四川省成都市龙泉中学2025届高考考前模拟生物试题含解析

四川省成都市龙泉中学2025届高考考前模拟生物试题请考生注意：1．请用2B铅笔将选择题答案涂填在答题纸相应位置上，请用0．5毫米及以上黑色字迹的钢笔或签字笔将主观题的答案写在答题纸相应的答题区内。写在试题卷、草稿纸上均无效。2．答题前，认真阅读答题纸上的《注意事项》，按规定答题。一、选择题(本大题共7小题,每小题6分,共42分。)1．甲图表示反应物浓度对酶促反应速率的影响；乙图表示将A、B两种物质混合，再在T1时加入某种酶后，A、B两种物质的浓度变化曲线。实验均在最适温度和最适pH条件下完成，下列叙述错误的是（）A．甲图中反应速率达到最大后，限制酶促反应速率的主要因素是酶的数量B．若乙图中的物质A是淀粉，则B可以是麦芽糖，该酶可以是唾液淀粉酶C．乙图中T2时刻后限制酶促反应速率的主要因素是酶的活性D．甲、乙两图所示的实验中，温度和pH都属于无关变量2．下列与实验有关的叙述，正确的是（）A．用吡罗红甲基绿染色剂作用于洋葱鳞片叶内表皮细胞，将DNA和RNA分别染成红色、绿色B．利用葡萄糖溶液培养酵母菌可探究细胞呼吸的方式C．制作根尖细胞有丝分裂装片时用HCl和酒精混合液漂洗根尖D．通过比较自来水和生物材料在加入酸或碱后pH的变化，推测生物体维持pH稳定的机制3．下列关于胰岛素合成与分泌过程的叙述中，正确的是（）A．mRNA进入细胞质的方式与胰岛素分泌的方式相同B．囊泡从高尔基体向细胞膜移动是主动运输过程C．向胰岛B细胞中注入3H标记的亮氨酸，放射性首先出现在高尔基体D．胰岛B细胞的内质网与高尔基体膜成分基本相但成分基本相同4．如图是某实验小组用A酶和B酶进行实验后绘制的曲线图。下列相关叙述正确的是（）A．该实验的自变量是温度，因变量是酶活性B．酶活性可用底物的剩余量或产物的生成量来表示C．使酶活性最大时的温度下，酶促反应的速率也刚达到最大D．酶的形成都要经过核糖体的合成、内质网和高尔基体的加工等几个阶段5．发热是生物体应对感染和损伤的防御机制，可以有效地激活免疫系统来清除病原体，从而维持机体稳态。研究表明当机体高热（38.5℃及以上）达到6小时，就可以有效诱导热休克蛋白90（Hsp90）表达并发挥作用，从而促进T细胞迁移到淋巴结和炎症部位。一旦Hsp90被成功诱导，即便体温回归正常水平，Hsp90的表达也可以维持大约48小时。下列相关叙述错误的是（）A．在发热持续维持38.5℃时期，人体的产热量大于散热量B．T细胞接受抗原刺激后可以增殖分化成效应T细胞和记忆细胞C．高热初期不适合立即使用退烧药，而高热6小时后再使用退烧药降温，对免疫细胞迁移的影响不大D．免疫细胞的迁移运动是机体发挥免疫防卫的关键环节，对机体维持内环境的稳态发挥重要作用6．下图表示小麦的三个纯合品系，甲、乙不抗矮黄病，丙抗矮黄病。图中Ⅰ、Ⅱ表示染色体，A为矮杆基因，B为抗矮黄病基因（B位于Ⅰ或Ⅱ染色体上）。乙品系Ⅰ染色体中黑色部分是来自偃麦草的染色体片段，与小麦的Ⅰ染色体不能正常配对。下列叙述错误的是（减数分裂中配对异常的染色体会随机分配，不影响子代的存活，不考虑基因突变）A．甲和乙杂交所得的F1，可能产生4种基因型的配子B．若丙Ⅰ染色体片段缺失，其自交后代出现不抗矮黄病植株，则基因B位于Ⅰ染色体上C．若甲与丙杂交，F1中的Ⅱ号三体与乙杂交，F2中抗矮黄病:不抗矮黄病=5∶1，则基因B位于Ⅱ染色体上D．若基因型为AaBb的品系自交后代性状分离比为9∶3∶3∶1，则B基因一定位于Ⅰ染色体上7．下列关于真核细胞中核酸的叙述，正确的是（）A．细胞中的核酸包括脱氧核苷酸和核糖核苷酸两大类B．姐妹染色单体上具有1个亲代和1个子代DNA分子C．翻译时转运RNA分子的磷酸基团端与相应的氨基酸结合D．半保留复制合成的子代DNA保留了亲代的全部遗传信息8．（10分）胃内的酸性环境是通过质子泵维持的，质子泵催化1分子的ATP水解所释放的能量，可驱动1个H+从胃壁细胞进入胃腔和1个K+从胃腔进入胃壁细胞，K+又可经通道蛋白顺浓度进入胃腔。下列相关叙述错误的是A．甘氨酸可能是组成质子泵的单体之一B．胃内酸碱度是机体内环境的理化性质之一C．H+从胃壁细胞进入胃腔需要载体蛋白的协助D．K+由胃壁细胞进入胃腔不需要质子泵的作用二、非选择题9．（10分）紫茎泽兰为多年生草本植物，是一种繁殖能力很强的恶性入侵有毒杂草。科研人员采用样方法调查紫茎泽兰和本地植物的种群密度，以确定群落类型，再分别选取不同群落类型的样地各5个，调查地表昆虫种类，取平均值，结果如下表：群落类型种未入侵111轻度入侵85重度入侵100（1）根据以上数据分析，紫茎泽兰入侵初始会导致____________________。从种间关系的角度分析，造成这种现象可能的原因是_________________。（2）紫茎泽兰入侵后的发展变化过程______________（填“属于”或“不属于”）群落的演替，理由是______。