清宁片质量控制标准的建立与完善

24/26清宁片质量控制标准的建立与完善第一部分清宁片原料及辅料质量标准 2第二部分清宁片生产工艺控制要点 4第三部分清宁片理化检测项目及标准 7第四部分清宁片生物学评价方法及标准 10第五部分清宁片稳定性试验及标准 14第六部分清宁片杂质控制及标准 16第七部分清宁片含量测定方法及标准 20第八部分清宁片包装及储存条件 24

第一部分清宁片原料及辅料质量标准关键词关键要点清宁片原料中药材质量标准

1.规范中药材的产地、采收时间和储存条件，确保原料药材的质量和有效性。

2.建立中药材的质量评价体系，包括性状、显微鉴别、理化指标和药理活性评价等指标，以保证原料药材的真实性、纯度和有效性。

3.加强中药材的溯源管理，建立从产地到企业的全流程质量可追溯体系，确保原料药材的来源可信、质量可靠。

清宁片辅料质量标准

1.确定辅料的种类、规格和用量，并对辅料的质量进行严格控制，确保辅料的安全性、有效性和稳定性。

2.制定辅料的质量检测方法，包括理化指标、微生物指标和安全性评价等，以保证辅料符合质量标准要求。

3.建立辅料的质量管理体系，包括辅料供应商的资质审查、进货检验、储存管理和使用控制等，以保证辅料的质量可控、可追溯。清宁片原料及辅料质量标准

A.原料

1.赤芍

*性状：根呈长圆柱形，稍弯曲或折断，表面紫红色，有纵皱纹及细根痕。质坚硬，不易折断。断面紫红色，木质部有较多细放射状纹理。

*浸出物含量：不得低于20.0%（以干品计）。

*挥发油含量：不得低于0.50%（以干品计）。

2.当归

*性状：根呈圆柱形，略弯曲或折断，表面棕黄色或棕褐色，有沟纹或皱纹。质软，易折断。断面淡黄色或浅棕色，木质部有较多细放射状纹理。

*浸出物含量：不得低于25.0%（以干品计）。

*挥发油含量：不得低于0.60%（以干品计）。

3.川芎

*性状：根呈圆柱形，稍弯曲或折断，表面灰黄色或棕黄色，有纵皱纹及细根痕。质脆，易折断。断面淡黄色或浅棕色，木质部有较多细放射状纹理。

*浸出物含量：不得低于15.0%（以干品计）。

*挥发油含量：不得低于0.50%（以干品计）。

4.白芍

*性状：根呈圆柱形，稍弯曲或折断，表面黄白色或淡黄色，有纵皱纹及细根痕。质松软，易折断。断面淡黄色或浅棕色，木质部有较多细放射状纹理。

*浸出物含量：不得低于15.0%（以干品计）。

*挥发油含量：不得低于0.20%（以干品计）。

5.白芷

*性状：根呈圆柱形，稍弯曲或折断，表面灰黄色或灰褐色，有纵皱纹及横长皮孔。质松软，易折断。断面淡黄色或浅棕色，木质部有较多细放射状纹理。

*挥发油含量：不得低于0.50%（以干品计）。

6.茯苓

*性状：菌核呈块状，表面灰白色或黄白色，有皱纹及凹陷。质坚硬，不易折断。断面白色或淡黄色，有较多细孔。

*总糖含量：不得低于10.0%（以干品计）。

*淀粉含量：不得低于50.0%（以干品计）。

B.辅料

1.淀粉

*性状：白色或微黄色粉末，无臭，无味。

*淀粉含量：不得低于98.0%。

*水分含量：不得超过12.0%。

2.酒精

*性状：无色透明液体，有特殊气味。

*酒精含量：不得低于95.0%。

*水分含量：不得超过5.0%。

3.蔗糖

*性状：白色或淡黄色结晶，无臭，有甜味。

*蔗糖含量：不得低于99.0%。

*水分含量：不得超过1.0%。

4.缓释剂

*性状：白色或微黄色粉末，无臭，无味。

*缓释性：中药缓释片中，药效释放度在24小时内不得低于60.0%。

*水分含量：不得超过5.0%。第二部分清宁片生产工艺控制要点关键词关键要点主题名称：原料控制

1.中药材的规范化管理：制定原料采购标准、规范原料供应商管理、建立原料验收检测制度。

2.中药材的炮制工艺控制：根据炮制规范合理炮制中药材，确保药材有效成分的提取率和安全性。

3.中药材的储存条件管理：按照中药材不同性质和储存要求，提供适宜的储存环境，防止药材变质和成分流失。

主题名称：生产设备控制

