1mL，三个培养皿生长的菌落数依次为36个、32个、34个，则培养液中的酵母菌数量为____________个/mL。(3)以葡萄酒为原料生产葡萄醋需要用到醋酸杆菌，选择醋酸杆菌时需要将醋酸杆菌接种在以________为唯一碳源的培养基上，此外培养基中需添加________指示剂以筛选目的菌种。3．[2022·陕西省渭南市富平县高三一模]进行垃圾分类收集可以减少垃圾处理时间，降低处理成本。科研小组欲分离及培养若干种微生物用于处理湿垃圾，如剩菜剩饭、骨头、菜根菜叶、果皮等食品类废物。请分析回答：(1)科研小组从土壤中筛选产脂肪酶的菌株时，配制的培养基需要以________为唯一碳源。制备固体培养基的步骤是；计算→称量→溶化→________→________。接种微生物最常用的方法是____________________________________。(2)科研小组从土壤中筛选淀粉分解菌时，加碘液染色后，选择培养基上出现了A、B和C三种菌落(如图所示)。若要得到淀粉酶活力最高的菌株，应选择________(填“A”“B”或“C”)菌落进一步纯化。经检测A菌落为硝化细菌，A菌落能在此培养基上生长且没有形成透明圈的原因是____________________________________________________________________。(3)在微生物分解处理垃圾的过程中，纤维素分解菌能够分泌纤维素酶，该酶可将纤维素分解为葡萄糖。纤维素酶由三种复合酶组成，其中____________酶可将纤维二糖分解为葡萄糖。4．[2022·新疆喀什一模]近年来发现青蒿素除了抗疟疾还具有较强的抗肿瘤作用，青蒿素是一种无色针状晶体，易溶于有机溶剂，不溶于水，不易挥发，60℃以上易分解，主要从黄花蒿茎叶中提取。某科研小组按如下步骤进行了相关实验：①从黄花蒿中提取青蒿素，其提取流程为：黄花蒿茎叶→粉碎→加溶剂→萃取→收集提取液→活性炭处理→过滤去除活性炭→蒸馏(含回收溶剂)→重结晶→成品。②将等量癌细胞分别接种到4组培养瓶中，适宜条件下培养24h后除去上清液；③向4组培养瓶中分别加入等量含2、4、8、16μmol/L青蒿素的培养液，适宜条件下继续培养；④72h后统计并计算各组的细胞增殖抑制率。回答下列问题：(1)在提取青蒿素时，最好应选用的是____________(填“高温烘干”“晾干”或“新鲜”)的黄花蒿，不宜选用其他两种的原因是________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(2)提取青蒿素时不宜使用水蒸气蒸馏法，原因是__________________________________________________________________；根据青蒿素________________的特点，可采用有机溶剂萃取的方法，现有四氯化碳(沸点76.5℃)和乙醚(沸点34.5℃)两种溶剂，应选用________作为萃取剂，不选用另外一种的理由是________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(3)如图为萃取青蒿素装置示意图，请指出图中一处错误并改正：____________________________________。加热时常在加热瓶口安装回流冷凝装置，目的是______________________。(4)科研小组进行上述②～④步骤实验的目的是____________________________________________。步骤③中需要设置对照组，对照组的处理方法为________________________________________________________________________________________________________________________________________________。非常“组合4”主观题模拟真演练(四)1．[2022·黑龙江齐齐哈尔一模]塑料膜的主要成分聚乙烯是一种碳氢化合物，稳定性好，不易被分解，易造成“白色污染”。研究人员经过分离筛选最终获得一种能降解聚乙烯的真菌—桔青霉，为利用微生物降解农用地膜提供依据。回答下列问题：(1)在实验过程中，研究人员将获得的聚乙烯粉末均匀洒在培养基甲上，从培养基的碳源及物理性质分析，培养基甲是以____________________________培养基，对配制的甲培养基常采用______________法进行灭菌。一段时间后，从培养基甲上挑选能生长的菌株，采用____________________________法接种获得5个真菌的单菌落，储存备用。若要长期保存菌株，常采用的方法是______________。(2)为确定分离得到的不同菌株分解地膜能力的强弱，可将分离纯化获得的真菌分别接种到含__________________的液体培养基中，在一定转速下的摇床上进行培养，摇床培养的目的是________________________________________________________________________(答两点)，最后观察比较各组培养液中地膜面积(体积)的大小，进而筛选出高效降解地膜的菌株。(3)为确定某一培养液中桔青霉的数量，从中吸取1mL培养液，稀释100倍，取0.1mL接种到4个培养基平板上，一段时间后获得的菌落数分别为：25、35、40、42个，则统计的平均菌落数是________个。(4)在不同的土壤使用桔青霉分解地膜的效果存在差异的原因是______________________________________。2．[2022·安徽省六安市高三开学考试]图1为某同学设计的用于制作果酒和果醋的发酵装置。图2为某研究小组的同学在对杨梅酒和杨梅醋的生产工艺进行考察后，绘制出的基本工艺流程图。请据图回答：(1)冲洗的主要目的是洗去______________，但注意不能反复，原因是__________________________________。制作果酒后继续制醋，需要改变的条件是____________________________________。(2)发酵开始时一般要先通气，其目的是_____________________