（3）随着入侵程度加重，本地昆虫开始从行为、生理生化等方面适应紫茎泽兰，紫茎泽兰的天敌种类有逐渐增加的趋势，二者之间在相互影响中不断发展，这一过程称为_________。10．（14分）回答下列（一）、（二）小题：（一）糯稻：禾本科一年生植物，是稻的粘性变种，营养价值较高，是优良的粮食作物，还可加工成米酒、米醋等产品，具有广阔的开发前景。请据图回答：（1）糯稻秸秆中的纤维素需要被分解才能得到更多副产品。因此在①过程中，需要筛选出优质纤维素分解菌。将纤维素分解菌菌种进行稀释，用________________（工具）接种在________________并添加刚果红（能将纤维素染成红色复合物）的固体培养基上，挑选若干个________________的单菌落，再利用液体培养基进行________________。（2）与酿制果酒相比，在②中利用糯米酿酒，需增加________________的过程，这一过程是由酒曲中的黑根霉或________________中的淀粉酶完成的。（3）欲进一步进行③过程酿醋，在原有培养条件下接种醋化醋杆菌，再持续通入无菌空气进一步发酵，但几乎未能得到果醋，原因最可能是________________。若将醋化醋杆菌进行________________处理，则可实现其与发酵产物的分离。（二）运用现代工程技术手段对奶牛品种进行改造，可以从奶牛中提取人类临床所需的大量血清白蛋白。请根据以下流程图回答问题：（1）过程①中奶牛组织经________________处理获得分散的单个细胞悬浮液。若将其接种到细胞培养瓶中，形成________________并增大以后进行传代培养，得到的细胞系具有________________性。（2）将重组质粒导入受体细胞的过程②称为________________。构建重组质粒时，为了避免质粒和人血清蛋白基因自身环化，需使用________________种限制性核酸内切酶对相应DNA分子进行切割。（3）过程③需要借助精密的________________和高效率的细胞融合法。为获取更多的卵母细胞，要对供体注射促性腺激素，使其________________。（4）下列关于过程④和⑤的叙述，错误的是________________。A．过程④需要配置一系列含有不同成分的培养液B．过程⑤前不需要鉴定重组胚胎的性别C．分割后的重组胚胎还需过程④和⑤才能获得转基因奶牛D．最终培养得到转基因奶牛体现了动物体细胞核的全能性11．（14分）斑马鱼的HuC基因在早期胚胎神经细胞中选择性表达，研究人员构建了HuC基因的表达载体，并导入到斑马鱼细胞中研究其作用，请回答：（1）为获取HuC基因，研究人员从早期胚胎神经细胞中提取HuC基因的mRNA，通过_________获得大量的DNA，进而构建出HuC基因的______________。（2）DraⅢ，SnaBⅠ等是质粒上不同限制酶的切割位点。为获得HuC基因——绿色荧光蛋白基因的表达载体，需要对HuC基因和质粒选用图中的____________酶进行切割，这样做的原因是_________。不选择NotⅠ酶切割的原因是_____________。（3）用Ca2+处理大肠杆菌，大肠杆菌细胞即能够______________。实验过程中可以采用在荧光显微镜下观察________________________或者在培养基中添加______________，筛选出导入表达载体的大肠杆菌。12．对下列生物学实验的结果和过程进行预测、分析与判断。（1）甲同学用标志重捕法调查某湖泊鲫鱼种群密度，若调查期间有些个体身上的标志丢失，则该种群密度的估测数值会___________。当鲫鱼被大量捕捞后，其K值将__________。（2）乙同学针对血糖调节进行了如下研究：①在验证胰岛素具有降低血糖浓度作用的实验中，以小鼠的活动状况为观察指标，注射胰岛素溶液和葡萄糖溶液的顺序应是__________________。②人体血液中胰岛素与胰高血糖素的摩尔比值，在不同生理状况下是不同的。当机体处于低血糖状况时，该比值明显______（填“上升”或“下降”），此时机体物质代谢的变化是________（答出2点即可）。（3）丙同学对小鼠生长发育过程中的激素调节进行了以下研究：（本题中对激素的浓度和剂量不作要求）①探究甲状腺激素对小鼠生长发育影响的实验时，需将小鼠均分甲、乙组，甲组每天注射甲状腺激素，乙组每天注射___________作为对照。②若要进一步探究甲状腺激素和生长激素对小鼠生长发育是否具有协同作用，则在上述实验基础上，还需补充两组实验：丙组每天注射生长激素，丁组每天注射_________。（4）丁同学以某种实验小鼠为材料制备某种血清抗体。①欲获得某一种较高浓度的抗体，实验的关键是需对小鼠进行__________________处理，请从免疫机理的角度，解释其原因是____________________________________。②预测实验结果（以坐标曲线图形式表示实验结果）：___________________

