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文档简介
PAGE9-课后分层检测案10DNA的粗提取与鉴定[基础巩固练]1.在制备鸡血细胞液的过程中,加入柠檬酸钠的目的是()A.防止凝血B.加快DNA析出C.加快DNA溶解D.加速凝血2.用过滤的方法得到含DNA的氯化钠溶液后,还要用酒精处理,才可以得到较纯的DNA,这是因为()A.DNA易溶于酒精,而滤液中某些杂质不易溶于酒精B.DNA不易溶于酒精,而滤液中某些杂质易溶于酒精C.DNA和滤液中其他成分更易溶于酒精D.DNA和滤液中其他成分都不溶于酒精3.在DNA提取过程中,最好运用塑料的试管和烧杯,目的是()A.不易裂开B.削减提取过程中DNA的损失C.增加DNA的含量D.简单洗刷4.下面不能影响DNA粗提取含量的是()A.选材B.洗涤剂的用量C.二苯胺的用量D.搅拌和研磨的程度5.下列关于“DNA的粗提取与鉴定”的试验操作的说法,有误的是()A.该试验中有两次加入蒸馏水,均是为了析出DNAB.该试验操作中多次用到搅拌,除最终一步未强调方向外,其余均要求单向搅拌C.该试验中有3次过滤,过滤时运用纱布的层数与滤液或黏稠物有关D.试验中3次加入浓度为2mol/L的NaCl溶液,均是为了溶解DNA6.若从植物细胞中提取DNA,发觉试验效果不好,如看不到丝状沉淀物、用二苯胺鉴定时不显示颜色反应等。其可能的缘由是()①植物细胞中DNA含量低②研磨不充分③过滤不充分④95%冷酒精的量过大A.①②B.③④C.①④D.②③7.在DNA的粗提取与鉴定试验中有三次过滤(1)过滤用蒸馏水稀释过的鸡血细胞液(2)过滤含黏稠物的物质的量浓度为0.14mol/L的NaCl溶液(3)过滤溶解有DNA的物质的量浓度为2mol/L的NaCl溶液以上三次过滤分别为了获得()A.含核物质的滤液、纱布上的黏稠物、含DNA的滤液B.含核物质的滤液、滤液中DNA黏稠物、含DNA滤液C.含核物质的滤液、滤液中DNA黏稠物、纱布上的DNAD.含较纯DNA滤液、纱布上黏稠物、含DNA滤液8.DNA的粗提取与鉴定试验的正确操作步骤是()A.制备鸡血细胞液→提取细胞核物质→溶解核内的DNA→析出并滤取DNA黏稠物→DNA的再溶解→提取较纯净的DNA→鉴定DNAB.制备鸡血细胞液→提取细胞核物质→溶解并析出DNA→DNA的再溶解→提取较纯净的DNA→鉴定DNAC.制备鸡血细胞液→溶解DNA→提取细胞核中的DNA→DNA的再溶解→提取较纯净的DNA→DNA的鉴定D.制备鸡血细胞的细胞核物质提取液→溶解DNA并析出→提取较纯净的DNA→DNA的鉴定9.下图为“DNA的粗提取与鉴定”试验的一些重要操作示意图,据图回答下列有关该试验的问题:(1)正确的操作依次是________。(2)上图C、E步骤都加入蒸馏水,但其目的不同,分别是__________________和____________________。(3)上图A步骤中所用酒精必需是经过________才能运用,该步骤的目的是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(4)为鉴定A中所得到的丝状物的主要成分为DNA,可滴加________试剂,沸水浴,假如出现________,则该丝状物的主要成分为DNA。[实力提升练]10.下列关于DNA的粗提取和鉴定的试验过程的叙述,不正确的是()A.操作步骤为:制备鸡血细胞→裂开细胞,获得含DNA的滤液→溶解核内的DNA并过滤→析出并滤取含DNA的黏稠物→DNA的再溶解并过滤→提取较纯净的DNA→鉴定DNAB.试验过程中第一次所用NaCl溶液的浓度是2mol/L,目的是溶解细胞核内的DNAC.试验过程中,过滤含黏稠物的0.14mol/L的NaCl溶液和过滤溶解有DNA的2mol/L的NaCl溶液的目的分别是得到纱布上的黏稠物和含DNA的滤液D.向溶有DNA的2mol/L的NaCl溶液中加入二苯胺试剂即可出现蓝色改变11.下列图示中能正确反映DNA溶解度与NaCl溶液浓度之间关系的是()12.在“DNA的粗提取和鉴定”试验中,甲、乙、丙、丁四个小组除下表中所列处理方法不同外,其他操作步骤均正确,但试验结果却不同。下列有关叙述不正确的是()组别试验材料提取核物质时加入的溶液去除杂质时加入的溶液DNA鉴定时加入的试剂甲鸡血蒸馏水95%的酒精(25℃)二苯胺乙菜花蒸馏水95%的酒精(冷却)双缩脲试剂丙猪血蒸馏水95%的酒精(冷却)二苯胺丁鸡血蒸馏水95%的酒精(冷却)二苯胺A.试验材料选择错误的组别是丙B.沸水浴后试管中溶液颜色变蓝的组别是甲、丁C.甲组试验现象差的缘由是25℃的酒精对DNA的凝集效果差D.