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模块综合测评(二)一、单项选择题(共15小题,每小题2分,共30分,每小题只有一个选项符合题目要求)1.和面时,最佳面团是以面团弹性弱,面筋延伸性强,面团发至原体积两倍大来判断。中种法发酵是通过向部分面粉中添加水、酵母后揉和在一起发酵制成中种面团,然后将其余食材加到一起完成主面团的搅拌,进而制作成多种口味的面包,过程如图所示。下列说法错误的是()A.面粉中的淀粉酶可使淀粉糖化成可供酵母菌利用的糖B.面团的发酵可理解为在面团中进行酵母菌等微生物的培养C.中种法两次发酵使面团含有较多的发酵生成物,面团弹性增强,烘烤后具有独特风味D.环境的温度、湿度、酵母的活性、面团的pH均会影响面包的发酵过程2.据《新华社》报道,北京航空航天大学研究团队发现取自美国的黄粉虫肠道细菌能高效降解低密度泡沫塑料[主要成分为聚苯乙烯——(C8H8)n]。研究人员为了从黄粉虫肠道内分离纯化出能降解聚苯乙烯的细菌,进行了如图所示实验。下列相关叙述正确的是()用麦麸和X饲养黄粉虫两周→解剖黄粉虫,取出肠道内容物→富集培养(扩大菌种数量)↓挑取单菌落,进行个体水平鉴定←用无菌水进行稀释涂布←在选择培养基中进行选择培养A.X为聚苯乙烯,可为黄粉虫肠道细菌提供碳源和氮源B.图示选择培养的过程中不需要加入琼脂做凝固剂C.富集培养和选择培养过程中都应将培养基调至酸性D.将涂布器放在酒精灯火焰上灼烧后直接涂布接种3.[2023广东卷]研究者拟从堆肥中取样并筛选能高效降解羽毛、蹄角等废弃物中角蛋白的嗜热菌。根据堆肥温度变化曲线(如图)和选择培养基筛选原理来判断,下列最可能筛选到目标菌的条件组合是()A.A点时取样、尿素氮源培养基 B.B点时取样、角蛋白氮源培养基C.B点时取样、蛋白胨氮源培养基 D.C点时取样、角蛋白氮源培养基4.鉴定微生物时,为了观察微生物的培养特性或测定微生物的生理生化反应性质,需要配制特定的培养基,如用石蕊牛奶培养基测定细菌的生理生化特性。石蕊牛奶培养基由牛奶和一定量的石蕊溶液(石蕊是一种酸碱指示剂,遇酸变红,遇碱变蓝,被还原时可以脱色)组成,呈现紫蓝色(pH为6.8),常被分装到试管中,灭菌冷却后置于冰箱中备用。已知牛奶中有酪蛋白、乳糖等成分。下列有关说法错误的是()A.实验操作中试管等玻璃器皿常用的灭菌方法为干热灭菌B.若培养基颜色变化为红色,则培养的可能是能分解乳糖产酸的细菌C.若培养基颜色变化为蓝色,则培养的可能是能分解酪蛋白产碱的细菌D.若培养基颜色变化为白色,则培养的是能产生凝乳酶使酪蛋白凝固的细菌5.右图表示植物细胞工程中利用愈伤组织培育植株或得到细胞产物的过程。下列叙述正确的是()A.利用花粉通过②⑤过程获得植株B的育种方法称为单倍体育种B.植物的快速繁殖技术和脱毒苗的获得均需通过①④过程C.可通过⑧过程获得人参皂苷,该过程体现了植物细胞的全能性D.③⑦过程可用于突变体的获取,原因是诱变剂使细胞发生了定向突变6.[2023江苏高三四校联考]基因组印记(通过甲基化实现受精卵中来自双亲的两个等位基因一个表达另一个不表达)阻碍了哺乳动物孤雌生殖的实现。某研究团队利用甲基化酶、去甲基化酶和基因编辑技术,改变了小鼠生殖细胞的“基因组印记”,使其“变性”,然后将一个极体注入修饰后的次级卵母细胞(类似受精作用),最终创造出“孤雌生殖”的小鼠。实验过程如下图所示。下列相关叙述正确的是()A.体外培养卵母细胞时,为防止污染,需将培养皿置于二氧化碳培养箱中进行培养B.甲基化可能会关闭基因的活性,对某些基因进行去甲基化处理有利于其表达C.“孤雌小鼠”的诞生过程没有精子参与,其基因型与提供卵母细胞的雌鼠相同D.移植后的囊胚进一步扩大,会导致滋养层破裂,胚胎从其中伸展出来7.2023年4月27日,大熊猫“丫丫”回国在社会上引起了巨大反响。自然状态下的大熊猫繁殖能力较低,曾一度濒临灭绝,我国科学家利用胚胎工程的技术手段大大提高了熊猫的繁殖率,目前我国的熊猫数量已经有2400余只。下列说法正确的是()A.对大熊猫进行体外受精时,可以把刚从卵巢中采集到的卵子与获能的精子直接受精B.