参考答案一、选择题(本大题共7小题,每小题6分,共42分。)1、C【解析】

影响酶促反应速率的因素有：温度、pH、酶浓度、底物浓度等。甲图中，反应速率随反应物浓度增加而增加，当反应速率达到一定值时，此时再增加反应物浓度，反应速率不再增加，是因为起催化作用的酶已经饱和。乙图中，随着反应进行，浓度不断增加的是生成物即B，浓度不断减少的是反应物即A，T1时刻反应开始，T2时刻反应速度变缓，A反应物的含量趋于0，直到最后生成物和反应物的浓度不再变化，此时限制酶促反应的因素为底物浓度。【详解】A、甲图中反应速率达到最大后，此时再增加反应物浓度，反应速率不再增加，限制酶促反应速率的主要因素是酶的数量，A正确；B、若乙图中的物质A是淀粉，则B可以是麦芽糖，该图表示的反应为A（淀粉）B（麦芽糖），该酶可以是唾液淀粉酶，B正确；C、乙图中T2时刻后限制酶促反应速率的主要因素是底物浓度，C错误；D、甲、乙两图所示的实验探究均在最适温度和最适pH条件下完成，温度和pH都属于无关变量，D正确。故选C。本题以曲线图为载体，考查了影响酶促反应因素的知识，要求考生具有一定的曲线分析能力和理解判断能力。2、B【解析】

