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文档简介
专题十:现代生物科技
【考情分析】
本专题内容包括选修三《现代生物科技专题》全部内容。本部分内容在高考中以非选择题呈现的较多,
多为二选一模式。本专题内容在高考中的主要考点有:基因工程的原理及应用;克隆技术、动植物细胞工
程的方法、步骤、特点及应用;胚胎工程的原理及应用等。
【知识网络】
【知识综合】
一、基因工程的操作程序
(1)目的基因的获取途径有:从基因文库中获取、PCR技术扩增、化学法人工合成。
(2)基因表达载体的构建:是基因工程的重要环节,需要用同种限制酶分别切割载体和目的基因,再
用DNA连接酶把两者连接,基因表达载体包括标记基因、启动子、终止子和目的基因。.
(3)将目的基因导入受体细胞:
植物细胞:农杆菌转化法
动物细胞:显微注射法
微生物细胞:感受态细胞法
(4)目的基因的检测和鉴定:
1)分子水平上的检测
检测是否插入目的基因:利用DNA分子杂交技术
检测是否转录出了mRNA:利用分子杂交技术
检测是否翻译成蛋白质:抗原-抗体杂交
2)个体水平上的检测抗虫、抗病鉴定。
提醒:受体细胞是植物细胞可以是卵细胞、受精卵、体细胞,动物细胞一般是受精卵。
目的基因导入受体细胞不是基因工程成功.的标志,基因工程是否成功是目的基因是否表达成功。
二、植物细胞、动物细胞工程
1、植物组织培养与动物细胞培养的比较
比较项目植物组织培养动物细胞培养
原理细胞的全能性细胞增殖
培养基性质固体培养基液体培养基
培养基特有成分蔗糖植物激素葡萄糖动物血清
培养结果植物体细胞株、细胞系
培养目的快速繁殖、培育无病毒植株获得细胞或细胞分泌蛋白
2、植物体细胞杂交与动物细胞融.合的区别
比较项目植物体细胞杂交动物细胞融合
细胞膜的流动性、
细胞融合的原理细胞膜的流动性
植物细胞全能性
细胞融合的过程去除细胞壁后诱使细胞分散后诱
导原生质体融合导细胞融合
诱导方法物理(离心、振物理、化学方法
荡、电刺激)(同左)
化学(聚乙二醇)灭活的病毒
用途获得杂种植株主要用于制备
单克隆抗体
三、胚胎工程
1、精子、卵子发生的比较
项目精子发生卵子发生
场所睾丸的曲细精管(唯一场所)卵巢(MI)、输卵管(MII)
(场所不唯一)
性别分化后开始,卵泡的形成和在卵
时
巢内的储备,是在出生前(胎儿期)
初情期开始到生殖机能衰退
完成的,减数第二次分裂是在精子和
间
卵子的结合过程中(受精过程)完成
的
过程1.MI和MH是连续的,需变形1、MI和是不连续的,不需变形
2.细胞质均等分配2、细胞质不均等分配
特点
结果形成4个精细胞形成1个.卵细胞和3个极体(极体将
来退化)
1.原始生殖细胞的增殖为有丝分裂
相同点
2.生殖细胞的成熟为减数分裂
3.成熟过程均经一次复制和两次分裂,子细胞中染色体数目减.半
2、胚胎移植的培育流程
对供、受体雌性个体进行选择并用激素进行同期发情处理
用激素对供体雌性做超数排卵处理
超数排卵的雌性发情后,选择同种优秀雌性进行配种或人工授精
胚胎收集(冲卵)
胚胎质量检查,此时胚胎发育到桑根胚或囊胚阶段
胚胎移植
对受体进行是否妊娠的检查
产.下胚胎移植的幼体
【典例导航】
1.【、海南、31】【生物一一选修3:现代生物科技专题】(15分)。
已知甲种农作物因受到乙种昆虫危害而减产,乙种昆虫食用某种原核生物分泌的丙种蛋白质后死亡。