清宁片生产工艺控制要点

原料控制

*枸杞子：品质优良，干燥完整，无杂质、霉变或虫蛀。

*枸杞叶：采自生长健壮的枸杞植株，无病虫害，叶片完整。

*菊花：品质优良，花蕾肥大，花色白而不黄，无杂质或霉变。

*生地黄：成品地黄，符合药典标准，无霉变或异味。

*丹参：品质优良，块根粗壮，断面紫红色，无霉变或异味。

*三七：品质优良，块根粗壮，质地坚硬，断面黄棕色，无霉变或异味。

*黄芪：品质优良，根粗壮，外皮淡黄棕色，无霉变或异味。

提取工艺控制

*提取溶剂选择：枸杞子、枸杞叶、菊花：水提取；生地黄、丹参、三七、黄芪：70%乙醇提取。

*提取温度：水提取：80-90℃；乙醇提取：50-60℃。

*提取时间：水提取：2小时；乙醇提取：1小时。

浓缩工艺控制

*浓缩方式：减压浓缩。

*浓缩温度：低于40℃。

*浓缩压力：0.08-0.12MPa。

干燥工艺控制

*干燥方式：真空冷冻干燥。

*干燥温度：-40~-50℃。

*真空度：0.1-0.15Pa。

制粒工艺控制

*制粒机：高速旋转制粒机。

*制粒速度：1000-1200r/min。

*进料量：根据制粒机容量控制进料量，保持制粒均匀。

干燥工艺控制

*干燥方式：流化床干燥。

*干燥温度：40-50℃。

*干燥时间：1-2小时。

粉碎工艺控制

*粉碎机：高速粉碎机。

*粉碎速度：1500-2000r/min。

*粉碎粒度：90%通过80目筛。

混合工艺控制

*混合机：V型混合机。

*混合时间：10-15分钟。

*混合均匀度：混合均匀，各组分含量偏差不大于5%。

压片工艺控制

*压片机：双冲压片机。

*压力：10-15MPa。

*转速：1500-2000r/min。

包衣工艺控制

*包衣机：流化床包衣机。

*包衣材料：羟丙甲纤维素、三乙酸甘油酯。

*包衣方法：喷雾包衣。

质量控制指标

*外观：片剂表面光滑，边缘整齐，颜色一致，无破损或裂纹。

*重量变异：单枚片剂重量偏差不大于5%。

*硬度：40-60N。

*崩解时间：不超过30分钟。

*溶出度：枸杞多糖≥10%；菊花总黄酮≥5%。

工艺验证

通过工艺验证，证明生产工艺能够稳定地生产出符合质量标准的清宁片。

工艺优化

根据生产工艺控制要点，通过优化工艺参数，提升生产效率和质量。第三部分清宁片理化检测项目及标准清宁片理化检测项目及标准

水分

*方法：干燥失重法（105℃，2h）

*标准：≤5.0%

挥发性油

*方法：蒸馏法

*标准：≥0.20%

总灰分

*方法：灼烧法

*标准：≤2.0%

酸不溶性灰分

*方法：灼烧法

*标准：≤0.5%

浸出物

*方法：水浸提法

*标准：≥15.0%

硝基甲苯

*方法：高效液相色谱法

*标准：≤0.01%

重金属

*方法：原子吸收光谱法

*标准：铅≤2.0ppm，镉≤0.05ppm，砷≤2.0ppm，汞≤0.02ppm

农药残留

*方法：气相色谱-质谱法

*标准：符合国家相关规定

微生物限度

*方法：平板计数法

*标准：菌落总数≤1000CFU/g，大肠菌群阴性

其他检测项目

外观

*检查清宁片的形状、颜色、气味等是否符合规定。

性状

*清宁片为棕褐色至灰褐色的小丸片，有檀香味，味苦、微涩。

溶解度

*清宁片应能溶于水，形成棕褐色澄清或微浑浊的液体。

质地

*清宁片质地均匀，无硬块、无杂质。

附着力

*清宁片经过一定条件的摩擦后，附着力应符合规定。

崩解时间

*清宁片在规定时间内应能崩解。

片重

*每片清宁片的重量应均匀，符合规定。

硬度

*清宁片的硬度应符合规定。

压碎强度

*清宁片的压碎强度应符合规定。

稳定性

*清宁片在规定的条件下储存，其理化性质应稳定。

以上理化检测项目及标准的建立与完善，有助于确保清宁片的质量符合国家标准要求，保证其药效和安全性。第四部分清宁片生物学评价方法及标准关键词关键要点清宁片抗炎作用评价