桑葚胚期细胞才开始出现分化,因此桑葚胚期之前不存在基因的选择性表达C.胚胎的孵化发生在囊胚期,如果不能正常孵化,胚胎就无法继续发育D.胚胎移植前,应该用促性腺激素对供体和受体熊猫进行同期发情处理8.第三代试管婴儿技术(PGD/PGS)是对早期胚胎细胞进行基因诊断和染色体检测后再进行胚胎移植,流程如图所示。图中检测包括PGD、PGS(PGD是指胚胎植入前的基因诊断,PGS是指胚胎植入前的染色体数目和结构检测)。下列叙述正确的是()A.受精前需将采集的卵子培养至MⅡ期,精子在含Mg2+载体的获能液中获能B.PGD和PGS技术可分别用于筛选唐氏综合征和红绿色盲C.进行胚胎移植前需要对夫妻双方进行免疫检查,以防止移植后出现免疫排斥反应D.“理想胚胎”需培养至桑葚胚或囊胚期才能植入子宫9.常规细胞培养是将细胞在平面条件下培养,培养出的单层细胞在药物研究中具有一定的局限性,不同于人体内的组织结构,三维细胞培养技术是在体外为细胞提供类似体内的生长环境,使细胞形成立体的三维结构,更有利于药理学的研究。下列叙述不正确的是()A.制备细胞悬液前需对组织进行酶解处理,长时间处理效果好B.培养环境中的二氧化碳可以维持培养液的pHC.三维细胞培养技术可以用于检测某种药物对内部细胞的作用特点D.正常情况下,常规细胞培养与三维细胞培养技术均存在细胞接触抑制的现象10.可用碱裂解法从转化后的菌体中提取质粒,再通过琼脂糖凝胶电泳筛选出重组质粒。碱裂解法的原理是细胞在碱裂解液作用下裂解,同时细胞中的线性DNA、质粒DNA和蛋白质均变性,加入酸后,质粒DNA复性,线性DNA和蛋白质难以复性而析出,离心后的上清液去除杂质后得到较纯净的质粒DNA,如图1所示。将利用上述方法提取的两组样品进行琼脂糖凝胶电泳,结果如图2所示。下列说法错误的是()图1图2A.Ⅰ过程不宜剧烈振荡,以防止线性DNA断裂混入上清液中B.Ⅲ过程中冷酒精的作用是使DNA析出C.2、3结果对应的样品分别为重组质粒、非重组质粒D.DNA分子具有可解离的基团,在电场中会带上正电荷或负电荷11.[2023新课标卷]某同学拟用限制酶(酶1、酶2、酶3和酶4)、DNA连接酶为工具,将目的基因(两端含相应限制酶的识别序列和切割位点)和质粒进行切割、连接,以构建重组表达载体。限制酶的切割位点如图所示。下列重组表达载体构建方案合理且效率最高的是()A.质粒和目的基因都用酶3切割,用E.coliDNA连接酶连接B.质粒用酶3切割、目的基因用酶1切割,用T4DNA连接酶连接C.质粒和目的基因都用酶1和酶2切割,用T4DNA连接酶连接D.质粒和目的基因都用酶2和酶4切割,用E.coliDNA连接酶连接12.噬菌体展示技术(如下图)可将某些蛋白质呈递至噬菌体表面,便于对目标蛋白进行筛选、鉴定。以下对该技术的分析不正确的是()A.用含有碳源、氮源等营养物质的培养基培养噬菌体B.建立噬菌体展示库需限制性内切核酸酶和DNA连接酶C.可利用抗原—抗体杂交技术筛选目标蛋白D.经诱变及多轮筛选可能获得与抗原亲和力更强的抗体及其基因13.生物学实验经常需要控制温度才能呈现应有的实验结果。下列叙述不正确的是()A.PCR时,需将温度下降到50℃左右,让引物与单链相应互补序列结合B.利用二苯胺试剂鉴定溶解于NaCl溶液的DNA时,需要沸水浴加热C.做电泳所需的缓冲液和酶应在-20℃的低温下储存D.PCR时,需将反应体系的温度控制在70~75℃以使DNA解旋14.为使玉米获得抗除草剂性状,需进行如图所示的操作。报告基因的产物能催化无色物质K呈现蓝色。转化过程中,愈伤组织表面常残留农杆菌,导致未转化愈伤组织也可能在选择培养基上生长。下列叙述不正确的是()A.筛选1需要用含氨苄青霉素和无色物质K培养基筛选出蓝色菌落的农杆菌B.T-DNA可将目的基因G转移并整合到愈伤组织细胞的染色体DNA上C.筛选2用无色物质K处理愈伤组织,筛选出呈现蓝色的组织D.为检测植株A是否具有抗除草剂性状,可用相应除草剂喷洒待测植株15.实验人员将一段外源DNA片段(包含约850个基因)与丝状支原体(一种原核生物)的DNA进行重组后,植入大肠杆菌,制造出一种“新的生命”。该生物能够正常生长、繁殖。下列有关该技术应用的叙述,错误的是()A.