因此,可将丙种蛋白质基因转入到甲种农作物体内,使甲种农作物获得抗乙种昆虫危害的能力。
回答下列问题:
(1)为了获得丙中蛋白质的基因,在已知丙种蛋白质氨基酸序列的基础上,推测出丙中蛋白质的
序列,据此可利用方法合成目的基因。获得丙中蛋白质的基因还可用、方
法。
(2)在利用上述丙中蛋白质基因和质粒载体构建重组质粒的过程中,常需使用
酶和_______
(3)将含有重组质粒的农杆菌与甲种农作物的愈伤组织共培养,筛选出含有丙种蛋白质的愈伤组织,
由该愈伤组织培养成的再生植株可抵抗的危害。
(4)若用含有重组质粒的农杆菌直接感染甲种农作物植株叶片伤口,则该植株的种子
(填“含有”或“不含”)丙种蛋白质基因。
【答案】(15分)
(1)基因化学基因文库PCR(每空2分,共8分,其他合理答案也给分)
(2)限制DNA连接(每空1分,共2分)
(3)乙种昆虫(2分)
(4)不含(3分)。
【解析】(1)在已知蛋白质的氨基酸序列的情况下,可根据氨基酸和碱基的对应关系,推出合成该蛋白质
的基因序列,然后用DNA合成仪通过化学方法来合成目的基因。此外也可以从基因文库中获取目的基
因,也可通过PCR方法获取目的基因。
(2)构建重组质粒时,需要用限制酶将运载体切开,并用DNA连接酶将目的基因连接到运载体上,从而
构建基因表达载体。
(3)愈伤组织中含有丙蛋白,说明丙蛋白的基因得到了表达,在培养成的植株体内也含有丙蛋白,乙昆
虫食用丙蛋白后会死亡,则该植株可抵抗乙昆虫的危害。
(4)直接用含有重组质粒的农杆菌直接感染甲种农作物植株叶片伤口,仅仅在该叶片内部分细胞中能合
成丙蛋白,该植株的种子和其他的营养器官均不含有重组质粒,也就不含有丙中蛋白质的基因
2.【、江苏、32](9分)图1表示含有目的基因D的DNA片段长度(bp即碱基对)和部分碱基序歹
图2表示一种质粒的结构和部分碱基序列。现有MspI、BamHI、MboI、SmaI4种限制性核酸内切
酶,它们识别的碱基序列和酶切位点分别为C1CGG、G!GATCC,1GATC,.CCC;GGGO请回答下列问题:
(1)图1的一条脱氧核甘酸链中相邻两个碱基之间依次由连接。
(2)若用限制酶Sma玉完全切割图1中DNA片段,产生的末端是末端,其产物长度为
图1图2
(3)若图1中虚线方框内的碱基对被T-A碱基对替换,那么基因D就突变为基因d。从杂
合子中分离出图1及其对应的DNA片段,用限制酶SmaI完全切害《产物中共有
种不同长度的DNA片段。
(4)若将图2中质粒和目的基因D通过同种限制酶处理后进行连接,形成重组质粒,那么
应选用的限制酶是0在导入重组质粒后,为了筛选出含重组质粒的大肠杆菌,一般需要用
添加的培养基进行培养。经检测,部分含有重组质粒的大肠杆菌菌
株中目的基因D不能正确表达,其最可能的原因是o
【答案】(1)脱氧核糖、磷酸、脱氧核糖
(2)平53平p、790bp、661bp
(3)4(4)BamHI抗生素B同种限制酶切割形成的末端相同,部分目的基因D与质粒反向链接
【解析】
(1)DNA单链中相邻两个碱基之间通过“脱氧核糖一磷酸一脱氧核糖”连接。
(2)SmaI识别的序列为GGGCCC,切割后会产生平末端;图1所示的DNA分子中含有两个SmaI的识别位点,
第一个识别位点在左端534bp序列向右三个碱基对的位置;第二个识别位点在右端658bp序列向左三个碱基
对的位置,从这两个位点切割后产生的DNA片段长度分别为534+3,796-3-3,658+3,即得到的DNA片段长