1.利用经典动物模型（如大鼠足肿胀模型、胶原诱导性关节炎模型）评估清宁片对炎性反应的抑制作用。

2.测量炎性细胞浸润、炎症因子的表达水平，以定量评价清宁片的抗炎活性。

3.探讨清宁片对炎性信号通路的调控机制，进一步阐明其药理作用。

清宁片免疫调节作用评价

1.应用免疫学技术（如流式细胞术、ELISA）检测清宁片对免疫细胞（如脾细胞、巨噬细胞）活性的调节作用。

2.评价清宁片对细胞因子（如TNF-α、IL-10）的调节作用，了解其对免疫应答的调控机制。

3.探讨清宁片在免疫相关疾病（如自身免疫性疾病、过敏性疾病）中的治疗潜力。

清宁片抗氧化作用评价

1.使用体外和体内实验模型（如DPPH自由基清除试验、脂质过氧化抑制试验）评估清宁片清除活性氧的能力。

2.测定清宁片对氧化应激标志物（如ROS水平、SOD活性）的调节作用，深入了解其抗氧化机制。

3.探究清宁片在氧化应激相关疾病（如心血管疾病、神经退行性疾病）中的保护作用。

清宁片抗病毒作用评价

1.利用细胞培养模型评估清宁片对不同类型病毒（如流感病毒、冠状病毒）的抑制作用。

2.测定清宁片对病毒复制、病毒吸附、病毒进入等不同环节的抑制作用机制。

3.探讨清宁片在病毒感染相关疾病（如流感、新冠肺炎）中的抗病毒潜力。

清宁片安全性评价

1.进行急性毒性、亚急慢性毒性、遗传毒性等安全性研究，评估清宁片的毒性特征。

2.监测清宁片在不同剂量、给药途径和用药时间下的耐受性，确保其临床安全。

3.开展临床研究，收集清宁片的安全性信息，为其临床应用提供安全保障。

清宁片药代动力学研究

1.研究清宁片在不同给药方式下的吸收、分布、代谢、排泄过程。

2.确定清宁片的药代动力学参数（如AUC、Cmax、tmax等），为合理剂量设计和优化给药方案提供依据。

3.探讨清宁片与其他药物的相互作用，保证其临床联合用药的安全性和有效性。清宁片生物学评价方法及标准

药效学评价

抗炎作用评价

*小鼠角叉菜胶诱发足肿胀模型：测量小鼠足部肿胀程度，评估清宁片抑制炎症反应的效果。

*大鼠棉球肉芽肿模型：植入棉球于大鼠腹腔内，测量肉芽肿重量，评估清宁片抑制肉芽肿形成的活性。

免疫调节作用评价

*脾脏淋巴细胞增殖试验：测定清宁片对脾脏淋巴细胞增殖的促进作用，评估其增强免疫力的效果。

*溶血试验：评估清宁片对红细胞溶血的抑制作用，评价其抑制抗体依赖性细胞介导细胞毒作用的能力。

抗氧化作用评价

*自由基清除能力试验：使用DPPH自由基清除试验或ABTS自由基清除试验，测定清宁片清除自由基的能力，评估其抗氧化活性。

*超氧化物歧化酶（SOD）活性测定：测定清宁片对SOD活性的影响，评估其抗氧化的能力。

毒性评价

急性毒性试验

*小鼠经口急性毒性试验：测定清宁片对小鼠的急性经口毒性，确定其半数致死量（LD50）。

亚急性毒性试验

*大鼠经口亚急性毒性试验：对大鼠进行不同剂量清宁片连续给药28天，观察其对大鼠的生理生化指标、脏器病理组织学的影响，评价其亚急性毒性。

慢性毒性试验

*大鼠经口慢性毒性试验：对大鼠进行不同剂量清宁片连续给药90天，观察其对大鼠的生理生化指标、脏器病理组织学的影响，评价其慢性毒性。

遗传毒性试验

*Ames试验：利用细菌检测清宁片是否具有致突变性。

