细胞生物学实验 实验课程大纲

《细胞生物学实验》教学大纲

课程编码：171140401

课程名称：细胞生物学实验

学时/学分：18学时

关联课程：生物化学

适用专业：生物技术

开课教研室：生物技术教研室

课程类别与性质：必修课

一、课时分配与考核权重

基于对教学目标以及对基本知识、基本技能、基本素养的分析，合理分配各

实验所需课时，科学确定过程性评价（占比60%-70%）的分配权重及评价方法。

设置综合技能测试（30犷40强）要突出基于多元能力评价的非标准答案实验考试

改革，重在考核学生的动手技能、创新思维和实验设计能力。考评考核，要体现

对学术诚信的基本要求。

课时分配与考核权重一览表

序号实验名称课时数评价方法及考核权重

1普通显微镜的使用及细2实验态度与考勤占20%,选

胞形态观察、大小测量题报告占30%,实验记录和

和死活细胞鉴定实验报告占50%□

2叶绿体的分离与观察2实验态度与考勤占20%,选

题报告占30%,实验记录和

实验报告占50%o

3细胞凝集2实验态度与考勤占20%,选

题报告占30%,实验记录和

实验报告占50%o

4细胞骨架的光学显微观4实验态度与考勤占20%,选

察和永久切片的制作题报告占30%,实验记录和

实验报告占50%o

5DNA的显示(Feulgen)2实验态度与考勤占20%,选

反应题报告占30%,实验记录和

实验报告占50%o

6植物原生质体的制备及4实验态度与考勤占20%,选

融合题报告占30%,实验记录和

实验报告占50%o

7细胞内碱性蛋白和总体2实验态度与考勤占20%,选

蛋白的原位显示题报告占30%,实验记录和

实验报告占50%。

二、课程资源库

包括实验指导书、知识包、优秀学生作品、参考著作、近2年的前沿文章、

网络资源等。每门课程需推荐优秀专著5本以上（不包括教材），国内本专业顶

尖级或国际知名期刊10种以上（至少包括外文期刊2种），网络资源5项以上，

其中要包括国家级、省级实验教学示范中心共享资源。

1.参考书：

李芬.《细胞生物学实验技术》.科学出版社.2007.

王崇英、高清祥.《细胞生物学实验》.高等教育出版社.2011.

2.期刊：《CellResearch》、《PlantCell》、《JMOLCELLBIOL》、《CELL

MOLIMMUNOL》、《中国科学：生命科学》、《中国细胞生物学学报》、《分

子生物学报》.

3.网络资源：作者.文题.更新和修改日期.访问路径.

