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34DB34/T3987—2021禽白血病病毒细胞培养分离检测技术规程Technicalregulationsforcellculture,isolationanddetectionofavianleukemiavirus2021-09-03发布2021-10-03实施安徽省市场监督管理局发布I1NY/T680禽白血病病毒P27抗原酶联免疫吸附4.1.1血液的采集2采集的鸡抗凝血样品应保存在4℃环境下,采集的鸡血液样品应尽快处理并接种DF-1细胞,保存4.2.1公鸡精液的采集取生长状态良好的DF-1细胞,常规传代消化,调整细胞密度为1×105个细胞/m中,吸取100μL血浆接种到DF-1细胞培养孔中,另设阴阳性对照孔,样品孔做好标记3将接种样品后的细胞板放入细胞培养箱继续孵育3h后,弃去细胞培养孔中液体,用200μL灭应尽可能延长细胞维持培养的时间,以利于ALV在细胞上的增殖。在24孔培养板靠边的样品孔中多8.1酶联免疫吸附试验(ELISA)方4A.3磷酸盐缓冲液(PBS,0.01mol5

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