部分观察类实验的试剂及现象：观察内容检验试剂现象淀粉样品碘液淀粉遇碘液变蓝色脂肪样品苏丹III和苏丹IV脂肪变为橘黄色或红色还原糖样品斐林试剂产生砖红色沉淀蛋白质样品双缩脲试剂样品变为紫色DNA与RNA甲基绿和吡罗红混合试剂DNA变为绿色；RNA变为红色观察线粒体健那绿染液线粒体变为蓝绿色CO2的检测澄清石灰水或溴麝香草酚蓝水溶液澄清石灰水变浑浊或溴麝香草酚蓝溶液由蓝变绿再变黄酒精的检测酸性重铬酸钾溶液酸性重铬酸钾变为灰绿色染色体的观察碱性染料：龙胆紫，醋酸洋红，改良的苯酚品红溶液染色体被碱性染料染成深色【详解】A、用植物细胞代替人口腔上皮细胞观察DNA与RNA，甲基绿将DNA染成绿色、吡罗红染色剂将RNA染成红色，A错误；B、利用葡萄糖溶液培养酵母菌可探究细胞呼吸的方式，B正确；C、制作根尖细胞有丝分裂装片时用HCL和酒精混合液解离根尖，漂洗应选用蒸馏水，C错误；D、生物机体维持pH稳定是多方因素影响，通过比较自来水和生物材料在加入酸或碱后pH的变化，不能直接推断生物体维持pH稳定的机制，D错误。故选B。本题重点考察教材中的实验的选材和实验现象，属于基础知识记忆和运用层次的考察。选择材料和方法时应注意对实验的结果和现象的影响。3、D【解析】

分泌蛋白是在细胞内合成后，分泌到细胞外起作用的蛋白质，分泌蛋白的合成、加工和运输过程：最初是在内质网上的核糖体中由氨基酸形成肽链，肽链进入内质网进行加工，形成有一定空间结构的蛋白质由囊泡包裹着到达高尔基体，高尔基体对其进行进一步加工，然后形成囊泡经细胞膜分泌到细胞外，该过程消耗的能量由线粒体提供。【详解】A、胰岛素属于分泌蛋白，胰岛素合成过程中细胞核中mRNA进入细胞质是通过核孔复合体的主动运输，是一个信号识别与载体介导的过程，而胰岛素分泌的方式是胞吐，A错误；B、囊泡从高尔基体向细胞膜移动是借助细胞骨架进行运输的，不是主动运输过程，B错误；C、向胰岛B细胞中注入3H标记的亮氨酸，放射性首先出现在核糖体，C错误；D、胰岛素的分泌过程在一定程度上说明细胞内各细胞器在结构上是紧密联系的，如高尔基体膜与内质网膜可通过具膜小泡间接联系，内质网与高尔基体膜都是生物膜系统的结构，所以二者成分基本相同，D正确。故选D。本题考查细胞结构和功能的知识，考生识记细胞结构和功能，明确分泌蛋白的合成和分泌过程是解题的关键。4、B【解析】

