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文档简介
《发酵工程问题清单》2.1微生物的基本培养技术什么是微生物?微生物是难以用肉眼观察的微小生物的统称,包括细菌、真菌、病毒及一些原生生物等。实验室培养微生物的两个条件是什么?①为人们需要的微生物提供适宜的营养和环境条件,②确保其他微生物无法混入,并将需要的微生物分离出来。什么是培养基?人们按照微生物对营养物质的不同需求,配制出供其生长繁殖的营养基质-培养基,用于培养、分离、鉴定、保存微生物或积累其代谢产物。按照物理性质,培养基分为哪些类型?特点与作用分别是什么?按照物理性质,培养基分为固体培养基、液体培养基。固体培养基含凝固剂(如琼脂),呈固体状体,常用于微生物的分离与鉴定、活菌计数、菌种保藏。液体培养基不含凝固剂,呈液体状态,常用于工业产生。在液体培养基加入琼脂后制成的琼脂固体培养基,是实验室最常用的培养基之一。培养基的营养构成是什么?培养基的主要营养物质:水、碳源(提供碳元素的物质)、氮源(提供氮元素的物质)、无机盐。在提供上述几种营养物质的基础上,培养基还需要满足微生物对PH、特殊营养物质及氧气的需求。例如,在培养乳酸菌时,需要在培养基中添加维生素;在培养霉菌时,需要将培养基调至酸性;在培养细菌时,需要将培养基调至中性或弱碱性;在培养厌氧微生物时,需要提供无氧条件。获得纯净的微生物的关键是什么?防止杂菌污染无菌技术主要包括什么?消毒和灭菌什么是消毒?消毒的主要方法是什么?应用范围是?①消毒是指用较为温和的物理、化学或生物等方法杀死物体表面或内部一部分微生物。②消毒的主要方法有:煮沸消毒法、巴氏消毒法、化学药物消毒、紫外线消毒。煮沸消毒:在100℃煮沸5-6分钟;家庭餐具等生活用品可以使用煮沸消毒巴氏消毒:在62-65℃消毒30min或80-90℃处理30s-1min,可以杀死牛奶中绝大多数微生物,并且不破坏牛奶的营养成分;牛奶、果汁、酱油等不耐高温的液体可以使用巴氏消毒化学药物消毒:如使用体积分数为70%的酒精来擦拭实验者双手;用氯气消毒水源;紫外线消毒前,适量喷洒石炭酸或煤酚皂等消毒液,可加强消毒效果紫外线消毒:用紫外线消毒30min;杀死物体表面或空气中的微生物。什么是灭菌?什么是芽孢和孢子?灭菌则是指用强烈的理化方法杀死物体内外所有的微生物,包括芽孢和孢子。芽孢是某些细菌在一定条件下,在细胞里面形成的休眠体,当环境适宜,芽孢可以萌发形成一个细菌;孢子是一种繁殖体,可以直接长成新个体。10.灭菌的主要方法是什么?应用范围是?灭菌的主要方法有:湿热灭菌、干热灭菌、灼烧灭菌湿热灭菌:湿热灭菌中,高压蒸汽灭菌的效果最好,实验室常用的高压蒸汽灭菌锅是在100kPa、121℃的条件下,维持15-30min来灭菌的;培养基等利用这种方法来灭菌干热灭菌:将灭菌物体放在密闭容器如干热灭菌箱,在160-170℃的热空气中维持2-3h;耐高温和需要保持干燥的物品,如玻璃器皿、金属用具,可以采用这种方法灭菌灼烧灭菌:直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧,可以迅速彻底地灭菌;如微生物的接种工具,如涂布器、接种环、接种针或其他金属用具。11.什么是培养物?在微生物学中,将接种于培养基内,在合适条件下形成的含特定种类微生物的群体称为培养物。12.什么是纯培养物?由单一体繁殖所获得的微生物的群体称为纯培养物,获得纯培养物的过程就是纯培养。13.微生物的纯培养包括哪些步骤?制备培养基、灭菌、接种、分离和培养等步骤。什么是菌落?分散的微生物在适宜的固体培养基表面或内部可以繁殖形成肉眼可见的、有一定形态结构的子细胞群体,这就是菌落。获得单菌落的方法?平板划线法或稀释涂布平板法酵母菌纯净培养的步骤是?制备培养基→接种和分离酵母菌→培养酵母菌制备培养基的要点:①步骤:配制培养基→灭菌→倒平板②倒平板注意事项:温度在50℃左右;在酒精灯火焰附近操作;冷凝后将平板倒置接种和分离酵母菌:通过接种环在固体培养基表面连续划线的操作,将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基表面平板冷凝后,为什么将平板倒置?防止皿盖上冷凝水落入培养基,避免培养皿中的水分过快挥发平板划线操作时,取菌种前、每次划线前、接种结束后灼烧接种环的目的是什么?取菌种前:杀死接种环上原有的微生物每次划线前:杀死上次残留的菌种,使下一次划线的菌种直接来源于上次划线的末端,从而使每次划线时菌种数目逐渐减少,直至得到单个细胞接种结束后:杀死接种环上残留的菌种,避免细菌污染环境和感染操作者为什么划线时,最后
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