检验科脂肪酶测定标准操作规程

玉环县人民医院检验科文件编号：JYK-3-SH-035版本/修订号：C/0主题内容生化室作业指导书生效日期：20110701第1页共4页编写制定日期审核审核日期：核准执行日期李永臣2010-09-15李永臣2011-07-01章林华2011-07-01血清脂肪酶测定标准操作规程1检验申请单独检验项目申请：血清脂肪酶(缩写LPS)测定；组合项目申请：胰腺炎检测。临床医生根据需要提出检验申请。2标本采集与处理2.1标本采集2.1.1常规静脉采血约2ml，不抗凝，置普通试管中。或采用含分离胶的真空采血管。2.1.2检验申请单和血标本试管标上统一且唯一的标识符。2.1.3急诊标本采集后，在检验申请单上填写标本采集时间。2.1.4标本采集后与检验申请单一起及时运送至检验科。专人负责标本的接收并记录标本的状态，对不合格标本予以拒收。2.1.5下列标本为不合格标本2.1.5.1标本量不足：少于0.3ml的全血标本，或少于0.1ml的血清或血浆。2.1.5.2对反应吸光度有干扰的标本，包括严重溶血标本。2.1.5.3无法确认标本与申请单对应关系的。2.1.5.4其他如标识涂改、标本试管破裂等。2.2标本保存 2.2.1接收标本后在30min内将标本离心分离出血清。2.2.2标本保存时间：室温（15～25℃）下可稳定1天，普通冰箱中（2～8℃）稳定7天。-20℃可保存数月；-70℃至少可保存半年；应避免标本反复冻溶。为避免标本中水分挥发使血清浓缩，对保存时间超过1天的标本均加塞密闭或覆盖湿巾。2.2.3已完成测试的标本保持完整的识别号，置4～8℃冰箱内保存7天。2.3标本采集的注意事项2.3.1采血前使受检者保持平静、松弛和空腹状态。抽血前3天内避免高脂饮食，24小时内不饮酒。2.3.2如果使用血浆，推荐的抗凝剂是肝素。EDTA、草酸盐、氟化钠、枸橼酸对酶有抑制作用。2.1.5抽血前最好停用影响血脂的药物（如调脂药、避孕药、某些降压药、激素等）数天或数周，否则应记录用药情况。3方法原理采用1,2-邻-二月桂宗甘油－3-戌二酸－(6'-甲基试卤灵）-酯作为底物，OH－脂肪酶1,2-邻-二月桂宗甘油－3-戌二酸－(6'-甲基试卤灵)-酯1,2-邻-二月桂宗甘油+戌二酸+甲基试卤灵在570nm波长下，根据产物红色的甲基试卤灵生成速率测定脂肪酶的活性。4试剂及其他用品4.1试剂：脂肪酶测定试剂盒，由北京利德曼生化技术有限公司出品。4.2试剂盒保存：未启封试剂盒在2～8℃保存，可储存至失效期。启封使用的试剂置仪器试剂仓冰箱内稳定30天。开盖后避免污染。当试剂变混浊，或者试剂出现明显的粉红色，或空白吸光率>0.3时，表明试剂已变质，不能继续使用。4.3试剂盒准备：液态双试剂型，即开即用，无特殊准备。4.4试剂盒主要成分：组成R1:R2=2:1混合后溶液的浓度R1:缓冲液:100mmol/LPH=7.2牛磺脱氧胆酸34mmol/LNaCl40mmol/LR2:起动液酒石酸缓冲液9.5mmol/L，PH=4.0共脂肪酶500KU/L底物0.20mmol/L5校准品与校准模式5.1校准品：利德曼多项生化校准品。5.2校准类型和校准点数目：线性模式，1个校准点。5.3校准周期：校准间隔时间14天。但在：①更换试剂批号或出现质控漂移时；②仪器进行全面保养后；③仪器的重要零件更换后，进行一次校准。5.4校准液重建方法：校准品复溶液后分装后-20℃保存。6质控品与室内质控规则6.1质控品采用由Beckman-Coulter公司提供的两个不同水平未定值质控血清。6.2质控液重建方法：液态质控血清，即开即用，无需特殊准备。6.3质控品测定：在每一批标本中测定两个水平质控血清各一次。6.4质控规则：采用Westgard多规则质控规则，由计算机程序进行检索与判断。6.5如出现失控情况，按室内质控标准操作程序采取各种有效的纠正措施及时纠正，并在确认重新回复到控制状态后开始标本检测。7适用仪器适用AEROSET和C16000全自动生化分析仪器全自动生化分析仪器。8标本检测步骤装载试剂→进行校准→进行质控→输入标本检测项目→加载标本→标本测定→结果复核→报告。主要分析参数参见说明书。10结果计算A标准c＝ΧCOA标准式中：c——测定血清LPS/LIP浓度，U/L；A测定——标本管吸光度；A标准——标准管吸光度；CO——校准液中LPS/LIP浓度，U/L；11检验结果的报告及范围11.1结果的报告11.1.1结果经审核后，确认准确无误后发出报告。11.1.2报告单上标明结果的计量单位、参考区间、报告日期、时间、操作者和审核者签名，并有与申请单相同的医学信息。11.1.3如收到标本的质量可能对测定结果有影响的也在报告单上指出。11.2报告范围：0.0～700U/L，超过此范围的结果报告时必须附有证明该结果准确可靠的文字说明，例如：系根据标本稀释后重复测定的结果。12操作性能12.1精密度：批内CV<1.68%，批间CV<3.42%；12.2准确度：和质控品的均值偏差<10%.12.3灵敏度：LPS浓度为：29U/L时，吸光度变化率ΔA570nm/min为0.0120-0.0140。12.4线性范围：血清与试剂用量之比为1:100时，测定限度为4～700U/L。12.5方法的有限性及干扰因素内源性干扰物溶血、脂血、黄疸对测试结果无明显影响。13参考范围及医学决定水平13.1参考范围：5.6～51.3U/L14临床意义作为急性胰腺炎的诊断,脂肪酶和淀粉酶二者均有很高的灵敏度,但脂肪酶的特异性要优于淀粉酶。急性胰腺炎时，在4-8小时内，脂肪酶的活性就会增高，24小时左右达到峰值，8-14天后降至正常。15结果审核以及分析与相关项目的联系15.1由资深专业人员负责检验结果的审核。15.2认真审核每一个测定结果，审核者对发出报告结果的准确性和可靠性负责，并在报告单的审核者处签名。15.3相关项目：审核与胰腺炎其他指标关系，如出现与临床不符甚至相悖的情况，应分析与查找原因。16无威胁生命的“紧急值”及报告规定17有关引用程序与文件17.1Abbott自动