度分别为537bp、790bp和661bp。
(3)在杂合子体内含有基因D和基因d,基因D的序列中含有两个识别位点,经过Smal完全切割会产生537bp、
790bp和661bp三种不同长度的片段,基因d的序列中含有一个识别位点,经过切割后会产生1327bp和661bp
两种长度的片段,综上,杂合子中分离到该基因的DNA片段经过切割后会产生4种不同长度的片段。
⑷能够获取目的基因并切开质粒.的限制酶有识别序列为GGATCC的BamHI和识别序列为GATC的MboI,
若使用MboI会同时破坏质粒中的抗生素A抗性基因和抗生素B抗性基因,所以要用BamHI来切割目的
基因和质粒,切割后保留了完整的抗生素B抗性基因,便于筛选出含有重组质粒的大肠杆菌。因为目的基
因和运载体是用同种限制酶切割的,目的基因两端的末端和质粒切割后的两个末端都能进行互补,可能出
现目的基因反向连接在运载体上的情况,导致基因D不能正确表达。
3.【、福建卷、32、10分】肺细胞中的let-7基因表达减弱,癌基因RAS表达增强,会引发肺癌。研
究人员利用基因工程技术将let-7基因导入肺癌细胞,实验表达,发现肺癌细胞的增殖受到抑制。该基因工
程技术基本流程如图1。
请回答:
(1)进行过程①时,需用酶切开载体以插入let-7基因。载体应用RNA聚合酶识别和结合
的部位,以驱动let-7基因转录,该部位称为o
(2)进行过程②时,需用酶处理贴附在培养皿壁上的细胞,以利于传代培养。
(3)研究发现,let-7基因能影响RAS的表达,其影响机理如图2。据图分析,可从细胞提取进
行分子杂交,以直接检测let-7基因是否转录。肺癌细胞增殖受到抑制,可能是由于细胞中
(RASmRNA/RAS蛋白)含量减少引起的。
【答案】
(1)限制性核酸内切酶(或限制)启动子
(2)胰蛋白
(3)RNARAS蛋白
【解析】
.(1)过程①表示基因表达载体的构建,在该过程中需要用限制酶对载体进行切割以便于目的基因的
插入(限制性核酸内切酶,简称限制酶,写其他的不得分);启动子是一段特殊的DNA序列,是RNA聚合
酶结合和识别的位点,RNA聚合酶结合到该位点,可驱动转录过程。
(2)过程②表示动物细胞培养,培养过程中出现接触抑制后可以用胰蛋白酶处理,使之分散成单个
的细胞,之后分装到其他培养瓶里面进行传代培养。
(3)判断目的基因是否在受体细胞中转录,可用分子杂交技术来进行,从细胞中提取mRNA和用放射
性同位素或者荧光标记的目的基因单链DNA片段进行杂交。根据题中信息“肺组织细胞中的let-7基因表
达减弱,癌基因RAS表达就增强,引发肺癌”导入let7基因后,肺癌细胞受到抑制,说明RAS基因表达
减弱,导致细胞中的RAS蛋白质含量减少进而导致癌细胞受抑制。
【专题训练】
1.【、广东卷、2]培育草莓脱毒苗所采用的主要技术是]
A.组织培养B.细胞杂交C.显微注射D.核移植
2.【、浙江、2]下列关于高等哺乳动物受精与胚胎发育的叙述,正确的是
A.绝大多数精卵细胞的识别具有物种特异性
B.卵裂球细胞的体积随分裂次数的增加而不断增大
C.囊胚的滋养层细胞具有发育全能性
D.原肠胚发育分化形成内外两个胚层
3、应用生物工程技术获得人们需要的生物新品种或新产品。请据图回答下列问题:
(1)在培育转人生长激素基因牛过程中,①过程需.要的工具酶是②过
程常用的方法是。
