仿制药生物等效性试验设计崔一民-北京大学省公开课一等奖全国示范课微课金奖课件

仿制药生物等效性试验设计崔一民北京大学第一医院E-mail:cuiymzy@126.com第1页生物等效性（BE）概念

生物等效性试验是指用生物利用度研究方法，以药代动力学参数为指标，比较同一个药品相同或者不一样剂型制剂，在相同试验条件下，其活性成份吸收程度和速度有没有统计学差异人体试验。生物等效性试验在药品研究开发不一样阶段，其作用可能稍有差异，但究其根本，生物等效性试验目标都是经过测定血药浓度方法，来比较不一样制剂对药品吸收影响，也即药品不一样制剂之间差异，以此来推测其临床治疗效果差异可接收性，即不一样制剂之间可替换性。第2页BE研究适用范围改变国内已上市销售药品剂型，但不改变给药路径口服制剂或其它相关制剂（化学药）。已经有国家药品标准制剂（化学药）。改变口服药品制剂处方或工艺补充申请其它第3页BE研究方法通常意义BE研究是指经过测量不一样时间点生物样本（如血浆或尿液）中药品浓度，取得药品浓度-时间曲线来反应药品从制剂中释放吸收到体循环中动态过程。并经过适当计算得到曲线下面积（AUC）、达峰浓度（Cmax）、达峰时间（Tmax）等参数后，经过统计学比较判断两制剂是否生物等效。

第4页生物样本中药品浓度测定建立生物样本中药品浓度定量分析方法是进行生物等效性研究关键之一。开始入选受试者前，应建立可靠和可重现药品浓度定量分析方法。第5页

方法学建立和考查内容特异性；标准曲线和定量范围；定量下限；精密度与准确度；样品稳定性；提取回收率。第6页普通制剂随机、交叉、单剂量、两周期试验设计控、缓释制剂随机、交叉、单剂量和多剂量、两周期试验设计生物等效性临床试验设计第7页生物等效性临床试验设计交叉设计是当前应用最多最广方法。把受试对象随机分为两组，按一定次序处理，一组受试者先服用受试制剂，后服用参比制剂；另一组受试者先服用参比制剂，后服用受试制剂。两次序间应有足够长间隔时间，为清洗期。第8页生物等效性临床试验设计为何采取普通采取交叉设计？对每位受试者都连续接收两次或屡次处理，相当于本身对照，能够将制剂原因对药品吸收影响与其它原因区分开来，降低了不一样试验周期和个体间差异对试验结果影响。

第9页可能出现其它设计方案在进行两种以上剂型比较时，也能够进行多周期试验设计。在试验药品半衰期过长时，可进行平行试验设计。生物等效性临床试验设计第10页单剂量给药交叉试验设计

给药20天-7天1天3天

研究日

筛查

-1天入院

出院入院

14天给药出院15天17天随访第一周期第二周期A组服试验药品B组服对照药品A组服对照药品B组服试验药品清洗期第11页单剂量给药平行试验设计

给药8天-7天1天研究日

筛查

-1天入院

出院随访PKA组服试验药品B组服对照药品第12页为何要做血药浓度到达稳态时生物等效性比较？观察制剂控释或缓释特征是否一致。

生物等效性临床试验设计第13页受试者例数？

SFDA指导标准：18~24例依据统计学把握度进行计算对一些变异性大药品可能需要适当增加例数生物等效性临床试验设计第14页假如试验药品是前药怎么办？

标准上以原药为基础进行等效性研究。在原药代谢很快、药代动力学参数变异大造成血液浓度测定困难或受试者数目过大时能够主要活性代谢产物为基础进行等效性研究。生物等效性临床试验设计第15页怎样确定参比药品？标准上选择国内已经同意上市相同剂型药物中原创药。在无法取得原创药时，可考虑选取上市主导产品作为参比制剂。 生物等效性临床试验设计第16页生物等效性临床试验设计怎样确定给药剂量？给药剂量普通应与临床单次用药剂量一致，不得超出临床推荐单次最大剂量或已经证实安全剂量。受试制剂和参比制剂普通应服用相等剂量。需要使用不相等剂量时，应说明理由并提供所用剂量范围内线性药代动力学特征依据，结果能够剂量校正方式计算生物利用度。第17页生物等效性临床试验设计怎样确定清洗期

