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文档简介
基因工程整合—转基因动物
情境:人血清白蛋白(HSA)在临床上需求量很大,通常从人血液中提取,但提取量有
限,因此科学家利用基因工程和胚胎工程等技术培育转HSA基因牛,该种牛能生产含HSA
的牛乳。
任务:根据你所学知识,用铅笔构建一个培育HSA流程(开阔思路,可以构建多条路径)
(-)获取目的基因并构建重组DNA分子
1.如何保证该基因只在乳腺细胞内表达?
(-)将重组DNA分子导入受体细胞(法)
①受体细胞是()——()
1.如何获得精子和卵细胞?
2.获得的精子和卵细胞能否直接受精?
②受体细胞是()——()
1.胚胎干细胞是囊胚期部位的细胞,是一种未的细胞,具有和
2.胚胎干细胞培养时,需要在培养皿底部制备一层细胞,怎么来,作用是什么?
3.胚胎取出后放在培养液中继续培养,直到,然后用
消化,或者内细胞团,再把它用消化成单个胚胎干细胞,
再置于含有新鲜培养液和的培养皿中培养。
③受体细胞是()——()
1.体细胞核移植时,再取核前,体细胞需要先进行什么操作,有何目的?
2.核移植的方法有哪些?
3.核移植后构成重组细胞,想要发育成胚胎前,得先进行什么操作?
4.上述三者,哪种需要进行性别鉴定,如何鉴定?
(三)胚胎体外培养
1.培养到什么时候进行进行胚胎移植?
2.为什么要进行胚胎移植?
3.胚胎体外培养时对培养液有何要求?
4.如何获得更多的胚胎?
(四)胚胎移植
1.代孕母畜有何要求,移植到什么部位?
2.同期发情(?)的目的是什么?
3.什么时候移植到输卵管,什么时候移植到子宫角?
4.胚胎移植到受体时是否会被免疫排斥?
(五)分娩,发育,鉴定
1.如何鉴定乳汁中是否含有该蛋白?
2.如何制取抗体作为探针?
(六)单克隆抗体制备技术
①细胞融合
1.为何要注射特定抗原?
2.从哪里获得B淋巴细胞?
3.用什么方法融合?
4.有哪些融合的可能性?
②杂交瘤细胞的筛选
5.能够存活下来的细胞就是能够分泌需要的
特异性抗体的细胞了么?
6.如何筛选出哪个孔含有我们想要的细胞?
③筛选特定的杂交瘤细胞
7.专一性抗体检验阳性的孔里有没有
可能含有其他类型的细胞?
8.如何进一步筛选?
④单克隆抗体制备
体内:再克降阳性细胞
体外:
BBH合
小★畀:
•融合
B1上海巴修麻咏、且蛆_合成DNA
传融合*««««B垃逞------合成DNA
2DM径鱼被一#化合,(氧基夙断
3B恭已,也不住长期存活
B淋巴编思
将各种细胞培养在含有氨基喋吟的选择培养基(H
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