美国细胞生物学会的ibioseminar栏目:http:〃/ibioseminars/小木虫/美

国国家基因组资源中心/科学网

三、教学内容及教学基本要求

第1-2学时（以实验概论3学时为例，实验概论内容非3学时参考此模式调整或顺延）

实验概论（内容、时间也可根据实际需要安排，该部分完成后直接进行第一个实验）

1.课前准备（针对任课教师备课提出基本要求）

1.1实验课程属性与教学目标分析：细胞生物学是生命科学四大基础学科之

一，它从细胞水平、亚细胞水平和分子水平三个不同层次上研究细胞的结构功能

和生命活动的基本规律。细胞生物学实验是细胞生物学的重要组成部分。通过实

验操作和直观的感性认识，不仅可以加深学生对理论知识的理解，同时还能使学

生开拓思路，锻炼实验动手能力。掌握基本的细胞生物学研究方法，有助于形成

正确的科学研究思路和观念。

开设本课程的目的是使学生掌握细胞生物学实验技术，能够理论联系实际，

加深对细胞生物学基础知识的理解，使学生扎实掌握观察研究细胞结构和功能的

基本方法，更重要的是在实验过程中培养学生扎实的动手能力和良好的科研素

质，提高学生分析问题和解决问题的能力，为了今后独立进行科研工作打下坚实

的基础。

爱护显微镜，小心玻璃用品。

L2学习对象分析：授课对象为生物技术专业大三学生，在学习实验课的同

时，同学们也在学习细胞生物学的理论课，并且同学们已经学习了一些专业课及

相关实验课程，有一定的实验室基本操作技能和安全意识，但在每节课前仍需给

同学们加强相关安全事项。

1.3主要实验教学条件

水浴锅，分析天平、玻璃仪器、显微镜等实验条件均已具备。

1.4实验教学方案设计：依据实验课程属性、教学目标（预期学习效果）和

学习对象分析，准确把握本门实验课程的重点和难点，并对本实验课程教学内容、

教学资源、教学手段、考核办法等进行总体规划。综合优化实验教学内容，科学

设计实验教学流程，高效利用教学资源，合理选择教学手段和方法，及时开展考

核评价与反馈。

结合理论课讲授，安排验证性实验和设计性实验。

实验一普通显微镜的使用及细胞形态观察、大小测量和死活细胞鉴定

1.课前准备（针对任课教师备课提出基本要求）

（1）加强课程的网络资源库建设；

（2）熟悉课程的讲授内容和方式

（3）整理好课程教学中用到的实验耗材、药品及仪器等；

（4）做好准备实验及预实验，及时调整实验试剂及实验数据；提前检查

实验室水电安全，防火防盗工作，避免出现实验室安全事故。

1.1课外学习评价：针对上次实验要求巩固、拓展的知识及技能，依据实际

情况收集整理相关信息，以便下次课上及时开展互动和反馈。对于要求课前准备

的内容主要以课堂测试的方式检查预习效果。

1.2主要实验教学条件：本次实验每个小组的实验项目大多不同，用的主要

仪器有：显微镜、恒温水浴锅、离心机、天分析天平。在仪器使用之前，会根据

不同小组使用的仪器进行安全培训及使用注意事项。实验室在没有实验课安排时

对学生进行开放，学生可先提出实验室使用申请，预约实验时间，经审批后方可

进入实验室进行实验。

1.3实验教学方案设计：

（1）回顾本次课程的所涉及到的理论知识；

（2）介绍实验过程中的重难点、注意事项和数据的处理；

（3）教学手段主要是借助PPT和讲义完成；

（4）明确教学目标和考核要点；

（5）要求学生课下完成指定的拓展资料和线下作业。

2.课内教学（加强实验课堂组织与管理，注重生成性教学，突出过程性评价）

2.1实验教学内容：明确本实验课程各实验的内容设置、课时分配及考核权

重；建立与实验相关联的前修、后习技能链，并进一步阐述其内在联系；引导学

生了解本实验课程与专业或行业、产业的结合点及关联度；明确指出本实验课程