乙组试验不胜利仅因为在鉴定时加入了双缩脲试剂13.甲、乙两图为“DNA的粗提取与鉴定”试验中涉及的两个操作装置图。相关叙述正确的是()A.图甲的烧杯和图乙的试管中所用溶剂都为NaCl溶液,但两者浓度不同B.图乙试管经稍稍加热后即可视察到一支试管中的溶液明显变蓝,另一支试管中的溶液不变蓝C.图甲操作需用玻璃棒快速搅拌以使DNA析出,并缠绕在玻璃棒上D.图乙操作中所用的二苯胺需现配现用以达到较好的鉴定效果14.在DNA粗提取与鉴定试验中,将第三次过滤获得的纱布上含有DNA的黏稠物(含有较多杂质)分别处理如下:序号操作过程①放入2mol/L的NaCl溶液,搅拌后过滤②再加入0.14mol/L的NaCl溶液,搅拌后过滤③再加入冷却的、同体积的体积分数为95%的酒精溶液,用玻璃棒沿一个方向搅拌,卷起丝状物上述操作过程正确的是()A.①②B.①②③C.①③D.②③15.科研人员以金定鸭、长乐灰鹅和象洞鸡的全血为试验材料,比较苯酚—氯仿抽提法(方法A)和盐析法(方法B)提取血液中DNA的效率。下图中EDTA具有破坏细胞膜、抑制DNA酶活性的作用,SDS具有破坏细胞膜和核膜、使蛋白质变性和抑制DNA酶活性的作用。提取过程:试验结果:测定项目金定鸭长乐灰鹅象洞鸡方法A方法B方法A方法B方法A方法B纯度/OD值1.951.951.852.361.961.90浓度/μg·mL-1534.29240.00899.17583.33385.35914.17注:纯DNA的OD值为1.8,OD值在1.75~1.85间,DNA纯度较好;OD值高于1.8,一般有RNA污染;OD值低于1.8,一般有蛋白质或其他物质污染。请回答下列问题:(1)本试验不选择哺乳动物血液作为试验材料的缘由是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(2)步骤①中,若只用蛋白酶K消化处理,对试验结果的影响是________________________。(3)步骤③中,裂开细胞常用的方法是________________________________________________________________________。步骤⑤中加入蒸馏水的目的是________________________________________________________________________。(4)对于长乐灰鹅、象洞鸡来说,较相宜的DNA提取方法分别是________、________。(5)结果表明,用不同方法提取DNA的试验中,影响DNA纯度的主要物质是________。不同鸟类的相同体积的血液中DNA提取量有明显差异,其缘由可能是________________________________。[素养养成练]16.某生物爱好小组开展DNA粗提取的相关探究活动,详细步骤如下:材料处理:称取簇新的菜花、辣椒和蒜黄各2份,每份10g。剪碎后分成两组,一组置于20℃、另一组置于-20℃条件下保存24h。DNA粗提取:第一步:将上述材料分别放入研钵中,各加入15mL研磨液,充分研磨。用两层纱布过滤,取滤液备用。其次步:先向6只小烧杯中分别注入10mL滤液,再加入20mL体积分数为95%的冷酒精溶液,然后用玻璃棒缓缓地向一个方向搅拌,使絮状物缠绕在玻璃棒上。第三步:取6支试管,分别加入等量的2mol/LNaCl溶液溶解上述絮状物。DNA检测:在上述试管中各加入4mL二苯胺试剂,混合匀称后,置于沸水中加热5min,待试管冷却后比较溶液的颜色深浅,结果如下表:材料保存温度菜花辣椒蒜黄20℃++++++-20℃+++++++++(注:“+”越多表示蓝色越深)分析上述试验过程,回答下列问题:(1)该探究性试验课题名称是________________________________________________________________________。(2)其次步中“缓缓地”搅拌,这是为了削减________。(3)依据试验结果,得出结论并分析。①结论1:与20℃相比,相同试验材料在-20℃条件下保存,DNA的提取量较多。结论2:________________________________________________________________________________________________________________________________________________。②针对结论1,请提出合理的说明:________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(4)氯仿密度大于水,能使蛋白质变性沉淀,与水和DNA均不相溶,且对DNA影响微小。