？设定清洗期是为了消除两制剂相互干扰，防止上个周期内处理影响到随即一周期处理中。清洗期普通不应短于7个消除半衰期。第18页生物等效性临床试验设计怎样设计取样点？取样点设计对试验结果可靠性及药代动力学参数计算合理性，都有十分主要意义。普通应兼顾到吸收相、平衡相（峰浓度）和消除相。服药前应先取空白血样。普通在吸收相部分取2～3个点，峰浓度附近最少需要3个点，消除相取3～5个点。采样连续应到受试药原形或其活性代谢物3～5个半衰期时，或至血药浓度为Cmax

1／10～1／20，AUC0-t/AUC0-∞通常应该大于80%。第19页受试者入选标准：男性健康受试者，18～40周岁。体重指数（体重(kg)/身高(m)2）在正常范围（19～24）内。试验前签署知情同意书。生物等效性临床试验设计第20页

受试者排除标准（举例）：经过直接提问和体检，有任何显著临床疾病者。临床上有显著变态反应史、尤其是药品过敏史者。经研究前全方面体检和试验室检验发觉有任何显著临床疾病者。正在服用或在服第一剂研究药品前3周中曾服用任何处方药或非处方药（天天3g以内扑热息痛除外）者。在此研究给第一剂日期前4个月内接收过任何试验性药品者。喝酒每七天超出28单位酒精（1单位＝285ml啤酒或25ml烈酒或1玻璃杯葡萄酒）者。天天吸烟超出10支或相等量烟草者。有证据表明其为药品滥用者。在研究前一个月献过血，或打算在研究期间或研究结束后一个月内献血或血液成份者。研究者认为受试者有任何原因可能不会完成本研究者。生物等效性临床试验设计第21页为何选择男性受试者？消除性别间差异。防止受女性经期及妊娠影响。 生物等效性临床试验设计第22页药代动力学参数计算在生物等效性研究中，其主要药代参数Cmax

和Tmax

均以实测值表示，AUC0→t

以梯形法计算。普通用非房室数学模型分析方法来估算药代动力学参数，为何？用房室模型方法估算药代参数时，采取不一样方法或软件其值可能有较大差异。第23页BE研究中惯用软件WinNonLinDAS研究者可依据详细情况选择使用，但所用软件必须经确证并应在研究汇报中注明所用软件。第24页等效判断标准

采取主要药代参数经对数转换后以多原因方差分析（ANOVA）进行显著性检验，然后用双向单侧t检验和计算90％置信区间统计分析方法来评价和判断药品间生物等效性。

第25页等效判断标准关于方差分析方差检验是显著性检验，设定无效假设是两药无差异，检验方式为是是否。在P<0.05时认为二者差异有统计意义，但不一定不等效；在P>0.05时认为两药差异无统计意义，但并不能认为二者相等或相近。

第26页等效判断标准关于等效检验双向单侧t检验及（1~2α）%置信区间法是当前生物等效检验唯一标准。SFDA要求：普通经对数转换后受试制剂AUC0→t

在参比制剂80％～125％范围，受试制剂Cmax

在参比制剂70％～143％范围，判断两药生物等效。如有必要时，应对Tmax

经非参数法检验，如无差异，能够认定受试制剂与参比制剂生物等效。第27页各国等效判断标准比较国家/地域AUC标准90%可信限Cmax标准90%可信限中国80~125%70~143%加拿大80~125%None（点预计）EMEA80~125%75~133%日本80~125%一些药品更宽WHO80~125%Cmax可接收范围可能比AUC宽美国80~125%80~125%南非80~125%75~133%第28页等效判断标准

出现Tmax不等效，Cmax等效，AUC等效或Cmax不等效，AUC等效时，怎么看？当前比较必定AUC对药品吸收程度衡量作用，而Cmax、Tmax

依赖取样时间安排，用它们衡量吸收速率有时是不够准确，不适适用于含有多峰现象制剂及个体变异大试验。故在评价时，若出现一些不等效特殊情况，需详细问题加以详细分析。第29页BE研究临床试验汇报

生物等效性研究临床汇报内容最少应包含以下内容（1）试验目标；（2）生物样本分析方法考查数据，提供必要图谱；（3）试验设计和操作方法，包含全部受试者资料、样本例数、参比制剂、给药剂量、服药方法和采样时间安排；（4）受试者各时间点药品浓度、药代参数和药时曲线；（5）采取统计分析方法以及详细统计过程和结果；（6）服药后临床不良反应观察结果，受试者中途退出和脱落统计及原因；（7）生物利用度或生物等效性结果分析以及讨论；（8）参考文件。第30页化学药品制剂人体生物利用度和生物等效性研究技术指导标准(二○○五年三月)主要参考文件第31页举例：A片剂生物等效性研究XXX制药有限企业生产与YYY制药有限企业生产A片剂开放、随机、交叉研究