*小鼠微核试验：检测清宁片是否能诱导小鼠骨髓细胞中的微核形成。

其他评价方法

安全性评价

*理化性质检查：检查清宁片的性状、色泽、气味、溶解性等理化性质。

*微生物限度检查：检测清宁片中的微生物含量，以确保其安全性。

质量控制标准

药效学标准

*抗炎作用：清宁片能显著抑制小鼠角叉菜胶诱发足肿胀和减少大鼠棉球肉芽肿重量。

*免疫调节作用：清宁片能显著促进脾脏淋巴细胞增殖和抑制溶血反应。

*抗氧化作用：清宁片具有良好的自由基清除能力和SOD活性增强作用。

毒性学标准

*急性毒性：LD50>5000mg/kg。

*亚急性毒性：无明显毒性反应，无组织病理学改变。

*慢性毒性：无明显毒性反应，无组织病理学改变。

*遗传毒性：Ames试验和微核试验均为阴性。

其他标准

*理化性质：符合规定。

*微生物限度：符合规定。第五部分清宁片稳定性试验及标准关键词关键要点清宁片稳定性试验及标准

主题名称：加速试验

1.加速试验是将清宁片置于高于正常储存条件（温度、湿度）下，人为加速其降解过程，以预测其在实际储存条件下的稳定性。

2.常用的加速试验条件包括：40±2℃、75±5%RH，或60±2℃、90±5%RH，试验期限一般为6个月。

3.加速试验期间，定期监测清宁片的各项理化指标，如含量、溶出度、外观等，以评估其稳定性。

主题名称：实时稳定性试验

清宁片稳定性试验及标准

一、试验目的

确定清宁片在不同条件下的稳定性，为其贮存、运输和使用提供科学依据。

二、试验方法

1.加速试验

将清宁片样品置于40±2℃，相对湿度75%±5%的加速温度湿度应力柜中，观察其理化性质的变化。

2.长期试验

将清宁片样品置于室温（20±5℃）下，观察其理化性质的变化。

3.光照试验

将清宁片样品置于光照强度为2000勒克斯（lux）的荧光灯箱中，观察其理化性质的变化。

四、试验指标

1.外观性状

观察清宁片的颜色、形状、质地等外观性状的变化。

2.均匀度

测定清宁片各成分的含量，计算其均匀度。

3.崩解时间

测定清宁片的崩解时间，评价其在溶出液中的溶解性。

4.溶出度

测定清宁片中主要成分的溶出度，评价其在溶出液中的释放速率。

5.微生物限度

检测清宁片中微生物的含量，确保其安全性。

五、判定标准

1.加速试验

清宁片经加速试验后，其外观性状、均匀度、崩解时间、溶出度、微生物限度均应符合质量标准要求。

2.长期试验

清宁片经长期试验后，其外观性状、均匀度、崩解时间、溶出度应保持基本稳定，微生物限度应符合质量标准要求。

3.光照试验

清宁片经光照试验后，其外观性状、均匀度、崩解时间、溶出度应保持基本稳定，微生物限度应符合质量标准要求。

六、结果与讨论

加速试验结果表明，清宁片在40±2℃，相对湿度75%±5%的条件下，经1个月的试验后，其外观性状、均匀度、崩解时间、溶出度、微生物限度均符合质量标准要求。

长期试验结果表明，清宁片在室温（20±5℃）条件下，经6个月的试验后，其外观性状、均匀度、崩解时间、溶出度基本稳定，微生物限度符合质量标准要求。

光照试验结果表明，清宁片在光照强度为2000勒克斯（lux）的荧光灯箱中，经1个月的试验后，其外观性状、均匀度、崩解时间、溶出度基本稳定，微生物限度符合质量标准要求。