该技术可以制造某些微生物,用于生产药品、制造染料、降解有毒物质等B.由于存在生殖隔离,因此人造生命进入自然界并不会破坏生物多样性C.人造生命扩散到自然界,有可能造成环境安全性问题D.此项技术可能被用来制造生物武器,从而危及人类安全二、不定项选择题(共5小题,每小题3分,共15分,每小题有一个或多个选项符合题目要求,全部选对得3分,选对但不全的得1分,有选错的得0分)16.即墨老酒以黄米为主要原料,经蒸煮、加曲、糖化、发酵、过滤、煎酒(90℃)过程酿造而成。下列说法正确的是()A.蒸煮能在灭菌的同时破坏细胞结构,促进淀粉的释放B.加曲前需要加水浸曲,目的是活化曲中的微生物C.后期发酵过程中酵母菌进行无氧呼吸产生酒精和CO2D.煎酒可使酒体中的蛋白质变性,同时杀死酒体中的全部微生物17.[2023江苏泰州高二阶段测试]利用山金柑愈伤组织细胞(2n)和早花柠檬叶肉细胞(2n)进行体细胞杂交可以得到品质高、抗逆性强的杂种植株。下图是7组杂种植株核DNA和线粒体DNA来源鉴定的结果。下列分析正确的是()A.获得的融合原生质体需放在无菌水中以防止杂菌污染B.用灭活病毒诱导两种细胞原生质体的融合依赖于细胞膜的流动性C.可通过观察融合后细胞的颜色对杂种细胞进行初步筛选D.杂种植株是二倍体,其核基因来自早花柠檬,线粒体基因来自山金柑18.诱导多能干细胞的应用前景优于胚胎干细胞,下列有关图中实验研究的叙述错误的是()A.已分化的T细胞、B细胞等也能通过①获得诱导多能干细胞B.过程①的效果相当于植物组织培养技术中的脱分化C.将②所得的细胞移植回甲小鼠体内不会发生免疫排斥反应,是因为基因型完全相同D.过程③得Z细胞还需通过接种病毒进行个体生物学水平的检测19.[2023江苏泰州中学高二月考]CD47是一种在多种细胞中广泛表达的跨膜糖蛋白,能够与巨噬细胞膜上的受体结合,并抑制其吞噬作用。结肠癌等多种肿瘤细胞表面的CD47含量比正常细胞高1.6~5倍。科研人员尝试合成抗CD47的单克隆抗体,并进一步探究其对巨噬细胞吞噬作用的影响。过程如下图所示,下列分析错误的是()注:吞噬指数越大,代表吞噬能力越强。A.可用灭活病毒诱导②过程两种细胞融合,该方法也适用于植物体细胞的杂交B.③过程可利用CD47糖蛋白筛选出目标杂交瘤细胞C.抗CD47单克隆抗体与巨噬细胞结合,增强其吞噬作用D.在肿瘤细胞培养液中加入抗CD47抗体将抑制肿瘤细胞的增殖20.[2023江苏南京师范大学附中高二期中]研究人员用图1中质粒和图2中含目的基因的片段构建重组质粒(图中标注了相关限制酶切割位点),将重组质粒导入大肠杆菌后进行筛选及PCR鉴定。以下叙述正确的是()图1图2A.构建重组质粒的过程应选用BamHⅠ和HindⅢ两种限制酶B.使用DNA连接酶将酶切后的质粒和目的基因片段进行重组C.能在添加四环素的培养基上生存一定是含有重组质粒的大肠杆菌D.利用PCR鉴定含目的基因的大肠杆菌时应选用引物甲和引物丙三、非选择题(共5小题,共55分)21.(11分)乳酸菌是著名的“长寿益生菌”,具有改善胃肠功能,抑制腐生菌生长,调节胃肠菌群平衡,提高免疫力,降低血清胆固醇等多种功能。培养与鉴定乳酸菌常用MRS培养基,其配方如下表,回答下列问题。成分牛肉膏蛋白胨酵母膏葡萄糖乙酸钠柠檬酸二铵含量8.0g10.0g4.0g20.0g5.0g2.0g成分Na2HPO4MgSO4MnSO4琼脂碳酸钙H2O含量2.0g0.2g0.05g20.0g30.0g加水定容到1L(1)分析表格可知,该MRS培养基是(填“固体”或“液体”)培养基。葡萄糖为乳酸菌的生长繁殖提供,培养基中加入碳酸钙的主要目的是。
(2)乳酸菌的含量是衡量酸奶品质的重要指标(国家标准为2×106个/mL),为调查市场上A、B两款畅销酸奶产品中乳酸菌活菌数量,甲、乙两名同学分别独自进行了如下实验操作步骤:第一步,取1mL酸奶注入装有XmL无菌水的试管中,充分混合均匀,得到稀释10倍的菌液,依上述方法逐步稀释到103倍;第二步,从稀释103倍的试管中取菌液0.1mL均匀涂布在MRS培养基平板上,置于37℃恒温箱培养24~48h;第三步,观察菌落的特征和透明圈,统计乳酸菌的菌落数,得到如下实验结果:酸奶产品A款B款甲同学实验平板12345678菌落数/个02402382420152150148乙同学实验平板①②③④①②③④菌落数/个2226526826218189189186①X为,菌落的特征主要包括菌落的形态、大小、等方面,不同菌种的菌落特征一般不同,具有菌种特异性。