由图可知，自变量为不同的温度和不同的酶，因变量是酶活性。两种酶的最适温度大概为50度左右。高温、强酸、强碱、重金属盐均会导致酶不可逆的变性失活，低温只抑制酶的活性，不破坏其空间结构。【详解】A、该实验的自变量是温度和酶的种类，因变量是酶活性，A错误；B、酶活性可用底物的剩余量或产物的生成量来表示，B正确；C、使酶活性最大时的温度下，酶的活性最高，但酶促反应的速率除了与酶活性有关外，还与底物浓度、酶浓度等条件有关，即使酶活性最大时的温度下，酶促反应的速率不一定达到最大，C错误；D、分泌到细胞外的酶的形成都要经过核糖体的合成、内质网和高尔基体的加工等几个阶段，且有些酶为RNA，合成在细胞核，D错误。故选B。5、A【解析】

1、免疫系统的功能：防卫、监控和清除。2、体温调节的神经中枢位于下丘脑。3、内环境稳态的调节机制：神经一体液一免疫调节。【详解】A、在发热持续维持38.5℃时期，人体的产热量等于散热量，A错误；B、T细胞接受抗原刺激后可以增殖分化成效应T细胞和记忆细胞，B正确；C、由题意知：当机体温度达到高热（38.5℃）及以上水平时，就可以有效诱导热休克蛋白90（Hsp90）表达并发挥作用，从而促进T细胞迁移到淋巴结和炎症部位，一旦Hsp90被成功诱导，即便体温回归正常水平，Hsp90的表达也可以维持大约48小时，因此高热6小时后再使用退烧药降温，对免疫细胞迁移的影响不大，C正确；D、由题意知：当机体温度达到高热（38.5℃）及以上水平时，热刺激会促使免疫细胞中的热休克蛋白90表达并转移到细胞膜上，从而促进T细胞迁移到淋巴结和炎症部位，对机体维持内环境的稳态发挥重要作用，D正确。故选A。6、D【解析】

基因自由组合定律的实质：（1）位于非同源染色体上的非等位基因的分离或组合是互不干扰的；（2）在减数分裂过程中，同源染色体上的等位基因彼此分离的同时，非同源染色体上的非等位基因自由组合。【详解】A、甲和乙杂交所得的F1减数分裂时，来自甲、乙的Ⅰ染色体不能正常配对，随机移向细胞的一极，可能产生4种基因型的配子，A正确；B、若丙Ⅰ染色体片段缺失，其自交后代出现不抗矮黄病植株，说明缺失片段包含B基因，即基因B位于Ⅰ染色体上，B正确；C、若基因B位于Ⅱ染色体上，甲与丙杂交，F1中的Ⅱ号三体BBb可产生B、BB、Bb、b四种配子，且比例为2∶1∶2∶1，与乙bb杂交，F2中抗矮黄病∶不抗矮黄病=5∶1，C正确；D、基因型为AaBb的品系自交后代性状分离比为9∶3∶3∶1，则B基因一定位于Ⅱ染色体上，D错误。故选C。解答本题的关键是：（1）明确甲和乙杂交所得的F1减数分裂时，来自甲、乙的Ⅰ染色体不能正常配对，随机移向细胞的一极，因此可能产生4种基因型的配子。（2）明确甲、乙、丙均为纯合品系，若基因B位于Ⅱ染色体上，则丙的基因型为BBB，甲与丙杂交，F1中的Ⅱ号三体应为BBb，减数分裂时，两条Ⅱ号染色体配对，不配对的Ⅱ号染色体随机移向细胞的一极，可产生B、BB、Bb、b四种配子，且比例为2∶1∶2∶1。7、D【解析】