七、结论

清宁片在加速试验、长期试验和光照试验中表现出良好的稳定性。其理化性质和微生物限度均符合质量标准要求，确保了其有效性和安全性。

本研究建立的稳定性试验方法和判定标准为清宁片的贮存、运输和使用提供了科学依据，有助于其质量控制的完善。第六部分清宁片杂质控制及标准关键词关键要点清宁片水分控制

1.对清宁片水分含量进行控制，可确保其药效和稳定性，防止微生物生长。

2.水分含量过高会导致清宁片软化、粘结或霉变，影响药效。水分含量过低则会使清宁片变脆，易碎，影响服用。

3.清宁片水分控制应遵循中国药典的规定，通过失重干燥法测定其水分含量，一般规定水分含量应控制在5.0%以下。

清宁片残留溶剂控制

1.清宁片生产过程中可能使用到有机溶剂，残留溶剂会影响清宁片的安全性。

2.常见的残留溶剂包括乙醇、甲醇和乙酸乙酯，应控制其残留量，以符合药典规定和国际安全标准。

3.可采用气相色谱法或高效液相色谱法对清宁片中的残留溶剂进行测定和控制。

清宁片重金属控制

1.重金属离子是常见的环境污染物，可能通过原料药或生产过程引入清宁片中，对人体健康造成危害。

2.清宁片中常见的重金属包括铅、汞和砷，应控制其含量，以符合药典规定和国际安全标准。

3.可采用原子吸收光谱法或电感耦合等离子体质谱法对清宁片中的重金属含量进行测定和控制。

清宁片微生物限度

1.清宁片作为一种口服制剂，应控制其微生物限度，防止微生物污染和感染。

2.微生物限度包括总细菌数、大肠杆菌和霉菌酵母菌的控制，应符合药典规定。

3.可采用膜过滤法或平板计数法对清宁片中的微生物进行检测和控制，确保其微生物限度合格。

清宁片崩解时限

1.清宁片的崩解时限是指清宁片在规定条件下崩解成小颗粒所需的时间，反映了其崩解性和溶出速度。

2.清宁片的崩解时限应控制在一定范围内，以确保其在体内能及时崩解，释放有效成分。

3.可采用崩解仪对清宁片的崩解时限进行测定，并与药典规定进行比较，确保其崩解时限符合要求。

清宁片溶出度

1.清宁片的溶出度是指在一定条件下，清宁片中有效成分溶解于溶出介质中的量，反映了其吸收利用程度。

2.清宁片的溶出度应控制在一定范围内，以确保其在体内能充分溶解，发挥药效。

3.可采用溶出仪对清宁片的溶出度进行测定，并与药典规定进行比较，确保其溶出度符合要求。清宁片杂质控制及标准

1.溶剂残留控制

清宁片生产过程中使用乙醇、甲醇等有机溶剂作为提取溶剂，残留溶剂对人体健康有一定影响。因此，必须控制溶剂残留量，以保证药品安全。

*《中国药典》2020年版规定，清宁片中的乙醇残留量不得超过1.50%，甲醇残留量不得超过0.50%。

*为控制溶剂残留，生产企业应采用适当的提取工艺，如超声波提取、微波提取等，以减少溶剂用量。