②乙同学的实验结果能否作为判断两款酸奶产品中乳酸菌数目是否符合国家标准的依据?,原因是。
③根据甲同学的实验结果,请你判断两款酸奶产品是否符合国家标准并说明理由:。
22.(12分)Ⅰ.紫花苜蓿是全世界栽培历史最悠久、利用最广泛的豆科牧草,但易造成家畜鼓胀病。百脉根富含单宁,单宁可与植物蛋白质结合,不引起家畜采食后鼓胀。为培育抗鼓胀病的新型牧草,科研人员利用野生型清水紫花苜蓿和里奥百脉根为材料进行了实践研究。研究主要流程如下图(注:IOA可抑制植物细胞呼吸第一阶段,R-6G可阻止线粒体的功能)。(1)在制备两种植物原生质体时,先将两种细胞分别置于0.5~0.6mol/L的甘露醇溶液中,使细胞在较高渗透压环境下处于较稳定状态,从而有利于用去除细胞壁。两种细胞融合成功的标志是。
(2)①过程可使用的物理方法有法(答出一种即可),步骤②为。经过步骤②③到形成再生植株,体现的主要原理是。
(3)利用图示技术进行育种的优点是。
Ⅱ.在体细胞克隆牛的培育过程中,请回答以下问题。(4)采集卵子之前,需给母牛注射适量的,以增加排卵。卵母细胞需培养到期。
(5)胚胎移植前,需要对代孕母牛进行处理,为即将移入的胚胎提供合适的生理环境。胚胎移植的实质是。胚胎分割可以增加胚胎数量,在对囊胚进行分割时注意内细胞团要均等分割。
23.(8分)科研人员采用转基因体细胞克隆技术获得转基因绵羊,以便通过乳腺生物反应器生产人凝血因子Ⅸ医用蛋白,该技术的操作过程如图所示。回答下列问题。(1)由过程①获得的A为,将获得的人凝血因子Ⅸ基因导入成纤维细胞常用的方法是。
(2)在核移植之前,必须先去掉受体卵母细胞的核,目的是。培养经过核移植获得的重组细胞的培养基中,除营养物质外,还需要提供(答出2点)等环境条件。
(3)胚胎移植时,一般选择发育至阶段的胚胎进行移植。
(4)经培育获得的转基因绵羊除能分泌人凝血因子Ⅸ外,其与核供体动物的性状基本相似,但又不完全相同,从遗传物质角度分析,其原因是。
24.(12分)[2023浙江6月选考]赖氨酸是人体不能合成的必需氨基酸,而人类主要食物中的赖氨酸含量很低,利用生物技术可提高食物中赖氨酸含量。回答下列问题。(1)植物细胞合成的赖氨酸达到一定浓度时,能抑制合成过程中两种关键酶的活性,导致赖氨酸含量维持在一定浓度水平,这种调节方式属于。根据这种调节方式,在培养基中添加,用于筛选经人工诱变的植物悬浮细胞,可得到抗赖氨酸类似物的细胞突变体,通过培养获得再生植株。
(2)随着转基因技术与动物细胞工程结合和发展,2011年我国首次利用转基因和体细胞核移植技术成功培育了高产赖氨酸转基因克隆奶牛。其基本流程为:①构建乳腺专一表达载体。随着测序技术的发展,为获取富含赖氨酸的酪蛋白基因(目的基因),可通过检索获取其编码序列,用化学合成法制备得到。再将获得的目的基因与含有乳腺特异性启动子的相应载体连接,构建出乳腺专一表达载体。
②表达载体转入牛胚胎成纤维细胞(BEF)。将表达载体包裹到磷脂等构成的脂质体内,与BEF膜发生,表达载体最终进入细胞核,发生转化。
③核移植。将转基因的BEF作为核供体细胞,从牛卵巢获取卵母细胞,经体外培养及去核后作为。将两种细胞进行电融合,电融合的作用除了促进细胞融合,同时起到了重组细胞发育的作用。
④重组细胞的体外培养及胚胎移植。重组细胞体外培养至,植入代孕母牛子宫角,直至小牛出生。
⑤检测。DNA水平检测:利用PCR技术,以非转基因牛耳组织细胞作为阴性对照,以为阳性对照,检测到转基因牛耳组织细胞中存在目的基因。RNA水平检测:从非转基因牛乳汁中的脱落细胞、转基因牛乳汁中的脱落细胞和转基因牛耳组织细胞,提取总RNA,对总RNA进行处理,以去除DNA污染,再经逆转录形成cDNA,并以此为,利用特定引物扩增目的基因片段。结果显示目的基因在转基因牛乳汁中的脱落细胞内表达,而不在牛耳组织细胞内表达,原因是什么?