1、核酸的基本单位是核苷酸；2、DNA分子为半保留复制；新和成的DNA分子，含有原来DNA分子的一条链和一条新合成的链。DNA复制时间：有丝分裂和减数分裂间期DNA复制条件：模板（DNA的双链）、能量（ATP水解提供）、酶（解旋酶和连结酶等）、原料（游离的脱氧核苷酸）DNA复制过程：边解旋边复制。DNA复制特点：半保留复制。DNA复制结果：一条DNA复制出两条DNA。DNA复制意义：通过复制，使亲代的遗传信息传递给子代，使前后代保持一定的连续性。【详解】A、核苷酸是核酸的基本单位，细胞中的核酸包括脱氧核糖核酸（DNA）和核糖核酸（RNA）两大类，A错误；B、DNA分子为半保留复制，每条姐妹染色单体含有的双链DNA分子都含有亲代DNA分子的一条链和一条新合成的链，B错误；C、翻译时转运RNA分子的核糖的3'端（羟基端）与相应的氨基酸结合，C错误；D、半保留复制合成的子代DNA和亲代DNA碱基序列一致，保留了亲代的全部遗传信息，D正确。故选D。8、B【解析】

质子泵起到催化的作用，其化学本质可能是蛋白质，因此甘氨酸可能是组成质子泵的单体之一，A项正确；胃是消化道，不属于内环境，B项错误；H+从胃壁细胞进入胃腔需要消耗ATP，所以其方式是主动运输，需要载体蛋白的协助，C项正确；K+可经通道蛋白顺浓度进入胃腔，不需要质子泵的作用，D项正确。本题属于新情景下的信息题，认真审题、从题干中获取有用的信息是解题的关键。由胃腔内的酸性环境可推知氢离子在细胞外的浓度高于细胞内，钾离子浓度在细胞内高于细胞外（已具备的知识），然后结合题意分析，“质子泵催化1分子的ATP水解所释放的能量，可驱动1个H+从胃壁细胞进入胃腔和1个K+从胃腔进入胃壁细胞”，说明质子泵参与的离子跨膜运输过程需要消耗ATP分子，故质子泵运输离子的过程是主动运输。二、非选择题9、昆虫的种类减少紫茎泽兰与本地植物竞争，使本地植物种类改变，进而使昆虫的多样性降低属于它是随时间推移一个群落被另一个群落代替的过程共同进化【解析】

本题考查群落的演替，种间关系的相关知识。【详解】（1）分析题表可知：根据紫茎泽兰未入侵区土壤和重入侵区的土壤微生物的变化，说明紫茎泽兰入侵初始会导致昆虫的种类减少。紫茎泽兰与本地植物竞争，使本地植物种类改变，进而使昆虫的多样性降低。（2）紫茎泽兰入侵后的发展变化过程属于群落的演替，因为紫茎泽兰入侵后原来地区的优势物种被别的物种所取代。（3）随着入侵程度加重，本地昆虫开始从行为、生理生化等方面适应紫茎泽兰，紫茎泽兰的天敌种类有逐渐增加的趋势，二者之间在相互影响中不断发展，这一过程称为共同进化。群落演替的概念、特点和标志：

1、概念：在生物群落发展变化的过程中，一个群落代替另一个群落的演变现象．

2、特点：群落的演替长期变化累积的体现，群落的演替是有规律的或有序的．

3、标志：在物种组成上发生了（质的）变化；或者一定区域内一个群落被另一个群落逐步替代的过程．10、玻璃刮刀/涂布器以纤维素为唯一碳源透明圈直径与菌落直径比值大扩大培养（扩增）将淀粉水解成糖曲霉温度不适宜固定化胰蛋白酶/胰酶生长晕异质转化2显微操作仪超数排卵C【解析】

