常用pH缓冲液配置方法及注意事项

常用pH缓冲溶液的配制和pH值序号溶液名称配制方法pH值1氯化钾-盐酸13.0ml0.2mol/LHCl与25.0ml0.2mol/LKCl混合均匀后，加水稀释至100ml1.72氨基乙酸-盐酸在500ml水中溶解氨基乙酸150g，加480ml浓盐酸，再加水稀释至1L2.33一氯乙酸-氢氧化钠在200ml水中溶解2g一氯乙酸后，加40gNaOH，溶解完全后再加水稀释至1L2.84邻苯二甲酸氢钾-盐酸把25.0ml0.2mol/L的邻苯二甲酸氢钾溶液与6.0ml0.1mol/LHCl混合均匀，加水稀释至100ml3.65邻苯二甲酸氢钾-氢氧化钠把25.0ml0.2mol/L的邻苯二甲酸氢钾溶液与17.5ml0.1mol/LNaOH混合均匀，加水稀释至100ml4.86六亚甲基四胺-盐酸在200ml水中溶解六亚甲基四胺40g，加浓HCl10ml，再加水稀释至1L5.47磷酸二氢钾-氢氧化钠把25.0ml0.2mol/L的磷酸二氢钾与23.6ml0.1mol/LNaOH混合均匀，加水稀释至100ml6.88硼酸-氯化钾-氢氧化钠把25.0ml0.2mol/L的硼酸-氯化钾与4.0ml0.1mol/LNaOH混合均匀，加水稀释至100ml8.09氯化铵-氨水把0.1mol/L氯化铵与0.1mol/L氨水以2：1比例混合均匀9.110硼酸-氯化钾-氢氧化钠把25.0ml0.2mol/L的硼酸-氯化钾与43.9ml0.1mol/LNaOH混合均匀，加水稀释至100ml10.011氨基乙酸-氯化钠-氢氧化钠把49.0ml0.1mol/L氨基乙酸-氯化钠与51.0ml0.1mol/LNaOH混合均匀11.612磷酸氢二钠-氢氧化钠把50.0ml0.05mol/LNa2HPO4与26.9ml0.1mol/LNaOH混合均匀，加水稀释至100ml12.013氯化钾-氢氧化钠把25.0ml0.2mol/LKCl与66.0ml0.2mol/LNaOH混合均匀，加水稀释至100ml13.0一、常用溶液的配制（一）溶液配制注意事项1．药品要有较好的质量试剂分为优级纯（保证试剂，Guaranteedreagent，G．R．）、分析试剂（Antalyticalreagent，A．R．）化学纯（Chemicalpure，C．P．）和实验试剂（Laboratoryreagent，L．R．）等等。工业用的化学试剂，杂质较多，只在个别情况下应用，如配洗液用的硫酸、配干燥剂的氯化钙等。2．药品称量要精确。3．配制试剂用水应用新鲜的去离子水或双蒸馏水，比电阻值在50万欧姆以上，pH在5.5~7.0之间才可应用，在组织培养等特殊用途时应注意此项要求，配制一般化验用溶液只要求用双蒸馏水或去离子水。４．配好后的溶液，应立即除菌处理（如高压灭菌、抽滤或加抑菌物质），以防杂菌生长。（二）0.067（1/15）Mol/L磷酸缓冲液1．1/15Mol/L磷酸二氢钾溶液的配制：称取磷酸二氢钾（KH2PO4，A．R．）9.08g，用蒸馏水溶解后，倾入1000ml容量瓶内，再稀释至刻度（1000ml）。2．1/15Mol/L磷酸二氢钠溶液的配制：称取无水磷酸氢二钠（Na2HPO4，A.R.）9.47g（或者Na2HPO4·2H2O11.87g）用蒸馏水溶解后，放入1000ml容量瓶内，再加蒸馏水稀释至刻度（1000ml）。3．按附表的比例，配制成不同pH值的缓冲溶液。附表1磷酸盐缓冲液配制法（单位：毫升）pH1/15Mol/LNa2HPO41/15Mol/LKH2PO4pH1/15Mol/LNa2HPO41/15Mol/LKH2PO45.88.092.07.166.623.45.99.990.17.272.028.06.012.287.87.376.823.26.115.384.77.380.819.26.218.681.47.584.115.96.322.477.67.687.013.06.426.773.37.789.410.66.531.868.27.891.58.56.637.562.57.993.26.86.743.556.58.894.75.36.849.650.48.195.84.26.955.444.68.297.03.07.061.138.98.498.02.0（三）0.15Mol/LPB液附表20.15Mol/LPB液配制法pH0.15Mol/LNa2HPO4（ml）0.15Mol/LNaH2PO4（ml）6.426.573.56.637.562.56.849.051.07.061.039.07.272.028.00.1NNaH2PO45.50ml混合即可2．9份甘油与1份pH8.0磷酸缓冲液混合，即为甘油磷酸缓冲液。用途：用于免疫荧光试验。（十二）Hank’s液1．贮存液NaCl80.00gKCl4.00gNa2HPO4·12H2O1.52gKH2PO40.60g葡萄糖4.00g0.4％酚红液50.00ml双馏水加至100.00ml115℃高压灭菌15min，冰冻保存。2．工作液贮存液1份双馏水9份115℃高压灭菌15min。临用时用灭菌的5.6％NaHCO3液调pH值至7.2左右（溶液呈橙红色）。（十三）萘（钠）氏试剂（Nessler’sreagent）配方1：氯化汞6.0g碘化钾12.4g20％NaOH30ml加蒸馏水至100ml配方2：碘化汞11.5g碘化钾8g蒸馏水50ml（完全溶解后）过滤，加20％NaOH50ml。用途：检测溶液中氨离子。（十四）阿氏（Alsever’s）液葡萄糖2.05g柠檬酸钠0.80g氯化钠0.42g蒸馏水100ml溶解后，以10%柠檬酸调节pH至6.1，过滤，分装，10磅10min灭菌，4℃保存。（十五）青、链霉素混合液（简称S．P．液或双抗液）青霉素（40万U）5支链霉素（200万μg）1支分别溶于100ml灭菌无离子水中或共同溶于200ml灭菌无离子水中，混合后分装小瓶，置-10℃~-20℃冰箱保存备用（1万单位μg/ml）。临用时，按1%的量加入营养液或其他溶液中，最后浓度是青霉素100U/ml，链霉素100ug/ml。（十六）洗液（清洁液）配方1：重铬酸钾150g蒸馏水300ml浓硫酸3000ml将重铬酸钾加入蒸馏水中，使之自然溶解或水浴溶解，亦可在大坩埚中加热溶解，然后慢慢加入浓硫酸，边加边搅拌，见发热过剧则稍停，冷却后再继续加。此为强洗液。盛清洁液的容器要坚固，上加厚玻璃盖，操作时要穿橡皮围裙、长统胶靴、戴上眼镜和厚胶皮手套，以保安全。洗液一旦变绿，表示铬酸已经还原，失去了氧化能力，不宜再用。如将这样洗液加热，再加适量