。
25.(12分)黄瓜花叶病毒能感染多种植物,对烟草的危害尤其严重。病毒的Cu-4基因表达所形成的蛋白是子代病毒形成和释放的关键蛋白。研究人员利用农杆菌转化法获得能表达Cu-4基因反义RNA的转基因烟草,反义RNA与Cu-4基因转录获得的mRNA互补结合形成双链RNA,阻止了mRNA的翻译,从而获得了抵抗该病毒的能力。在Cu-4基因(A链是模板链)一侧连接了带有细菌启动子的四环素抗性基因(在植物细胞中该基因会被完整切除),如图1所示。图2是Ti质粒相关基因图谱。图1图2备注:Cu-4基因长度为300bp,tet'基因长度为500bp。Ⅰ~Ⅳ是四种引物。LB和RB是T-DNA的界,EcoRⅠ和XhoⅠ是两种限制酶,切割后形成的黏性末端不互补。Piss和Tkc是仅在植物细胞中发挥功能的启动子和终止子。tet'和amp'分别是四环素抗性基因和氨苄青霉素抗性基因。所用农杆菌不具有氨苄青霉素、四环素和潮霉素抗性。(1)人工合成如图1所示的DNA片段后,利用引物组合(A.引物Ⅰ和Ⅳ;B.引物Ⅱ和Ⅲ;C.引物Ⅰ和Ⅲ;D.引物Ⅱ和Ⅳ)进行PCR扩增,为使图1所示的DNA片段能与载体正确连接,在引物的5'端分别添加酶的识别序列,将Ti质粒导入农杆菌后,可使用含有的培养基进行筛选。
(2)在将农杆菌接种在烟草叶片前用砂纸轻微摩擦烟草叶片,目的是。接种一段时间后,将烟草叶片酶解,获取分散的叶肉细胞。将叶肉细胞培养在含有潮霉素的培养基中扩增培养,其中潮霉素的作用是。
(3)提取叶肉细胞的总DNA,酶切后用相应的PCR引物进行扩增,电泳后若观察到长度的片段,则说明所需的基因导入植物细胞中。
(4)将具有黄瓜花叶病毒抗性的烟草进行自然种植时,需考虑转基因作物的安全性问题。研究人员发现将目的基因转移到植物细胞线粒体或叶绿体中可降低基因漂移发生的风险,原理是。
模块综合测评(二)1.C一般能被细胞直接吸收的糖类是单糖,淀粉酶可催化淀粉水解为葡萄糖,酵母菌能直接利用葡萄糖,所以面粉中的淀粉酶可使淀粉糖化成可供酵母菌利用的糖,A项正确;面团的发酵就是酵母菌的繁殖、大部分糖的分解和代谢物的生成过程,可理解为在面团中进行酵母菌等微生物的培养,B项正确;最佳面团是以面团弹性弱,面筋延伸性强,面团发至原体积两倍大来判断,中种法两次发酵使得发酵时间更长,令面团的特性更加成熟,这种面团更好,弹性弱,所以中种法两次发酵不能使面团弹性增强,C项错误;环境的温度、湿度、酵母的活性、面团的pH均会影响酵母菌的繁殖和生命活动,从而影响面包的发酵过程,D项正确。2.CX为聚苯乙烯,可为黄粉虫肠道细菌提供碳源,但不能提供氮源,A项错误;一般选择培养基为固体培养基,故需要加入琼脂作为凝固剂,B项错误;该细菌生活在肠道中,所以需要将培养基调至酸性,C项正确;将涂布器放在酒精灯火焰上灼烧后不可直接涂布接种,要冷却一会,待温度下降后进行涂布,否则会将细菌杀死,D项错误。3.D本实验的目的是筛选能高效降解角蛋白的嗜热菌,因此既要耐高温,又要能够高效降解角蛋白,所以在C点取样,并且以角蛋白氮源培养基进行选择培养。4.D实验操作中对玻璃器皿常用的灭菌方法为干热灭菌,A项正确;依据题意可知,若培养的细菌能分解乳糖产酸,会使培养基变红,若培养的细菌能分解酪蛋白产碱,会让培养基变蓝,若培养的细菌能产生还原剂使石蕊还原,会让培养基变白,但培养的细菌不一定能产生凝乳酶使酪蛋白凝固,B、C两项正确,D项错误。5.B利用花粉通过②⑤⑥(染色体数目加倍)过程获得植株C的育种方法称为单倍体育种,A项错误;植物的快速繁殖技术和脱毒苗的获得均需通过①④过程获得植株,均是植物细胞工程的应用,B项正确;细胞全能性是指发育为完整个体或分化为各种细胞的潜能,⑧过程得到的是细胞产物,未体现植物细胞的全能性,C项错误;③⑦过程可用于突变体的获取,原因是细胞发生了基因突变,但不是诱变剂导致的,且突变是不定向的,D项错误。