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文档简介
34Technicalregulationsforvirus-eliminatedtissuecultureseedlingpropagationofpomegranateI安徽省红玛瑙石榴科技有限公司、安徽省质量和1石榴脱毒苗木繁育技术规程GB/T8321(所有部分)农药合石榴组培tissuecultureofpomegra4环境要求24.1准备室用于药品和培养基配置、器具洗涤及灭菌等,面积≥15m2,温度为20℃~28℃。4.2缓冲室用于室外与接种室或培养室的隔离缓冲区间,应具备换衣区、风淋区,面积≥24.3接种室月进行1次甲醛熏蒸消杀灭菌处理;室内温度21℃~26℃,相对湿度50%~70%。4.4培养室用于组培苗的培养,面积≤50m2,方便隔离和消杀;培养室要求严格无菌,应具备培养架,室内消杀灭菌处理;培养室环境相对湿度70%~8Lux;暗培养8h,22℃~26℃。4.5炼苗室应具有自动喷雾或加湿设施,温度22℃~28℃、相对湿度50%~70%、光照1000Lu4.6移栽温室应具有遮光设施,遮阳率25%~50%、温度15℃~25℃、相对湿度50%~70%、自然光照,光照过5组培技术5.1技术路线组培技术路线:外植体选取→茎尖接种→扩繁培养→生根培养→病毒检测→炼苗5.2组培流程5.2.1外植体选取5.2.2培养基配置35.2.3接种5.2.4扩繁用组培苗作为外植体,切去增生愈伤后,接种于扩繁培养基中,培养25d5.2.5生根剪取扩繁苗1.0cm~1.5cm的不定芽茎段作为外植体,接种于生根培养基中,插入深度0.25cm~5.2.6炼苗5.2.7移栽——石榴花叶病毒(PoMv,Pomegranatemosaicvirus);——李坏死环斑病毒石榴花叶株系(PNRSV,Prunusnecroticringspotvirus,pomegranate4采用随机取样法,抽取移栽苗木进行病毒检测。以1千株为基数(<1千株的,以1千株计算),1推荐使用反转录——聚合酶链式反应检测法(RT-PCCTGTACCACACTGAAAATATATGTTCTTGATAACATATTTTCAGTGTCC移栽苗木检测,其带有检测对象的病毒株允7.3.1合格苗木以综合控制条件、根幅、地径和苗高确定,达不到要求的为不合格苗木,合格
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