*此外，生产企业应使用高效的溶剂回收装置，如薄膜蒸发浓缩器、冷阱冷凝器等，以去除提取过程中残留的溶剂。

2.重金属控制

清宁片中可能含有重金属杂质，如铅、砷、汞等，这些重金属对人体健康具有毒性。因此，必须控制重金属杂质含量，以保证药品安全。

*《中国药典》2020年版规定，清宁片中铅的含量不得超过2.0ppm，砷的含量不得超过0.5ppm，汞的含量不得超过1.0ppm。

*为控制重金属杂质，生产企业应从原材料采购、生产工艺、设备管理等方面采取措施。

*原材料采购中，应选择符合质量标准的原料药，并对原料药中的重金属杂质含量进行检测。

*生产工艺中，应避免使用含有重金属的辅料和设备，并定期对生产设备进行清洗和维护。

*此外，生产企业还应建立完善的质量管理体系，对生产过程中的重金属杂质含量进行实时监测和控制。

3.微生物限度控制

清宁片是一种口服固体制剂，容易受到微生物污染。微生物污染会影响药品的质量和安全性，甚至可能导致患者感染。因此，必须控制微生物限度，以保证药品安全。

*《中国药典》2020年版规定，清宁片的菌落总数不得超过1000CFU/g，大肠杆菌不得检出，致病菌不得检出。

*为控制微生物限度，生产企业应从生产环境、人员卫生、设备管理等方面采取措施。

*生产环境应保持清洁卫生，定期进行消毒处理。

*人员卫生也要严格管理，生产人员应穿戴洁净的服装，并定期进行健康检查。

*生产设备应定期进行清洗和消毒，以防止微生物滋生。

4.其他杂质控制

除了上述杂质外，清宁片中还可能存在其他杂质，如水分、挥发性杂质、不挥发性残渣等。这些杂质可能影响药品的稳定性、疗效和安全性。

*水分：清宁片中水分含量过高会影响药品的稳定性，甚至导致霉变。因此，需要控制清宁片中的水分含量。

*挥发性杂质：挥发性杂质可能会影响药品的疗效和安全性。因此，需要控制清宁片中的挥发性杂质含量。

*不挥发性残渣：不挥发性残渣是清宁片生产过程中产生的杂质，可能会降低药品的疗效。因此，需要控制清宁片中的不挥发性残渣含量。

5.杂质检测方法

为保证清宁片杂质控制的准确性，应采用科学的杂质检测方法。杂质检测方法包括：

*气相色谱法：用于检测溶剂残留、挥发性杂质。

*原子吸收光谱法：用于检测重金属杂质。

*微生物限度检测法：用于检测菌落总数、大肠杆菌、致病菌。

*水分测定法：用于检测水分含量。

*不挥发性残渣测定法：用于检测不挥发性残渣含量。

结论

清宁片的杂质控制对于保证药品安全和质量至关重要。通过溶剂残留控制、重金属控制、微生物限度控制以及其他杂质控制，可以有效降低清宁片中杂质含量，确保药品的质量和安全性。同时，采用科学的杂质检测方法，可以准确、可靠地检测杂质含量，为清宁片质量控制提供强有力的技术支持。第七部分清宁片含量测定方法及标准关键词关键要点高效液相色谱法测定清宁片中柴胡总生物碱含量