的重点内容和难点所在；确立本实验课程所适合的教学范式；指导学生熟悉实验

室环境，认识主要设备，强调实验室安全防控风险点和应对措施，科学规范处置

实验废弃物，结合生动案例，引导学生充分认识本学科领域近现代实验技术进展

状况，详细介绍本实验课程资源库的特色及使用方法；传授有效的学习路径，明

确考核方法；激发学生的学习兴趣，树立学生的学习自信，培养学生的自学能力。

一、实验目的

1.熟悉普通光学显微镜的基本构造和性能，掌握使用方法。

2.了解细胞的一般形态和基本结构。

3.掌握显微测微尺的使用，对细胞大小有一直观认识。

4.了解鉴定死活细胞的方法。

二、实验原理

1.显微测微尺的使用

镜台测微尺：表示绝对长度，长1mm,分成100小格，每小格为0.01mm。

不被用来直接测量，而是用它来校正目镜测微尺，故其质量对所测微体影响极大。

目镜测微尺：是一块比目镜筒内径稍小的有标尺的圆形玻璃片，标尺长

10毫米、分为100格。需要镜台测微尺校正为绝对长度再测定细胞大小。

2.死活细胞鉴定：台盼蓝是一种低毒的活体染色剂，只能透过质膜受损的细

胞或死细胞。

三、实验用品

1.试验材料：

洋葱内表皮细胞口腔上皮细胞、

（人的口腔上皮细胞是扁平、

多边形的，形状不很规）

2.试剂

0.2%台盼蓝溶液

3.仪器

测微尺（2套）、普通光学显微镜、刀片、镜子、玻璃滴管、吸水纸、

牙签。

四、试验方法

一、细胞死活的鉴定

0.2%台盼蓝染色5-10分钟后进行观察。

二、细胞大小测量

1）测量时，镜台测微尺换成样本，

2）目镜测微尺来测量细胞的大小

3）改变显微镜的放大倍率，则需对目镜测微尺重新进行标定。

三、细胞形态的观察

五、注意事项

取口腔黏膜上皮细胞注意的问题

1.口腔上皮细胞主要分布在口腔两侧颊部。用消毒牙签的钝端，在漱净的

口腔任意一侧的颊部，轻轻刮几下。

2.取材前，口腔一定要用清水漱净，去除口腔内的食物残渣。

3.用方签在口腔壁上轻轻刮动，不要刮在牙缝里，因为牙齿上刮下来的是

食物碎屑，不是口腔上皮细胞。

2.2教学方法：结合PPT讲实验原理和实验步骤，分析实验结果，然后具体

演示，最后同学们按照分组单独实验，实验过程中各组间调查，回答解决同学们

遇到的问题。

2.3课内小结：（时间10-15分钟）包括教学理念、教学目标、教学重难点、

教学内容、教学方式与方法、教学组织与管理、教学评价尤其是学生实验技能习

得情况评价等要素。

3.课后巩固与拓展

明确课后需要巩固复习、拓展学习的实验技能，列出对应的资料来源，如

期刊及文章名称，著作的章节页码，网络资源的获取路径等，其中要包括国家级、

省级实验教学示范中心等的相关共享资源，并确定课后学习效果的反馈与考核办

法，制定利用开放实验室相关计划。明确下次课前需要前置预习的相关内容和关

键知识点，列出对应的学习资源。

1.绘制口腔黏膜上皮细胞及洋葱内表皮细胞图（2-3个细胞）

2.列表写出3个细胞口腔黏膜上皮细胞直径，并计算平均值。

3.取口腔黏膜上皮细胞注意的问题

4.生物绘图注意事项

4.实验考核与评价

围绕课内教与学、课外导与做等环节，建立本实验考核细则，明确本实验评

价权重及各技能点所占分值，落实过程性评价各项措施。

（对实验过程中积极参与小组与团队合作，服务学生开展实验,在实验准备、

实验结束后清场等表现突出者，有奖励激励措施。)

考核方式与权重比例列表

考核方式评价权重备注

实验态度与出勤20%

选题报告30%

实验记录与实验50%

报告

合计100%

第3-4学时(以第一个实验3学时为例，非3学时的参考此模式调整或顺延)