第32页

研究目标

在中国男性健康受试者中评价XXX制药有限企业生产与YYY制药有限企业生产A片剂生物等效性。第33页试验设计本研究为开放、单剂量、双周期随机交叉设计；计划入组24例，均为男性；受试者于试验当日清晨按试验设计口服试验制剂或参比制剂。于1周后交叉服用另一制剂。试验结束后进行随访；每七天期分别于给药前及给药后第0.5、1、1.5、2、3、4、6、8、10、12、16、24小时采集静脉血测定血浆中A浓度，计算药代动力学参数，判定两种制剂是否生物等效。第34页入选标准年纪在18～40周岁之间健康男性,且同一批入组受试者年纪相差不超出10岁；体重指数(BMI)在19～24之间,体重不应低于50Kg；自愿参加本试验并签署书面知情同意书。第35页排除标准受试者在首次服用研究药品前30天内患有严重疾病（研究者认为没有临床显著意义除外）；或有胃肠肝肾疾病患者；或有其它影响吸收、分布、代谢和排泄等原因者；有药品过敏史者；受试者在筛选试验前2年内有药品滥用史或酗酒史（定义饮用酒精量：每日饮用酒精量约为40g）；饮用过量茶、咖啡和/或含有咖啡因饮料者（＞8杯/天）；乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)、丙型肝炎病毒抗体(Anti-HCV)、艾滋病病毒抗体(Anti-HIV)中有一项呈阳性者；试验室检验异常且研究者认为有临床意义受试者；收缩压≤90mmHg受试者；卧位5分钟和站立后马上测定血压值：收缩压之差＞20mmHg，舒张压之差＞10mmHg受试者；第36页排除标准（续）受试者在首次服用研究药品前2周曾经吸过烟或服用过含有烟碱产品（包含但不限定是香烟、烟斗、雪茄烟、咀嚼用烟草、烟碱片、烟碱口香糖），或在首次服用研究药品前1周内曾经饮酒者；在过去4周内采集全血≥200ml或过去12周内采集全血≥400ml或过去2周内采集成份血（采集血清成份或血小板成份）者；3个月内用过已知对脏器有损害药品者；或在给予试验药品前2周内有用药史者；或当前正在使用药品者；在试验开始前2个月内参加过其它试验者；不能和研究者很好沟通者（语言障碍、智力发育不良或脑功效受损者）；在紧急情况下不能取得联络者；由研究者判断为不适合参加本试验受试者。第37页使用方法用量

采取随机服药次序，受试者在第一研究周期早晨空腹单次口服试验制剂或参比制剂，在第二研究周期交叉服用参比制剂或试验制剂，剂量均为5mg，两次服药间隔最少1周。 第38页生物等效性评价指标

主要判定指标：Cmax

和AUC0-24h；参考指标：AUC0-∞和Tmax第39页安全性评价指标不良事件（症状）；不良事件（检验）；生命体征（血压、心率）；严重不良事件。第40页评价方法药代动力学：使用WinNonLinVersion5.0程序非房室模型法计算试验制剂和参比制剂药代动力学参数Cmax，Tmax，AUC0-24h，AUC0-∞，t1/2。生物等效性分析：药代动力学参数Cmax，AUC0-24h，AUC0-∞生物等效性分析采取WinNonLin程序中BioequivalenceWizard模块；Tmax采取SPSS软件Wilcoxon检验法进行分析。安全性分析：将试验过程中观察到不良事件及试验室检验异常研究前后数据进行列表描述。对生命体征（血压、心率）、试验室检验值进行描述性统计和列表分析，按给药组检验时期计算出平均值、标准差、最小值、最大值。 第41页

试验结果第42页受试者人口学资料

受试者年纪（y）身高（m）体重(kg）体重指数(kg/m2)mean±sd35.0±2.91.68±0.0663.5±6.022.4±1.3范围28~381.60~1.8151~7619.9~24.0第43页主要药代动力学参数药代动力学参数试验制剂参比制剂Cmax(ng/mL)Tmax*(h)AUC0-24h(ng*h/mL)AUC0-∞(ng*h/mL)t1/2(h)F（%）*Tmax以中位数（最小值，最大值）表示第44页单次口服试验制剂和参比制剂后平均血浆浓度(mean±sd)-时间曲线图

第45页主要药代动力学参数方差分