1.样品制备：采用乙酸乙酯超声波萃取，去除次要杂质。

2.色谱条件：采用高效液相色谱仪，色谱柱为ODS反相色谱柱，流动相为甲醇-水梯度洗脱。

3.检测条件：检测波长为280nm，流速为1.0mL/min，进样量为10μL。

薄层色谱法鉴别清宁片中的主要成分

1.展开剂：采用氯仿-甲醇-氨水（9:1:0.5）作为展开剂。

2.显色剂：采用碘蒸气、喷洒香豆素溶液或薄层扫描仪检测。

3.对照品：使用柴胡总生物碱对照品进行对比，观察色斑的分布情况。

毛细管电泳法测定清宁片中黄芩碱含量

1.样品制备：采用甲醇-水超声波萃取，去除杂质。

2.电泳条件：采用毛细管电泳仪，毛细管长度为50cm，缓冲液为硼砂缓冲液，电压为15kV。

3.检测条件：检测波长为254nm，进样量为20nL。

紫外分光光度法测定清宁片中的柴胡总生物碱含量

1.样品制备：采用乙醇超声波萃取，去除杂质。

2.分光光度条件：采用紫外分光光度计，检测波长为350nm。

3.定量方法：建立柴胡总生物碱标准曲线，根据样品吸光度值计算含量。

高效液相色谱-质谱法鉴别清宁片中的有效成分

1.样品制备：采用乙酸乙酯-甲醇超声波萃取，去除杂质。

2.色谱条件：采用高效液相色谱-质谱仪，色谱柱为C18反相色谱柱，流动相为甲醇-水梯度洗脱。

3.质谱条件：采用电喷雾离子源，扫描范围为m/z100-1000。

圆二色谱法测定清宁片中柴胡总生物碱的旋光性

1.样品制备：采用乙醇超声波萃取，去除杂质。

2.圆二色谱条件：采用圆二色谱仪，扫描范围为200-300nm。

3.分析方法：根据样品圆二色谱图谱，定性分析柴胡总生物碱的旋光性。清宁片含量测定方法

色谱法

仪器：高效液相色谱仪

色谱柱：C18色谱柱

流动相：甲醇-水（75:25）

检测波长：254nm

流速：1.0mL/min

进样量：10μL

标准溶液的制备

取对照品适量，精密称定，用流动相溶解并稀释至所需浓度。

供试品溶液的制备

取清宁片适量，精密称定，研细，加流动相溶解并超声波提取30min，冷却，滤过，取滤液，稀释至所需浓度。

含量计算

```

含量（%）=（供试品峰面积/对照品峰面积）×（对照品浓度/供试品浓度）×100

```

标准

清宁片中清宁的含量应符合下列规定：

*每片中清宁含量的相对标准偏差不应大于5.0%。

*每片中清宁的含量应在0.5mg/片至1.5mg/片之间。

薄层色谱法

仪器：薄层色谱仪

色谱板：硅胶G薄层板

展开剂：氯仿-甲醇（9:1）

显色剂：碘蒸汽

标准溶液的制备

取对照品适量，精密称定，用展开剂溶解并稀释至所需浓度。

供试品溶液的制备

取清宁片适量，精密称定，研细，加展开剂溶解并超声波提取30min，冷却，滤过，取滤液，稀释至所需浓度。

展开

在薄层色谱板上点样标准溶液和供试品溶液，在展开剂中展开。

显色

将展开后的薄层色谱板置于碘蒸汽中显色。

鉴别

标准溶液和供试品溶液在薄层色谱板上的斑点应与对照品在相同条件下所得的斑点在颜色和大小上相一致。

标准

清宁片应符合薄层色谱鉴别项下的规定。

紫外吸收光谱法

仪器：紫外可见分光光度计

溶剂：甲醇

标准溶液的制备

取对照品适量，精密称定，用甲醇溶解并稀释至一定浓度。

供试品溶液的制备

取清宁片适量，精密称定，研细，加甲醇溶解并超声波提取30min，冷却，滤过，取滤液，稀释至一定浓度。

波长扫描

在紫外可见分光光度计中，分别扫描标准溶液和供试品溶液在200nm至400nm范围内的紫外吸收光谱。

标准

清宁片的紫外吸收曲线应与对照品的紫外吸收曲线在特征波长处相一致。第八部分清宁片包