实验二叶绿体的分离与观察

1.课前准备(针对任课教师备课提出基本要求)

(1)加强课程的网络资源库建设；

(2)熟悉课程的讲授内容和方式

(3)整理好课程教学中用到的实验耗材、药品及仪器等；

(4)做好准备实验及预实验，及时调整实验试剂及实验数据；提前检查

实验室水电安全，防火防盗工作，避免出现实验室安全事故。

1.1课外学习评价：针对上次实验要求巩固、拓展的知识及技能，依据实际

情况收集整理相关信息，以便下次课上及时开展互动和反馈。对于要求课前准备

的内容主要以课堂测试的方式检查预习效果。

1.2主要实验教学条件：本次实验每个小组的实验项目大多不同，用的主要

仪器有：显微镜、恒温水浴锅、离心机、天分析天平。在仪器使用之前，会根据

不同小组使用的仪器进行安全培训及使用注意事项。实验室在没有实验课安排时

对学生进行开放，学生可先提出实验室使用申请，预约实验时间，经审批后方可

进入实验室进行实验。

L3实验教学方案设计：

(1)回顾本次课程的所涉及到的理论知识；

(2)介绍实验过程中的重难点、注意事项和数据的处理；

(3)教学手段主要是借助PPT和讲义完成；

(4)明确教学目标和考核要点；

（5）要求学生课下完成指定的拓展资料和线下作业。

2.课内教学（加强实验课堂组织与管理，注重生成性教学，突出过程性评价）

2.1实验教学内容：明确本实验课程各实验的内容设置、课时分配及考核权

重；建立与实验相关联的前修、后习技能链，并进一步阐述其内在联系；引导学

生了解本实验课程与专业或行业、产业的结合点及关联度；明确指出本实验课程

的重点内容和难点所在；确立本实验课程所适合的教学范式；指导学生熟悉实验

室环境，认识主要设备，强调实验室安全防控风险点和应对措施，科学规范处置

实验废弃物，结合生动案例，引导学生充分认识本学科领域近现代实验技术进展

状况，详细介绍本实验课程资源库的特色及使用方法；传授有效的学习路径，明

确考核方法；激发学生的学习兴趣，树立学生的学习自信，培养学生的自学能力。

一、实验目的

通过植物细胞叶绿体的分离，了解细胞器分离的一般原理和方法。

二、实验原理

细胞器分离的过程包括两个主要阶段：破碎细胞和细胞组分的分离。细胞破

碎采用在等渗溶液中进行组织匀浆、分离。叶绿体的分离采用差速离心或密度梯

度离心法进行。差速离心主要是采取逐渐提高离心速度的方法分离不同大小的细

胞器。起始的离心速度较低，让较大的颗粒沉降到管底，小的颗粒仍然悬浮在上

清液中。收集沉淀，改用较高的离心速度离心悬浮液，将较小的颗粒沉降，以此

类推，达到分离不同大小颗粒的目的。差速离心的分辨率不高，沉降系数在同一

个数量级内的各种粒子不容易分开，常用于其他分离手段之前的粗制品提取。

三、实验用品

1.材料：菠菜叶片

2.试剂：蒸储水，0.35mol/L氯化钠溶液

3.仪器：普通离心机、天平、显微镜、镜子、载玻片、盖玻片、离心管、吸

水纸等

四、实验方法

1.菠菜叶片（去叶脉）1.5g一研磨（冰浴）-*0.35mol/L氯化钠15ml-研

磨混匀f匀浆过滤（6层纱布）一滤液在1000rpm离心2min一弃沉淀，上清液

3000rpm离心5minf去上清液f沉淀为叶绿体（混有部分细胞核），用0.35

mol/L氯化钠溶液悬浮（0.5ml）一滴片观察

2.取叶绿体悬液1滴置于载玻片上，加盖玻片后用用普通光学显微镜观察叶

绿体的形态结构

3.菠菜叶手切片观察

新鲜菠菜叶，刀片切出一斜面置于载玻片上，滴加1-2滴NaCl溶液，盖上盖

片，显微镜下观察。用镶子摄取或刀片刮取新鲜菠菜叶片叶肉，滴加1-2滴NaCl

溶液，作临时装片。

五、实验结果

L普通光镜下，可看到叶绿体为绿色橄榄型，高倍镜下可看到叶绿体内部含

有较深的绿色颗粒，即基粒。

2.菠菜叶手切片在普通光镜下可以看到三种细胞：表皮细胞、保卫细胞、叶

肉细胞。叶肉细胞呈长方形或类方形，内含大量带有绿色的叶绿体颗粒。另外，

视野下还可见到大量散在的点状或类圆状叶绿体颗粒。

六、注意事项

L叶绿体的分离应在等渗溶液（0.35mol/L氯化钠）中进行，以免渗透压的改

变使叶绿体受到损伤。

2.分离过程最好在0-5℃的条件下进行；如果在室温下，要迅速分离和观察。

3.离心机使用：离心管要平衡

2.3教学方法：聚焦双向互动，聚力教学全过程。学生动手训练为主，教师

及时引导，开展实验训练、探究、讨论、纠错等，尤其是要对出现的多元化实验

结果进行析因。

2.4课内小结：（时间10-15分钟）围绕本次实验的教学目标、教学重难点、

教学核心内容、教学理念等要素进行概括总结或师生、生生互动，对实验中出现

的问题进行归纳分析。注重培养学生的创新思维，注重发挥学生的主观能动性，

强化学生动手技能。

3.课后巩固与拓展

明确课后需要巩固复习、拓展学习的实验技能，列出对应的资料来源，如期

刊及文章名称，著作的章节页码，网络资源的获取路径等，并确定课后学习、训

练效果的反馈与考核办法。明确下次实验前需要前置预习的相关内容和关键知识

点，列出对应的学习资源。

出现实验操作或结果不达标时，要有原因分析和重做实验的措施。

作业

L根据显微观察结果，绘制菠菜叶的结构模式图。

4.实验考核与评价

围绕课内教与学、课外导与做等环节，建立本实验考核细则，明确本实验评

价权重及各技能点所占分值，落实过程性评价各项措施。

(对实验过程中积极参与小组与团队合作，服务学生开展实验，在实验准备、

实验结束后清场等表现突出者，有奖励激励措施。)

考核方式与权重比例列表

考核方式评价权重备注

实验态度与出勤20%

选题报告30%

实验记录与实验50%

报告

合计

第5—6学时

实验三细胞凝集

1.课前准备(针对任课教师备课提出基本要求)

(1)加强课程的网络资源库建设；

(2)熟悉课程的讲授内容和方式

(3)整理好课程教学中用到的实验耗材、药品及仪器等；

(4)做好准备实验及预实验，及时调整实验试剂及实验数据；提前检查

实验室水电安全，防火防盗工作，避免出现实验室安全事故。

1.1课外学习评价：针对上次实验要求巩固、拓展的知识及技能，依据实际

情况收集整理相关信息，以便下次课上及时开展互动和反馈。对于要求课前准备

的内容主要以课堂测试的方式检查预习效果。

1.2主要实验教学条件：本次实验每个小组的实验项目大多不同，用的主要

仪器有：显微镜、恒温水浴锅、离心机、天分析天平。在仪器使用之前，会根据

不同小组使用的仪器进行安全培训及使用注意事项。实验室在没有实验课安排时

对学生进行开放，学生可先提出实验室使用申请，预约实验时间，经审批后方可

进入实验室进行实验。

1.3实验教学方案设计：

(1)回顾本次课程的所涉及到的理论知识；

(2)介绍实验过程中的重难点、注意事项和数据的处理；

(3)教学手段主要是借助PPT和讲义完成；

(4)明确教学目标和考核要点；

(5)要求学生课下完成指定的拓展资料和线下作业。

2.课内教学(加强实验课堂组织与管理，注重生成性教学，突出过程性评价)