6.B动物细胞培养时加入抗生素,防止培养过程中的污染,A项错误;由题干可知,基因组印记是通过甲基化使一个基因不表达,对某些基因进行去甲基化处理有利于其表达,然后促进了细胞的全能性的表现,获得“孤雌小鼠”,B项正确;“孤雌小鼠”是由两个生殖细胞(修饰后的次级卵母细胞和极体)结合后发育形成的,同时由于配子在形成过程中会经历基因重组,或发生基因突变,将导致两个生殖细胞结合后的“孤雌小鼠”的基因型不一定与提供卵母细胞的雌鼠相同,C项错误;囊胚进一步扩大,会导致透明带破裂,胚胎从其中伸展出来,这一过程叫做孵化,D项错误。7.C卵巢中采集的卵子需要培养到MⅡ中期才能进行受精,A项错误;囊胚期胚胎出现了内细胞团和滋养层的分化,而基因的选择性表达一直贯穿整个生命历程,B项错误;囊胚进一步扩大,会导致透明带破裂,胚胎从其中伸展出来,这一过程叫做孵化,胚胎的孵化发生在囊胚期,如果不能正常孵化,胚胎就无法继续发育,C项正确;同期发情处理使用的是孕激素等激素而不是促性腺激素,促性腺激素可用于超数排卵,D项错误。8.D体外受精前,需要将所采集到的卵母细胞在体外培养至MⅡ期,精子在含Ca2+载体的获能液中获能,A项错误;PGD是指胚胎植入前的基因诊断,PGD可用于筛选红绿色盲,PGS是指胚胎植入前的染色体数目和结构检测,PGS可用于筛选唐氏综合征,B项错误;受体子宫对外来胚胎几乎不发生免疫反应,因此进行胚胎移植前不需要对夫妻双方进行免疫检查,C项错误;早期胚胎需要发育至桑葚胚或囊胚期才能进行移植,即“理想胚胎”需培养至桑葚胚或囊胚才能植入子宫,D项正确。9.A制备细胞悬液前需用胰蛋白酶或胶原蛋白酶对组织进行处理,但长时间处理会损伤细胞结构,因此需要限制处理时间,A项错误;气体环境为95%空气(细胞代谢必需的)、5%的CO2(维持培养液的pH),B项正确;三维细胞培养技术可使细胞形成立体的三维结构,可以用于检测某种药物对内部细胞的作用,C项正确;正常情况下,常规细胞培养和三维细胞培养都存在接触抑制的现象,D项正确。10.D线性DNA易受到外力的影响而断裂,故Ⅰ过程不宜剧烈振荡,以防止线性DNA断裂混入上清液中,A项正确;DNA不溶于酒精,Ⅲ过程中冷酒精的作用是使DNA析出,B项正确;1为空白对照,3中质粒大小与1相同,因此3为非重组质粒,2为重组质粒,C项正确;DNA分子具有可解离的基团,在一定的pH下,这些基团可以带上正电荷或负电荷,在电场的作用下,这些带电分子会向着与它所带电荷相反的电极移动,D项错误。11.CE.coliDNA连接酶不能连接具有平末端的DNA片段,A项错误。质粒用酶3切割,目的基因用酶1切割,得不到相同的黏性末端,所以二者不能连接,B项错误。质粒和目的基因都用酶1和酶2切割,用T4DNA连接酶能将目的基因和质粒连接起来,且避免了目的基因和质粒的自身环化,所以效率最高,C项正确。酶4会破坏抗生素抗性基因,即标记基因,D项错误。12.A噬菌体是病毒,营寄生生活,用培养基无法培养噬菌体,需要用相应的宿主细胞培养,A项错误;建立噬菌体展示库需将外源DNA片段插入噬菌体DNA的合适位置,需要限制酶切割和DNA连接酶连接两个DNA片段,B项正确;向构建的噬菌体展示库中加入与目标蛋白相应的抗体,进行抗原—抗体杂交,若有杂交带出现,表明目标蛋白已经出现,C项正确;结合题图可知,利用抗原—抗体杂交,根据杂交信号强弱判断抗原抗体结合的亲和力,继而经诱变及多轮筛选可能获得与抗原亲和力更强的抗体及其基因,D项正确。13.D在复性过程中,PCR反应体系中的温度会被降低至50℃左右,使得引物能够与DNA单链结合,A项正确;DNA在沸水浴条件下,与二苯胺反应呈蓝色,因此可利用二苯胺溶液鉴定DNA,B项正确;进行DNA片段的扩增及电泳鉴定实验所需的缓冲液和酶应分装成小份,并在-20℃的低温下储存,以防止酶变性失活,C项正确;PCR时需将反应体系先加热至90℃以上,此操作的目的是使目的基因解旋,D项错误。