(2)转入生长激素基因牛可通过分泌的乳汁来生产人生长激素,在基因表达载体中,人生长激素基因的
首端必须含有0③过程培养到桑棋胚或囊胚阶段,可以采用和
技术,培育出多头相同的转基因犊牛。
(3)prG能激发细胞不断分裂,通过基因工程导入该调控基因来制备单克隆抗体,II最可能是
细胞,川代表的细胞具有.________________________的特点。
人的生长
抬士攻一Z4-
(4)在抗虫棉培育过程中,④过程中的受体细胞如果采用愈伤组织细胞,与采用叶肉细胞相比较,
其优点是⑤过程采用的技术是。
4、下图为经过体外受精和胚胎分割移植培育优质奶牛的过程.请回答下列问题:
分割针
(1)A细胞是,在进行体外受精前要对精子进行处理。
(2)进行胚胎分割时,应选择发育到时期的胚进行操作。
(3)通过胚胎分割产生的两个或多个个体共有的根本特点是
(4)在对囊胚阶段的胚胎进行分割时,应注意
5、继哺乳动物乳腺发生器研发成功后,膀胱生物发生器的研究也取得了一定进展。最近,科学家培养出
一种转基因小鼠,其膀胱上皮细胞可以合成人的生长激素并分泌到尿液中。请回答:
(1.)将人的生长激素基因导入小鼠受体细胞,常用方法是o(2分)
(2)进行基因转移时,通常要将外源基因转入中,原因
是O
(3)通常采用技术检测外源基因是否插入了小鼠的基因组。(2分)
(4)在研制膀胱生物反应器时,应使外源基因在小鼠的细胞中特异表达。
(5)为使外源基因在后代长期保持,可将转基因小鼠细胞的转入
细胞中构成重组细胞,使其发育成与供体具有相同性状的个体。该技术称
为___________________________
6、【、新课标、40、15分】
根据基因工程的有关知识,回答下列问题:
(1)限制性内切酶切割DNA分子后产生的片段,其末端类型有和
(2)质粒运载体用EcoRI切割后产生的片段如下:
AATTC…G
G……CTTAA
为使运载体与目的基因相连,含有目的基因的DNA除可用EcoRI切割外,还可用另一种限制性内切酶
切割,该酶必须具有的特点是:
(3)按其来源不同,基因工程中所使用的DNA连接酶有两类,即DNA连接酶和DNA连接
酶。
(4)反转录作用的模板是,产物是o若要在体外获得大量反转录产物,常采用—
技术。
(5)基因工程中除质粒外,和也可作为运载体。
(6)若用重组质粒转化大肠杆菌,一般情况下,不能直接用未处理的大肠杆菌作为受体细胞,原因
是.
7、1997年,科学家将动物体内的能够合成胰岛素的大肠杆曲
基因与大肠杆菌的DNA分子重组,并且在大肠杆菌
中表达成功。如右图,请据图回答问题。
质粒
(1)此图表示的是采取方法
获取基因的过程。
(2)图中①DNA是以——为模板,.
形成单链DNA,在酶的作用下合成双链DNA,从而获得了所需
(3)图中②代表的是酶,在它的作用下
将质粒切出_______________末端。
(4)图中③代表重组DNA,含基因。大JR杆菌
(5)图中④表示的过程是_______________________________________
8、某女性患有输卵管阻塞和色盲,借用别的女性的卵
过程中生出的两个男孩,如图3-7所示.请分析回答:
(1)过程Y的细胞分裂方式是。
(2)若这两个男孩分别在两个自然环境不同的地
两者的一个相同性状.
写出两者的一个不同性状
图3-7
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