2.1实验教学内容：明确本实验课程各实验的内容设置、课时分配及考核权

重；建立与实验相关联的前修、后习技能链，并进一步阐述其内在联系；引导学

生了解本实验课程与专业或行业、产业的结合点及关联度；明确指出本实验课程

的重点内容和难点所在；确立本实验课程所适合的教学范式；指导学生熟悉实验

室环境，认识主要设备，强调实验室安全防控风险点和应对措施，科学规范处置

实验废弃物，结合生动案例，引导学生充分认识本学科领域近现代实验技术进展

状况，详细介绍本实验课程资源库的特色及使用方法；传授有效的学习路径，明

确考核方法；激发学生的学习兴趣，树立学生的学习自信，培养学生的自学能力。

一、实验目的

通过植物细胞叶绿体的分离，了解细胞器分离的一般原理和方法。

二、实验原理

细胞器分离的过程包括两个主要阶段：破碎细胞和细胞组分的分离。细胞破

碎采用在等渗溶液中进行组织匀浆、分离。叶绿体的分离采用差速离心或密度梯

度离心法进行。差速离心主要是采取逐渐提高离心速度的方法分离不同大小的细

胞器。起始的离心速度较低，让较大的颗粒沉降到管底，小的颗粒仍然悬浮在上

清液中。收集沉淀，改用较高的离心速度离心悬浮液，将较小的颗粒沉降，以此

类推，达到分离不同大小颗粒的目的。差速离心的分辨率不高，沉降系数在同一

个数量级内的各种粒子不容易分开，常用于其他分离手段之前的粗制品提取。

三、实验用品

1.材料：菠菜叶片

2.试剂：蒸储水，0.35mol/L氯化钠溶液

3.仪器：普通离心机、天平、显微镜、镶子、载玻片、盖玻片、离心管、吸

水纸等

四、实验方法

1.菠菜叶片（去叶脉）1.5g一研磨（冰浴）-0.35mol/L氯化钠15ml-研

磨混匀一匀浆过滤（6层纱布）一滤液在1000rpm离心2min一弃沉淀，上清液

3000rpm离心5min一去上清液一沉淀为叶绿体（混有部分细胞核），用0.35

mol/L氯化钠溶液悬浮（0.5ml）一滴片观察

2.取叶绿体悬液1滴置于载玻片上，加盖玻片后用用普通光学显微镜观察叶

绿体的形态结构

3.菠菜叶手切片观察

新鲜菠菜叶，刀片切出一斜面置于载玻片上，滴加1-2滴NaCl溶液，盖上盖

片，显微镜下观察。用镶子摄取或刀片刮取新鲜菠菜叶片叶肉，滴加上2滴NaCl

溶液，作临时装片。

五、实验结果

1.普通光镜下，可看到叶绿体为绿色橄榄型，高倍镜下可看到叶绿体内部含

有较深的绿色颗粒，即基粒。

2.菠菜叶手切片在普通光镜下可以看到三种细胞：表皮细胞、保卫细胞、叶

肉细胞。叶肉细胞呈长方形或类方形，内含大量带有绿色的叶绿体颗粒。另外，

视野下还可见到大量散在的点状或类圆状叶绿体颗粒。

六、注意事项

L叶绿体的分离应在等渗溶液（0.35mol/L氯化钠）中进行，以免渗透压的改

变使叶绿体受到损伤。

2.分离过程最好在0-5C的条件下进行；如果在室温下，要迅速分离和观察。

3.离心机使用：离心管要平衡

2.3教学方法：聚焦双向互动，聚力教学全过程。学生动手训练为主，教师

及时引导，开展实验训练、探究、讨论、纠错等，尤其是要对出现的多元化实验

结果进行析因。

2.4课内小结：（时间10-15分钟）围绕本次实验的教学目标、教学重难点、

教学核心内容、教学理念等要素进行概括总结或师生、生生互动，对实验中出现

的问题进行归纳分析。注重培养学生的创新思维，注重发挥学生的主观能动性，

强化学生动手技能。

3.课后巩固与拓展

明确课后需要巩固复习、拓展学习的实验技能，列出对应的资料来源，如期

刊及文章名称，著作的章节页码，网络资源的获取路径等，并确定课后学习、训

练效果的反馈与考核办法。明确下次实验前需要前置预习的相关内容和关键知识

点，列出对应的学习资源。

出现实验操作或结果不达标时，要有原因分析和重做实验的措施。

1.哪些因素影响细胞凝集反应？

答：

（1）温度。温度影响酶的活性。

（2）时间。随着时间的延长细胞聚集程度增大。

（3）凝集素。不同的凝集素凝集程度不同。

（4）反应底物。

（5）细胞类型。

（6）反应培养板的质量。

（7）人为因素。

2.结合凝集素的特性，简述凝集素在生物学中有何应用？研究凝集素有何意

义？

答：人们利用凝集素与不同的糖蛋白特异性结合的原理，识别和研究不同类

型膜结构的生物学特征，以及进行血型鉴定。ABO血型鉴定主要用于临床输血，

在皮肤、肾等器官移植的时候选择ABO血型相符的供体；不孕症和新生儿溶血症

病因的分析及亲子鉴定等。另外，凝集素在临床疾病防治、机体生理活动调控以

及生物工程等方面展示出了十分广阔的应用前景。如：植物凝集素可抑制受精；

芸豆凝集素可直接抑制HIVT反转录酶的活性，减少HIV感染者的病毒载量；细

胞膜表面糖复合物的糖链结构与肿瘤细胞增殖、侵染、转移等发展过程密切相关,

凝集素芯片技术实现了对癌症的快速、高通量检测，有助于筛选出癌症相关的糖

链标志物。1.根据显微观察结果，绘制菠菜叶的结构模式图。

4.实验考核与评价

围绕课内教与学、课外导与做等环节，建立本实验考核细则，明确本实验评

价权重及各技能点所占分值，落实过程性评价各项措施。

(对实验过程中积极参与小组与团队合作，服务学生开展实验，在实验准备、

实验结束后清场等表现突出者，有奖励激励措施。)

考核方式与权重比例列表

考核方式评价权重备注

实验态度与出勤20%

选题报告30%

实验记录与实验50%

报告

合计

第7-10学时

实验四细胞骨架的光学显微观察和永久切片的制作

1.课前准备(针对任课教师备课提出基本要求)