14.A氨苄青霉素抗性基因和报告基因均可作为标记基因,鉴别并筛选含有目的基因的细胞,但报告基因中的内含子转录产生的RNA序列在农杆菌中不能被切除,“报告基因”的表达产物不具有相应的活性,无法催化无色物质K呈现蓝色,所以含氨苄青霉素的培养基能将成功导入表达载体的农杆菌筛选出来,而含无色物质K的培养基却不能筛选出成功导入表达载体的农杆菌,A项错误;农杆菌中的Ti质粒上的T-DNA可转移至受体细胞,并且整合到受体细胞染色体的DNA上,根据农杆菌的这一特点,将目的基因(基因G)插入Ti质粒的T-DNA上,通过农杆菌的转化作用,就可以把目的基因(基因G)整合到愈伤组织细胞的染色体DNA上,B项正确;根据题干信息可知,报告基因的产物能催化无色物质K呈现蓝色,因此筛选2需要用无色物质K处理愈伤组织并筛选出呈现蓝色的组织,C项正确;为从个体水平上检测图中玉米植株A是否具有抗除草剂性状,可采用的方法是用相应除草剂喷洒待测玉米植株,D项正确。15.B通过导入不同的目的基因,可用于生产药品、制造染料、降解有毒物质,A项正确;“新的生命”是一个新的物种,由于其没有天敌,进入自然界后,会破坏生物的多样性,B项错误;人造生命扩散到自然界,竞争能力强,因此能成为“入侵的外来物种”,有可能造成环境安全性问题,C项正确;利用基因工程技术,在一些不致病的微生物体内插入致病基因,或在一些致病的细菌或者病毒中插入能对抗普通疫苗或药物的基因,就会培育出新的致病微生物或新的抗药性增强的致病微生物,这些微生物可制成生物武器,D项正确。16.ABC蒸煮的目的是使原料在高温下灭菌,同时使细胞结构破裂,淀粉被释放出来,淀粉由颗粒状变为溶胶状态,A项正确;加曲前需要加水浸曲,加水浸曲是将酵母菌活化,自由水增加使酵母菌新陈代谢旺盛,B项正确;在无氧条件下,酵母菌能进行酒精发酵,后期发酵过程中酵母菌进行无氧呼吸产生酒精和CO2,C项正确;煎酒的温度在90℃,可使酒体中的蛋白质变性,但只能杀死酒体中的部分微生物,D项错误。17.CD获得的融合原生质体不可放置在无菌水中,否则会导致吸水涨破,A项错误;病毒可诱导动物细胞融合,但不能诱导原生质体融合,B项错误;由于愈伤组织细胞不含叶绿体,而叶肉细胞含有叶绿体,因此可通过观察融合后细胞的颜色进行初步筛选,C项正确;由图可知,杂种植株的线粒体基因只来自山金柑,核基因只来自早花柠檬,因此仍是二倍体,D项正确。18.CD诱导多能干细胞由已分化的纤维母细胞转化而来,已分化的T细胞、B细胞等也能被诱导获得诱导多能干细胞,A项正确;①过程将已经分化的细胞培养成分化程度低的细胞过程,类似于植物组织培养技术中的脱分化,B项正确;由题图可知,由于存在“诱导基因”这一步骤,诱导多能干细胞中的遗传物质发生了改变,故②所得的细胞与受体细胞的基因型并不完全相同,C项错误;③表示动物细胞融合成杂交瘤细胞,还需经过分子水平的抗体检测,呈阳性的杂交瘤细胞才进行大量培养,D项错误。19.ACD植物体细胞杂交过程可用物理或化学法诱导,但不能用灭活的病毒诱导,灭活病毒可诱导动物细胞的融合,A项错误;筛选步骤的目的就是从未融合的B淋巴细胞、两个B淋巴细胞融合形成的细胞、未融合的骨髓瘤细胞、两个骨髓瘤细胞融合形成的细胞及骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合形成的细胞所组成的细胞群中筛选出骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合形成的细胞,可利用CD47糖蛋白特异性结合的功能筛选目标杂交瘤细胞,B项正确;实验组中加入了单克隆抗体,抗体与肿瘤细胞表面的CD47发生特异性结合,从而解除CD47对巨噬细胞的抑制作用,吞噬细胞的吞噬指数显著高于对照组,C项错误;利用抗CD47抗体抑制肿瘤细胞表面的CD47蛋白的活性,可促进巨噬细胞吞噬肿瘤细胞,不能抑制肿瘤细胞的增殖,D项错误。20.BD选择的限制酶应在目的基因两端存在识别位点,但BamHⅠ可破坏质粒中的两种标记基因,因此只能选BclⅠ和HindⅢ两种限制酶切割,A项错误;酶切后的质粒和目的基因片段要用DNA连接酶连接,构建重组载体,B项正确;能在添加四环素的培养基上生存的也可能是只含有质粒的大肠杆菌,C项错误;PCR技术要求两种引物分别和目的基因的两条单链结合,沿相反的方向合成子链,故利用PCR鉴定目的基因时所用的引物为引物甲和引物丙,D项正确。