为了进一步提高粗提取时DNA的纯度,依据氯仿的特性,在第三步的基础上接着操作的步骤是:________________________________________________________________________________________________________________________________________________,然后用体积分数为95%的冷酒精溶液使DNA析出。课后分层检测案10DNA的粗提取与鉴定1.解析:柠檬酸钠是抗凝血物质,可防止凝血,有利于鸡血细胞液的制备。答案:A2.解析:DNA不易溶于酒精,而滤液中某些杂质易溶于酒精,利用这个特点可去除溶于酒精的杂质,得到较纯的DNA。答案:B3.解析:鸡血细胞裂开以后释放出的DNA,简单被玻璃容器吸附,由于细胞内DNA的含量原来就比较少,若再被玻璃容器吸附一部分,提取到的DNA就会更少。因此,试验过程中最好运用塑料的烧杯和试管,削减提取过程中DNA的损失。答案:B4.解析:A项:尽量选择DNA含量高的材料粗提取DNA。B项:洗涤剂的用量和类型能影响细胞膜的瓦解程度,从而导致DNA的释放量的改变。C项:二苯胺是DNA的鉴定剂,而非提取剂。D项:搅拌和研磨充分有利于DNA的释放。答案:C5.解析:两次加入蒸馏水,第一次是为了使细胞吸水裂开释放出核物质(DNA),其次次是为了降低NaCl溶液的浓度,从而析出DNA。答案:A6.解析:研磨不充分会使细胞核内的DNA释放不完全,提取的DNA量变少;过滤不充分,也会导致提取的DNA量过少;若用于沉淀DNA的酒精量过少,也会导致DNA的沉淀量少,都会影响试验效果。答案:D7.解析:过滤用蒸馏水稀释过的鸡血细胞液应取滤液(其内含DNA);过滤含黏稠物的物质的量浓度为0.14mol/L的NaCl溶液应取黏稠物(因其内含析出的DNA);DNA易溶于物质的量浓度为2mol/L的NaCl溶液,故过滤该溶液时应取滤液(其内溶有DNA)。答案:A8.解析:B项漏掉了DNA溶解前要过滤;C项提取细胞核中DNA叙述欠妥,应是提取核物质,并且应放在溶解DNA之前;D项叙述明显有误。答案:A9.解析:两次加入蒸馏水的作用:第一次是使鸡血细胞吸水涨破,DNA从细胞中释放出来进入滤液;其次次是使溶解于物质的量浓度为2mol/L的NaCl溶液中的DNA析出,与杂质分别。本题还涉及DNA的鉴定,DNA可在沸水浴条件下与二苯胺试剂作用,被染成蓝色。答案:(1)C→B→E→D→A(2)加速血细胞的裂开降低NaCl溶液的浓度,使DNA析出(3)充分冷却提取含杂质少的DNA(4)二苯胺蓝色10.解析:DNA的粗提取和鉴定的试验步骤包括:制备鸡血细胞→裂开细胞,获得含DNA的滤液→溶解核内的DNA并过滤→析出并滤取含DNA的黏稠物→DNA的再溶解和过滤→提取较纯净的DNA→鉴定DNA,A正确;试验过程中第一次所用NaCl溶液的浓度是2mol/L,目的是溶解细胞核内的DNA,B正确;过滤含黏稠物的0.14mol/L的NaCl溶液的目的是去除溶于0.14mol/L的NaCl溶液中的杂质,得到含有DNA的黏稠物,过滤溶解有DNA的2mol/L的NaCl溶液的目的是得到含DNA的滤液,C正确;只有在沸水浴条件下,DNA才能与二苯胺反应呈现蓝色,D错误。答案:D11.解析:在质量浓度为0.14mol/L的NaCl溶液中DNA的溶解度最小。答案:C12.解析:菜花细胞有细胞壁,加入蒸馏水不裂开,须经过研磨。鉴定时要用二苯胺试剂。答案:D13.解析:图甲烧杯中为酒精溶液,图乙试管中为NaCl溶液;图乙试管须要在沸水中加热5min;图甲用玻璃棒沿一个方向轻轻搅拌,卷起丝状物;图乙操作中所用的二苯胺最好现配现用,否则会影响鉴定的效果。答案:D14.解析:第三次过滤后在纱布上的是粗提取的DNA,此DNA还含有杂质,因此将其溶于2mol/L的NaCl溶液中,再进行过滤,以除去不溶于2mol/L的NaCl溶液的杂质。然后向滤液中加入同体积的、冷却的体积分数为95%的酒精溶液即可析出DNA,然后挑出DNA进行鉴定。答案:C15.解析:(1)哺乳动物血液中的血细胞主要是红细胞,哺乳动物成熟的红细胞中无细胞核和线粒体等,故不含DNA。(2)可依据题目中的提示信息解答。(3)动物细胞在蒸馏水中会吸水涨破;步骤⑤是通过加入蒸馏水来降低NaCl溶液的浓度,DNA在0.14mol/L的NaCl溶液中溶解度最低,从而可以析出。(4)比照试验结果的表格即可得出结论。(5)结合表格中的数据和表格下的标注,因OD值都高于1.8,没有小于1.8的,则
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