(1)加强课程的网络资源库建设；

(2)熟悉课程的讲授内容和方式

(3)整理好课程教学中用到的实验耗材、药品及仪器等；

(4)做好准备实验及预实验，及时调整实验试剂及实验数据；提前检查

实验室水电安全，防火防盗工作，避免出现实验室安全事故。

1.1课外学习评价：针对上次实验要求巩固、拓展的知识及技能，依据实际

情况收集整理相关信息，以便下次课上及时开展互动和反馈。对于要求课前准备

的内容主要以课堂测试的方式检查预习效果。

L2主要实验教学条件：本次实验每个小组的实验项目大多不同，用的主要

仪器有：显微镜、恒温水浴锅、离心机、天分析天平。在仪器使用之前，会根据

不同小组使用的仪器进行安全培训及使用注意事项。实验室在没有实验课安排时

对学生进行开放，学生可先提出实验室使用申请，预约实验时间，经审批后方可

进入实验室进行实验。

L3实验教学方案设计：

(1)回顾本次课程的所涉及到的理论知识；

(2)介绍实验过程中的重难点、注意事项和数据的处理；

(3)教学手段主要是借助PPT和讲义完成；

（4）明确教学目标和考核要点；

（5）要求学生课下完成指定的拓展资料和线下作业。

2.课内教学（加强实验课堂组织与管理，注重生成性教学，突出过程性评价）

2.1实验教学内容：明确本实验课程各实验的内容设置、课时分配及考核权

重；建立与实验相关联的前修、后习技能链，并进一步阐述其内在联系；引导学

生了解本实验课程与专业或行业、产业的结合点及关联度；明确指出本实验课程

的重点内容和难点所在；确立本实验课程所适合的教学范式；指导学生熟悉实验

室环境，认识主要设备，强调实验室安全防控风险点和应对措施，科学规范处置

实验废弃物，结合生动案例，引导学生充分认识本学科领域近现代实验技术进展

状况，详细介绍本实验课程资源库的特色及使用方法；传授有效的学习路径，明

确考核方法；激发学生的学习兴趣，树立学生的学习自信，培养学生的自学能力。

一、实验目的

掌握植物细胞内细胞骨架的光学观察方法，了解细胞骨架在细胞内的分布特

点。

二、实验原理

细胞内脂质和大部分蛋白质可与去污剂TritonXTOO形成去污剂-蛋白/脂质

复合物，从而溶于水中被提取，而结合成纤维状的微丝束属于不可溶性蛋白，就

不会被TritonXTOO破坏而保持其在活细胞中存在的状态。之后用考马斯亮蓝

R250对蛋白质染色，使骨架系统在光学显微镜下可见，从而对其进行观察研究。

三、实验用品

1.实验材料

新鲜洋葱鳞茎的内表皮。

2.实验器材

普通光学显微镜、10mL小烧杯、镜子、刀片、载玻片、盖玻片、吸水纸、

擦镜纸、PH计、水浴锅。

3.试剂:

M一缓冲液、磷酸缓冲液（PBS）、3%戊二醛、KTriton-100、0.2%考马斯亮

蓝R250、乙醇、二甲苯、中性树胶。

四、实验方法

1.用镶子撕取洋葱鳞叶内侧的表皮若干片（约0.5cm2大小若干片），置于1.5ml

离心管中，加入PBS（1.5mL左右），使其下沉（5min左右）。

2.吸去缓冲液，用KTriotnXT00处理20min。

3.吸去TritonX-100,用M缓冲液洗3次，每次5T0min。

4.用3%戊二醛固定30min。

5.PBS（1.5ml左右）洗3次，每次5T0min,滤纸吸去残液。

6.0.2%考马斯亮蓝R250染色至少30min。

7.蒸储水洗涤2次，然后将样品置于载玻片上，加盖玻片，在普通光学显微镜下

观察。

8.选取骨架形态清晰、典型的细胞或细胞群，适当放大倍数下拍照。

9.选取观察效果好的制作永久切片

50%乙醇-70强乙醇一95%乙醇一100%乙醇一二甲苯

每级5~10min然后将样品平展于载玻片上，加一滴中性树胶，盖上盖玻片封

片，制成永久切片。

五、实验结果

观察：镜下可见洋葱表皮细胞轮廓，微丝束呈深蓝色。转换高倍镜观察，转

动微调，可见细胞骨架的立体结构。

六、注意事项：

1.撕取洋葱鳞茎内表皮不可带茎肉，样本要展开铺平。

2.去垢时间不要超过30min。

3.染色时间需掌握好，必要时可分别设不同染色时间比较。

4.由微丝组成的应力纤维（张力纤维）是一种动态结构，细胞充分贴壁铺展时纤

维挺直、丰富；反之，细胞收缩变圆，应力纤维弯曲，甚至部分解聚消失而显稀

少。

2.3教学方法：聚焦双向互动，聚力教学全过程。学生动手训练为主，教师

及时引导，开展实验训练、探究、讨论、纠错等，尤其是要对出现的多元化实验

结果进行析因。

2.4课内小结：（时间10-15分钟）围绕本次实验的教学目标、教学重难点、

教学核心内容、教学理念等要素进行概括总结或师生、生生互动，对实验中出现

的问题进行归纳分析。注重培养学生的创新思维，注重发挥学生的主观能动性，

强化学生动手技能。

3.课后巩固与拓展

明确课后需要巩固复习、拓展学习的实验技能，列出对应的资料来源，如期

刊及文章名称，著作的章节页码，网络资源的获取路径等，并确定课后学习、训

练效果的反馈与考核办法。明确下次实验前需要前置预习的相关内容和关键知识

点，列出对应的学习资源。

出现实验操作或结果不达标时，要有原因分析和重做实验的措施。

绘出植物细胞骨架微丝的分布图。(2-3个细胞)

4.实验考核与评价

围绕课内教与学、课外导与做等环节，建立本实验考核细则，明确本实验评

价权重及各技能点所占分值，落实过程性评价各项措施。

(对实验过程中积极参与小组与团队合作，服务学生开展实验，在实验准备、

实验结束后清场等表现突出者，有奖励激励措施。)

考核方式与权重比例列表

考核方式评价权重备注

实验态度与出勤20%

选题报告30%

实验记录与实验50%

报告

合计

第11-12学时

实验五DNA的显示(Feulgen)反应

1.课前准备(针对任课教师备课提出基本要求)

(1)加强课程的网络资源库建设；

(2)熟悉课程的讲授内容和方式

(3)整理好课程教学中用到的实验耗材、药品及仪器等；

(4)做好准备实验及预实验，及时调整实验试剂及实验数据；提前检查

实验室水电安全，防火防盗工作，避免出现实验室安全事故。

1.1课外学习评价：针对上次实验要求巩固、拓展的知识及技能，依据实际

情况收集整理相关信息，以便下次课上及时开展互动和反馈。对于要求课前准备

的内容主要以课堂测试的方式检查预习效果。

1.2主要实验教学条件：本次实验每个小组的实验项目大多不同，用的主要

仪器有：显微镜、恒温水浴锅、离心机、天分析天平。在仪器使用之前，会根据

不同小组使用的仪器进行安全培训及使用注意事项。实验室在没有实验课安排时

对学生进行开放，学生可先提出实验室使用申请，预约实验时间，经审批后方可

进入实验室进行实验。

1.3实验教学方案设计：

(1)回顾本次课程的所涉及到的理论知识；

(2)介绍实验过程中的重难点、注意事项和数据的处理；

(3)教学手段主要是借助PPT和讲义完成；

(4)明确教学目标和考核要点；

(5)要求学生课下完成指定的拓展资料和线下作业。

2.课内教学(加强实验课堂组织与管理，注重生成性教学，突出过程性评价)