21.答案(1)固体碳源中和乳酸菌代谢过程中产生的乳酸和利于乳酸菌的识别和分离(2)①9颜色、光泽、质地②不能平板被杂菌污染③A款符合国家标准,因为其乳酸菌含量为2.4×106个/mL,高于国家标准,B款不符合国家标准,因为其乳酸菌含量为1.5×106个/mL,低于国家标准解析(1)分析表格可知,此实验需要对菌落进行计数,并且有琼脂作为凝固剂,故该培养基是固体培养基。葡萄糖为乳酸菌的生长繁殖提供碳源,分离纯化所用固体培养基中因含有碳酸钙而不透明,乳酸菌产生的乳酸能溶解培养基中的碳酸钙形成溶钙环,故培养基中加入碳酸钙的主要目的是中和乳酸菌代谢过程中产生的乳酸和利于乳酸菌的识别和分离。(2)①将菌液稀释10倍,即酸奶样品体积∶无菌水体积=1∶9,故X为9,菌落的特征主要包括菌落的形态、大小、边缘、光泽、质地、颜色等方面。②因为乙同学的实验结果中作为对照的平板1出现菌落,说明平板被杂菌污染,结果不可靠,所以不能作为判断标准依据。③根据甲同学的实验结果,计算出A款酸奶乳酸菌含量=(240+238+242)÷3÷0.1×103=2.4×106(个/mL),B款酸奶乳酸菌含量=(150+152+148)÷3÷0.1×103=1.5×106(个/mL),根据国家标准(2×106个/mL),A款酸奶符合国家标准,B款不符合。22.答案(1)纤维素酶和果胶酶杂种细胞再生出新的细胞壁(2)电融合/离心脱分化植物细胞具有全能性(3)打破生殖隔离,实现远缘杂交育种(4)(外源)促性腺激素减数分裂Ⅱ中(MⅡ)(5)同期发情早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移解析(1)植物细胞壁的成分是纤维素和果胶,进行植物细胞融合时,常用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁。杂种细胞再生出新的细胞壁是植物细胞融合成功的标志。(2)细胞融合常用的物理方法是电融合法和离心法。步骤②由杂种细胞培育为愈伤组织的过程是脱分化,经过脱分化和再分化形成再生植株,体现了植物细胞具有全能性。(3)植物体细胞杂交技术可打破生殖隔离,实现远缘杂交育种。(4)在采集卵子之前,需要给卵子供体注射适量的促性腺激素,以增加排卵。从卵巢中吸取的卵子,需在体外培养到减数分裂Ⅱ中期才能进行核移植,再通过显微操作法去除细胞核,得到去核卵子。(5)胚胎移植前,为即将移入的胚胎提供合适的生理环境,需要对代孕母牛进行同期发情处理。胚胎移植的实质是早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移。23.答案(1)含目的基因的表达载体显微注射法(2)保证核遗传物质来自含目的基因的成纤维细胞无菌无毒、温度、pH和渗透压(3)桑葚胚或囊胚(4)卵母细胞的细胞质中的遗传物质会对转基因绵羊的性状产生影响解析(1)要想目的基因只在乳腺组织中表达,在构建基因表达载体时,需要将人的基因和乳腺组织特异性表达的启动子等调控组件重组在一起,过程①获得的A为含目的基因的表达载体;将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法。(2)在核移植之前必须先去掉受体卵细胞的核,目的是保证核遗传物质来自含目的基因的成纤维细胞,培养经过核移植获得重组细胞的培养基中,除营养物质外,还应提供无菌无毒、温度、pH和渗透压等环境条件。(3)胚胎移植时,一般选择发育至桑葚胚或囊胚阶段的胚胎进行移植,为使代孕母羊能接受外来胚胎,一般对其进行同期发情处理。(4)克隆动物的遗传物质来自供核的亲本和提供卵母细胞(质)的亲本,因此克隆动物性状与供体动物性状不完全相同,从遗传物质的角度来说,是因为卵母细胞的细胞
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