1.刚果红染液遇纤维素呈红色，纤维素分解菌在含有刚果红染液的培养基中形成的菌落会出现透明圈，可以用来鉴别纤维素分解菌。2.果醋制作的菌种是醋酸菌，代谢类型是需氧型细菌，属于原核细胞，条件是30~35℃、一直需氧。3.动物细胞培养时，需用胰蛋白酶将动物组织块分散成单个细胞。4.要得到更多的卵（母）细胞需用促性腺激素对母畜进行超数排卵处理。5.核移植过程，成熟卵（母）细胞在核移植前需要进行去核处理，以保证克隆后代的遗传性状主要来自于供体核。6.分析图（二）：①为分散动物细胞、②目的基因的导入、③为核移植、④早期胚胎培养、⑤为胚胎移植。【详解】（一）（1）将纤维素分解菌菌种进行稀释，采用涂布分离法，用涂布器（或玻璃刮刀）涂布在以纤维素为唯一碳源（起到选择作用）的固体培养基上，只有能利用纤维素的纤维素分解菌才能生存下来。添加刚果红（能将纤维素染成红色复合物）能起到鉴别的作用，透明圈直径与菌落直径比值大的菌落说明纤维素分解菌分解纤维素的能力强，利用液体培养基可以进行扩大培养。（2）与酿制果酒相比，在②中利用糯米酿酒，糯米中主要是淀粉，故需增加将淀粉水解成糖的过程，这一过程是由酒曲中的黑根霉或曲霉中的淀粉酶完成的。（3）果酒发酵温度为18-25℃，果醋发酵温度为30-35℃，除了考虑氧气，还要注意温度的改变。若将醋酸杆菌进行固定化处理，则可实现其与发酵产物的分离。（二）（1）胰蛋白酶处理可以获得分散的单个细胞悬浮液。若将其接种到细胞培养瓶中，形成生长晕并增大以后进行传代培养，得到的细胞系未经克隆培养，故具有异质性。（2）将重组质粒导入受体细胞的过程称为转化。构建重组质粒时，为了避免质粒和人血清蛋白基因自身环化，需使用2种限制性核酸内切酶对相应的DNA分子进行切割。（3）过程③需要借助精密的显微操作仪和高效率的细胞融合法。为获取更多的卵母细胞，要对供体注射促性腺激素，使其超数排卵。（4）胚胎不同发育时期生理代谢的需求不同，需要配置一系列含有不同成分的培养液，A正确；从哪种性别奶牛组织提取的细胞，发育成胚胎就是对应的性别，不需要鉴定重组胚胎的性别以便获得母牛，B正确；分割后的胚胎可以直接移植给受体，C错误；核移植得到的重组细胞能够发育成完整个体，说明动物体细胞核具有全能性，D正确。故选C。本题考查了微生物的分离与培养以及果酒和果醋的制作，要求考生识记参与果酒和果醋制作的微生物及其代谢类型，掌握果酒和果醋制作的原理和过程。本题还结合转基因奶牛培育过程图，考查基因工程、细胞工程和胚胎工程的相关知识，要求考生识记所列知识要点，能准确判断图中各过程的名称，并能在较简单的情境中使用，属于考纲识记层次的考查。11、逆转录和PCR技术扩增cDNA文库EcoRⅠ酶和BamHⅠ可以防止目的基因和质粒自身环化以及目的基因与质粒反向连接破坏标记基因无法筛选（且没有启动子）吸收周围环境中的DNA分子表达的绿色荧光蛋白菌落卡那霉素【解析】

基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因—DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA—分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质—抗原-抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。【详解】（1）从早期胚胎神经细胞中提取HuC基因的mRNA，通过逆转录过程合成目的基因，并通过PCR技术在体外扩增可获得大量的目的基因，进而构建出HuC基因的cDNA文库。（2）构建基因表达载体时，不能破坏运载体上的启动子、复制原点，以及运载体上需要保留标记基因，为了防止目的基因和质粒自身环化以及目的基因与质粒反向连接，常用不同的限制酶切割质粒和目的基因，结合图示中各种限制酶的酶切位点可知，为获得HuC基因——绿色荧光蛋白基因的表达载体，需要对HuC基因和质粒选用图中的EcoRⅠ酶和BamHⅠ酶进行切割。卡那霉素抗性基因为标记基因，若用NotⅠ酶切割，将会导致卡那霉素抗性基因被破坏，且切割后的质粒会失去启动子，使基因表达载体中缺少标记基因无法选择，且没有启动子无法转录，所以不选择NotⅠ酶切割质粒。（3）用Ca2+处