2.1实验教学内容：明确本实验课程各实验的内容设置、课时分配及考核权

重；建立与实验相关联的前修、后习技能链，并进一步阐述其内在联系；引导学

生了解本实验课程与专业或行业、产业的结合点及关联度；明确指出本实验课程

的重点内容和难点所在；确立本实验课程所适合的教学范式；指导学生熟悉实验

室环境，认识主要设备，强调实验室安全防控风险点和应对措施，科学规范处置

实验废弃物，结合生动案例，引导学生充分认识本学科领域近现代实验技术进展

状况，详细介绍本实验课程资源库的特色及使用方法；传授有效的学习路径，明

确考核方法；激发学生的学习兴趣，树立学生的学习自信，培养学生的自学能力。

一、实验目的

1、了解Feulgen染色反应原理；

2、掌握Feulgen染色的方法，观察染色结果。

二、实验原理

根据DNA经盐酸水解后，打开了喋吟碱基和脱氧核糖连接的键，在脱氧核糖

的一端形成游离的醛基。这些醛基就在原位与Schiff试剂结合，形成紫红色的化

合物。所以凡有DNA的部位，就呈现为紫红色。

Feulgen反应是特异性显示DNA的最经典方法，即可进行DNA定位显示，又可

用显微分光光度计进行定量分析。Feulgen反应对组织中DNA的检测具有高度专一

性。组织中除DNA外还有多糖、RNA和其他自由醛基可以被盐酸酸解掉。

小NHH-C=O

《噫岭底基）H-C-H

B

HO-CH2

NH.sa-尸

HH

图6噪吟脱氧核昔水解反应式图7Fwilgen反应原理

三、实验用品

1、仪器：显微镜、刀片、镒子、载玻片、盖玻片、吸水纸、水浴锅

2、材料：洋葱鳞茎表皮

3.试剂:INHCKschiff试剂、亚硫酸水

四、实验方法

①取小麦根尖和洋葱内表皮（绿豆大小）浸入预热至60℃的1NHC1中水解，时间

10min。

②蒸储水洗后，转入Schiff液中避光染30min,待根尖变为深红色；

③在新配亚硫酸水中洗3次，每次1min；

④蒸储水洗5min,在载玻片上切下深红色根尖备用；

⑤根尖镶子捣碎压片，制片镜下观察。

五、注意事项

按上述操作，细胞中水溶性糖类已丧失，被染色的是不溶性的碳水化合物。

2.3教学方法：聚焦双向互动，聚力教学全过程。学生动手训练为主，教师及时

引导，开展实验训练、探究、讨论、纠错等，尤其是要对出现的多元化实验结果

进行析因。

2.4课内小结：（时间10T5分钟）围绕本次实验的教学目标、教学重难点、

教学核心内容、教学理念等要素进行概括总结或师生、生生互动，对实验中出现

的问题进行归纳分析。注重培养学生的创新思维，注重发挥学生的主观能动性，

强化学生动手技能。

3.课后巩固与拓展

明确课后需要巩固复习、拓展学习的实验技能，列出对应的资料来源，如期

刊及文章名称，著作的章节页码，网络资源的获取路径等，并确定课后学习、训

练效果的反馈与考核办法。明确下次实验前需要前置预习的相关内容和关键知识

点，列出对应的学习资源。

出现实验操作或结果不达标时，要有原因分析和重做实验的措施。

作业

绘图描述所观察到的试验结果。

4.实验考核与评价

围绕课内教与学、课外导与做等环节，建立本实验考核细则，明确本实验评

价权重及各技能点所占分值，落实过程性评价各项措施。

(对实验过程中积极参与小组与团队合作，服务学生开展实验，在实验准备、

实验结束后清场等表现突出者，有奖励激励措施。)

考核方式与权重比例列表

考核方式评价权重备注

实验态度与出勤20%

选题报告30%

实验记录与实验50%

报告

合计

第13-16学时

实验六植物原生质体的制备与融合

1.课前准备(针对任课教师备课提出基本要求)

(1)加强课程的网络资源库建设；

(2)熟悉课程的讲授内容和方式

(3)整理好课程教学中用到的实验耗材、药品及仪器等；

(4)做好准备实验及预实验，及时调整实验试剂及实验数据；提前检查

实验室水电安全，防火防盗工作，避免出现实验室安全事故。

1.1课外学习评价：针对上次实验要求巩固、拓展的知识及技能，依据实际

情况收集整理相关信息，以便下次课上及时开展互动和反馈。对于要求课前准备

的内容主要以课堂测试的方式检查预习效果。

1.2主要实验教学条件：本次实验每个小组的实验项目大多不同，用的主要

仪器有：显微镜、恒温水浴锅、离心机、天分析天平。在仪器使用之前，会根据

不同小组使用的仪器进行安全培训及使用注意事项。实验室在没有实验课安排时

对学生进行开放，学生可先提出实验室使用申请，预约实验时间，经审批后方可

进入实验室进行实验。

1.3实验教学方案设计：

(1)回顾本次课程的所涉及到的理论知识；

(2)介绍实验过程中的重难点、注意事项和数据的处理；

(3)教学手段主要是借助PPT和讲义完成；

(4)明确教学目标和考核要点；

(5)要求学生课下完成指定的拓展资料和线下作业。

2.课内教学(加强实验课堂组织与管理，注重生成性教学，突出过程性评价)

