泡桐组织培养快繁技术规程DB41-T 1930-2019

ICS65.020.01

B05

DB41

河南省地方标准

DB41/T1930—2019

泡桐组织培养快繁技术规程

2019-11-21发布2020-02-21实施

河南省市场监督管理局发布

DB41/T1930—2019

目次

前言...............................................................................II

1范围..............................................................................1

2术语和定义........................................................................1

3外植体的无菌化培养................................................................1

4芽诱导............................................................................2

5增殖培养..........................................................................2

6生根培养..........................................................................2

7炼苗与移栽........................................................................2

I

DB41/T1930—2019

前言

本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。

本标准由河南省林业局提出并归口。

本标准起草单位：河南农业大学、河南省林业科学研究院。

本标准主要起草人：范国强、翟晓巧、赵振利、陈卓、刘荣宁、李永生、曹喜兵、林海、刘辉。

II

DB41/T1930—2019

泡桐组织培养快繁技术规程

1范围

本标准规定了泡桐组织培养快繁的术语和定义、外植体的无菌化培养、芽诱导、增殖培养、生根培

养、炼苗移栽、档案管理。

本标准适用于泡桐组织培养快速繁殖。

2术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

2.1

泡桐组织培养

在无菌条件下，将泡桐的种子、叶片或茎段接种在装有人工配制培养基的培养瓶中。将培养瓶放置

于人工控制光照和温度的组织培养室内，使之生长、分化或发育成完整植株的培养技术。

2.2

外植体

从植物活体上切取下来用于建立组织培养体系的材料，包括完整植株、器官或组织。

2.3

植物生长调节物质

调节植物生长发育的物质。

2.4

芽诱导

将培养材料在诱导培养基中进行培养，分化出不定芽的过程。

2.5

增殖培养

把外植体培养获得的培养物转移到增殖培养基中，使培养物得以成倍增殖的过程。

2.6

生根培养

将芽转移到生根培养基中进行生根培养，形成完整植株的过程。

3外植体的无菌化培养

3.1枝条无菌化材料培养

取生长健康的泡桐当年生带有腋芽或顶芽的嫩枝，用清水清洗后，先用质量分数为0.1%HgCl2消毒

8min，再用无菌水清洗5次，然后接种于不附加植物生长调节物质的MS基本培养基上。培养基中蔗糖浓

度20g/L，琼脂浓度3.0g/L～8.0g/L。培养瓶放置于培养室中，培养温度25℃±2℃，光照强度

130μmoL/m2·s，光照时间16h/d。60d可获得3～4对叶片的无菌材料，其叶片和茎段用作芽诱导的材

料。

1

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3.2种子无菌化材料培养

采集生长健康的泡桐当年生种子，先用70%酒精消毒30s，再放入0.1%HgCl2溶液中进行浸泡消

毒5min，然后用无菌水冲洗3～5次。最后将种子接种于不附加植物生长调节物质的MS培养基上，培养

基中蔗糖浓度20g/L，琼脂浓度5.0g/L。培养瓶放置于培养室中，培养温度、光照强度和光照时间

同3.1。50d后可获得3～4对叶片的无菌材料，其叶片和茎段用作芽诱导的材料。

4芽诱导

4.1叶片外植体芽的诱导

将获得的无菌叶片沿主脉切成约1.0cm×2.0cm的外植体，接种于附加不同浓度6-BA（8mg/L～

18mg/L）和NAA（0.1mg/L～0.5mg/L）的MS培养基上，培养基中蔗糖浓度20g/L，琼脂浓度5.0g/L。

培养瓶放置于培养室中，培养温度、光照强度和光照时间同3.1。培养35d后，在叶缘处分化出芽。

4.2茎段外植体芽的诱导

将获得的无菌茎段切成长1cm左右的外植体，接种于附加不同浓度6-BA（10mg/L～18mg/L）和NAA

（0.2mg/L～0.5mg/L）的MS基本培养基上，培养基中蔗糖浓度20g/L，琼脂浓度5.0g/L。培养瓶放

置于培养室中，培养温度、光照强度和光照时间同3.1。培养30d后分化出芽。

5增殖培养

将诱导出的芽接种于附加不同浓度6-BA（8mg/L～12mg/L）和NAA（0.1mg/L～0.5mg/L）的MS基

本培养基上，培养基中蔗糖浓度20g/L，琼脂浓度5.0g/L。培养瓶放置于培养室中，培养温度、光照

强度和光照时间同3.1。35d后长出丛生芽。

6生根培养

当诱导出的泡桐芽长到约3cm时，从茎基部切下，接种于附加不同浓度NAA（0.1mg/L～0.5mg/L）

的1/2MS培养基上进行生根培养，培养基中蔗糖质量浓度为20g/L，琼脂4.5g/L。培养瓶放置于培养室

中，培养温度、光照强度和光照时间同4.1。7d后分化出根。

7炼苗与移栽

当泡桐幼苗的根在生根培养基上长到约3cm时，逐步去掉组培瓶盖，在温室内锻炼7d，然后移入

盛有蛭石或草炭土（经5%的高锰酸钾消毒处理或121℃高温灭菌20min）的营养钵中。用1/2MS营养液

浇灌湿润，放到温室中培养，温室温度25℃～28℃，开始2周空气湿度85%以上，2周后湿度逐渐降低

与室外环境相同，4～5周后，可以移栽到大田中。

8档案管理

建立泡桐组织培养基本情况档案，包括以下内容：品种名称、材料来源、培养过程、培养照片等。

档案由组培人员填写，档案填写后，及时整理归档。

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2

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目次

前言...............................................................................II

1范围..............................................................................1

2术语和定义........................................................................1

3外植体的无菌化培养................................................................1

4芽诱导............................................................................2

5增殖培养..........................................................................2

6生根培养..........................................................................2

7炼苗与移栽........................................................................2

I

DB41/T1930—2019

前言

本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。

本标准由河南省林业局提出并归口。

本标准起草单位：河南农业大学、河南省林业科学研究院。

本标准主要起草人：范国强、翟晓巧、赵振利、陈卓、刘荣宁、李永生、曹喜兵、林海、刘辉。

II

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泡桐组织培养快繁技术规程

1范围

本标准规定了泡桐组织培养快繁的术语和定义、外植体的无菌化培养、芽诱导、增殖培养、生根培

养、炼苗移栽、档案管理。

本标准适用于泡桐组织培养快速繁殖。

2术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

2.1

泡桐组织培养

在无菌条件下，将泡桐的种子、叶片或茎段接种在装有人工配制培养基的培养瓶