边境口岸鼠疫检测实验室建设规范第2部分：鼠疫快速筛查实验室

1边境口岸鼠疫检测实验室建设规范第2部分：鼠疫快速筛查实验室本文件规定了边境口岸鼠疫快速筛查实验室建设规范总体要求。本文件适用于边境口岸鼠疫快速筛查实验室建设的要点和管理要求。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB53046生物安全实验室建筑技术规范GB19489实验室生物安全通用要求WS233病原微生物实验室生物安全通用准则SN/T国境口岸传染病快速检测技术规范WS279鼠疫诊断标准3人员要求3.1检测人员3.1.1数量要求鼠疫快速筛查实验室必须配置与出入境口岸人员以及来自疫区国家风险评估程度、口岸的复杂性相适应的专业人员（特指医学相关专业背景人员或经培训考核合格人员每班次至少有1名为专业人员。3.1.2资格要求满足海关总署对相关岗位的资格要求。从事快速检测的人员须具备相关医学检验或生物学技术或公共卫生专业背景；或者经过相关专业培训、并取得上岗证的人员。3.1.3培训要求必须保证检测人员接受岗前培训，通过资格考核；保证在岗专业人员每年至少参加两次以上专业学习、培训或演练。3.1.4备案要求从事快速检测的人员应在卫生检疫主管部门和口岸监管主管部门备案。3.1.5技术能力熟悉鼠疫风险的处置程序，具备实施前期处置的能力；掌握快速检测设备操作规程；熟练掌握快速检测的基本操作技能。23.1.6个人防护能力掌握个人防护用品种类及要求；掌握生物安全一、二、三级防护水平分级及适用情况；掌握防护用品的穿脱程序。防护方法和装备参照海关总署卫生检疫司编《卫生检疫标准作业指引》（2019版)《第二十一节进出境人员卫生检疫个人防护作业指引》。3.2管理保障人员3.2.1总体要求鼠疫快速筛查实验室配置至少一名管理保障人员；能够保障实验室设施、设备持续正常运转；试剂、消毒剂及相关耗材符合专业要求并满足供应；能够进行仪器设备检定校准、日常维护等。为了防止进入污染区的工作人员发生暴露，经过培训的管理保障人员需在穿脱防护用品等生物安全操作过程中给予监督、指导及帮助；管理保障人员需充分知晓如何穿脱防护用品的程序，能够处理发生暴露后的相关事件。3.2.2资格要求管理保障人员需由具备医学背景专业人员、或经过相关专业培训取得上岗资格证书的人员担任，并定期考核换证。3.2.3培训要求管理保障人员需接受岗前培训，资格考核后获取上岗证书；在岗专业人员每年至少参加两次以上专业学习、培训或演练，并在上级卫生检疫主管部门和口岸监管主管部门备案。3.2.4技术能力应做到“三知四会”：知鼠疫相关知识，知鼠疫疫情风险，知业务要求，会选择防护用品，会穿脱，会污染控制，会应急处置。熟悉鼠疫风险的处置程序，具备实施前期处置的能力；掌握快速检测设备操作规程；熟练掌握快速检测的基本操作技能。3.2.5个人防护能力掌握个人防护用品种类及要求；掌握生物安全一、二、三级防护水平分级及适用情况；掌握防护用品的穿脱程序。3.3考核要求3.3.1生物安全考核操作人员需熟练掌握生物安全相关知识；熟悉生物安全标准操作流程；熟练掌握消毒原则和技术；掌握意外事件和生物安全事故的应急处置原则和上报程序。3.3.2操作培训考核操作人员能够熟练掌握现场配备的各种快速检测方法，每年进行至少一次现场采样与检测、医疗废弃物处置、终末消毒的全流程操作考核。4场所、设备、试剂要求4.1场所要求鼠疫快速检测要求在具备二级生物安全条件下进行。4.2设备要求34.2.1仪器设备类型生物安全柜（II级）、高压灭菌器、医用冷藏冷冻箱、高速冷冻离心机、UPT上转发光免疫分析仪、便携式荧光定量PCR仪、其他快速检测设备（依条件配备）、辅助设备配备：各量程微量移液器、小型水浴器或干浴器、瞬时离心机等。4.2.2仪器设备总体要求设备配备以便携、操作过程样品暴露少、不开或少开盖儿，减少气溶胶产生为原则。其中，生物安全柜要有年检合格证；高压灭菌器要有高压指示条或生物指示剂，且年度计量合格。进出境人员采样设备见海关总署卫生检疫司编《卫生检疫标准作业指引》（2019版）《第九节进出境人员生物样本采集、送检作业指引》附件3《各类采样操作所需采样物品》。4.3试剂要求试剂种类：鼠疫菌F1抗原胶体金、鼠疫菌F1抗体胶体金、上转发光法抗原、抗体检测试剂、鼠疫菌核酸快速试剂。4.4检测方法4.4.1快速胶体金检测4.4.1.1总体要求具有鼠疫菌F1抗原检测法试剂，补充配备F1抗体检测法试剂，并做好相应检测记录。4.4.1.2操作方法从冰箱中取出胶体金检测卡平衡至室温，样品处理、检测步骤依照所选用的产品说明书进行操作。4.4.2UPT上转荧光法检测4.4.2.1总体要求具有鼠疫菌上转发光法抗原、抗体检测试剂，并做好相应检测记录。4.4.2.2操作方法开机仪器自检，设置样本ID进行测量,待试剂卡托架出仓后插入试剂卡，测量结束可读取检测结果并按需打印。4.4.3其他检测方法（包括但不限于快速核酸等检测方法）4.4.3.1总体要求操作方法简便易行，结果准确且容易判读，并做好检测记录。常见检测方法有间接血凝试验（IHA)测定鼠疫F1抗体、反相血凝试验（RIHA）测定鼠疫F1抗原、酶联免疫吸附试验（ELISA)检测鼠疫抗体及抗原、快速鼠疫核酸检测等方法。4.4.3.2操作方法快速鼠疫核酸检测方法可使用便携式实时荧光定量PCR仪，按商品化核酸检测试剂盒说明书/相关检测标准规定进行荧光PCR反应试剂配制和加样，或者使用免提核酸荧光PCR检测试剂，按操作说明进行荧光定量PCR仪扩增循环参数、反应体积的设置和荧光通道的选择，设定基线和阈值，根据扩增曲线和Ct值判定检测结果。其他快速检测方法见WS279中的操作说明。45样本采集、保存、运输5.1样本采集血液：血液样本采集双份样本：无抗凝剂（红管）血液2管，5毫升/管；EDTA抗凝剂（紫管）2管，2毫升/管，用于现场检测及送样。具体操作见海关总署卫生检疫司编《卫生检疫标准作业指引》（2019版）《第九节进出境人员生物样本采集、送检作业指引》附件4《采样操作指南》。5.2样本保存血液：现场检测前于4℃冷藏保存，检测后吸出血清（血浆）于-20℃冷冻保存。5.3样本运输样本的保存和运输按照海关总署卫生检疫司编《卫生检疫标准作业指引》（2019版）《第九节进出境人员生物样本采集、送检作业指引》附件5《高致病性病原微生物相关感染性标本的包装运输》要求进行，用于核酸检测的样本一周内保存于-20℃低温冰箱，并按照要求送样。6阳性结果的处置6.1报告：迅速报告