2.1实验教学内容：明确本实验课程各实验的内容设置、课时分配及考核权

重；建立与实验相关联的前修、后习技能链，并进一步阐述其内在联系；引导学

生了解本实验课程与专业或行业、产业的结合点及关联度；明确指出本实验课程

的重点内容和难点所在；确立本实验课程所适合的教学范式；指导学生熟悉实验

室环境，认识主要设备，强调实验室安全防控风险点和应对措施，科学规范处置

实验废弃物，结合生动案例，引导学生充分认识本学科领域近现代实验技术进展

状况，详细介绍本实验课程资源库的特色及使用方法；传授有效的学习路径，明

确考核方法；激发学生的学习兴趣，树立学生的学习自信，培养学生的自学能力。

一、实验目的

1.学习植物原生质体的分离制备技术，观察原生质体形态。

二、实验原理

除去植物细胞壁的裸露细胞，称为原生质体，是开展基础研究的理想材料。

植物细胞壁主要由纤维素、半纤维素和果胶质组成，常用酶解法分离原生质体，

其原理是使用纤维素酶、半纤维素酶和果胶酶能降解细胞壁成分，除去细胞壁。

三、实验用品

1.器具：显微镜、离心机、离心管、剪刀、镜子、吸管、小培养皿、载片、盖片、

300目滤网。

2.试剂：酶混合液、洗涤液、20%蔗糖液

⑴酶混合液(9CPW):⑵洗涤液(9CPW)

1%纤维素酶pH5.6

0.5-0.7%果胶酶

27.2mg/LKH2PO4

101.0mg/LKNO3

1480.0mg/LCaCl2-2H2O

246.0mg/LMgSO4

0.16mg/LKI

0.025mg/LCuSO4

9%W/V甘露醇

500mg/LMES

pH5.6

3.材料：菠菜、韭菜叶片

四、实验方法

1、分离原生质体

①撕叶下表皮

②酶解将撕去下表皮的叶片剪成0.5mm宽小块，放在盛有5mL酶液的小培

养皿或带盖三

角瓶中，让去除下表皮的一面接触酶液，辅满一层，在25-28C下酶解60-90分钟。

可镜检有较

多原生质体后停止。

2、收集纯化

①用300目网过滤除去未完全消化的残渣。

②酶解液转移至10mL离心管中，配平，以800rpm离心5分钟以上，使原

生质体沉降。

移液管吸上清，剩下原生质体及残渣于管底。

③加入3nlicPW洗涤液，轻轻吹打均匀，相同条件下离心2-5分钟，弃上清,

以彻底去除酶液。

④加入少量CPW洗涤液，轻轻吹打均匀，用注射器向离心管底部缓缓注入

20%蔗糖约2—3mL,出现下部蔗糖液，上部原生质体悬浮液。

⑤以600rpm离心10分钟，在两液相之间出现一条绿色带，便是纯净的原生

质体，注射器针头轻轻插入离心管底部吸取碎片和蔗糖溶液，再吸去上清。

3、制备效果检测

（1）血球计数板计数

（2）原生质体活力测定

形态识别（完整、饱满、颜色鲜艳）

中性红染色（液泡变红）

台盼蓝染色（不能显色）

观察10个视野计算：

存活率=（活性原生质体/原生质体总数）X100%

3.课后巩固与拓展

明确课后需要巩固复习、拓展学习的实验技能，列出对应的资料来源，如期

刊及文章名称，著作的章节页码，网络资源的获取路径等，并确定课后学习、训

练效果的反馈与考核办法。明确下次实验前需要前置预习的相关内容和关键知识

点，列出对应的学习资源。

出现实验操作或结果不达标时，要有原因分析和重做实验的措施。

1.按镜下观察绘制2-3个原生质体。

2.计算原生质体浓度和存活率。

4.实验考核与评价

围绕课内教与学、课外导与做等环节，建立本实验考核细则，明确本实验评

价权重及各技能点所占分值，落实过程性评价各项措施。

（对实验过程中积极参与小组与团队合作，服务学生开展实验，在实验准备、

实验结束后清场等表现突出者，有奖励激励措施。）

考核方式与权重比例列表

考核方式评价权重备注

实验态度与出勤20%

选题报告30%

实验记录与实验50%

报告

合计

第17-18学时

实验七细胞内碱性蛋白和总体蛋白的原位显示

1.课前准备(针对任课教师备课提出基本要求)

(1)加强课程的网络资源库建设；

(2)熟悉课程的讲授内容和方式

(3)整理好课程教学中用到的实验耗材、药品及仪器等；

(4)做好准备实验及预实验，及时调整实验试剂及实验数据；提前检查

实验室水电安全，防火防盗工作，避免出现实验室安全事故。

1.1课外学习评价：针对上次实验要求巩固、拓展的知识及技能，依据实际

情况收集整理相关信息，以便下次课上及时开展互动和反馈。对于要求课前准备

的内容主要以课堂测试的方式检查预习效果。