陕西省西安市一中年2025届高三二诊模拟考试生物试卷含解析

陕西省西安市一中年2025届高三二诊模拟考试生物试卷考生请注意：1．答题前请将考场、试室号、座位号、考生号、姓名写在试卷密封线内，不得在试卷上作任何标记。2．第一部分选择题每小题选出答案后，需将答案写在试卷指定的括号内，第二部分非选择题答案写在试卷题目指定的位置上。3．考生必须保证答题卡的整洁。考试结束后，请将本试卷和答题卡一并交回。一、选择题：（共6小题，每小题6分，共36分。每小题只有一个选项符合题目要求）1．如图为某反射弧的部分结构示意图，虚线内代表神经中枢，下列叙述正确的是()A．a端与效应器相连接，b端与感受器相连B．c处的液体是组织液，其理化性质的改变会影响兴奋的传递C．在d、e点之间连接了灵敏电流计，刺激F点和G点都能使电流计发生相同的偏转D．把某药物放在c处，刺激e点，d处无电位变化，说明该药物能阻断神经元之间的兴奋传递2．下列有关基因工程的说法正确的是（）A．如果某种生物的cDNA文库中的某个基因与该生物的基因组文库中的某个基因控制的性状相同，则这两个基因的结构也完全相同B．一个基因表达载体的组成，除了目的基因外，还必须有启动子、终止密码子和标记基因C．目的基因进入受体细胞，并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程，称为转化D．将目的基因导入植物细胞和动物细胞的常用方法是显微注射法3．细胞分化是活细胞的正常生命活动，下列有关细胞分化的叙述，不正确的是（）A．细胞分化是生物个体发育的基础B．细胞分化使细胞DNA发生了改变C．细胞分化使细胞功能趋向专门化D．细胞分化使细胞器数目发生改变4．科学家发现，大多数癌细胞的线粒体缺少嵴，因此即使在有氧情况下，癌细胞也主要依赖无氧呼吸提供能量｡下列相关叙述错误的是（）A．癌细胞中的乳酸含量比正常细胞中的多B．癌细胞消耗的葡萄糖量比正常细胞的多C．癌细胞的线粒体缺陷主要影响有氧呼吸的第三阶段D．癌细胞的线粒体功能缺陷是由原癌基因突变导致的5．疟原虫是一类寄生性的单细胞动物，是疟疾的病原体，在人体内寄生于肝细胞和红细胞中。疟原虫的寄生会使红细胞膜发生变化，它在细胞内的大量增殖可使红细胞裂解死亡。相关研究表明，未感染和感染疟原虫的红细胞中葡萄糖转运蛋白GLUT1表达量无明显差异，而其磷酸化水平可能存在差异。下列有关叙述错误的是（）A．疟原虫会通过减少红细胞膜葡萄糖转运蛋白的数量，减弱其细胞代谢B．疟原虫通过引发肝细胞、红细胞的细胞膜流动变形而进入宿主细胞C．镰状细胞贫血症患者不易感染疟原虫，可能与细胞表面糖蛋白变化有关D．疟原虫形态的维持与蛋白质纤维形成的细胞骨架有关6．下列有关生物进化理论的叙述。错误的是（）A．与自然选择学说相比，现代生物进化理论解释了遗传和变异的本质B．现代生物进化理论认为生物进化以种群为单位、以可遗传变异为基础C．新物种的形成一般离不开变异、选择和隔离三个基本环节D．生物变异和进化的不定向性，导致生物具有多样性和适应性二、综合题：本大题共4小题7．（9分）世界卫生组织将每年12月1日定为世界艾滋病日。2019年的世界艾滋病日，我国宣传活动主题是“社区动员同防艾，健康中国我行动”。该主题意在强调包括参与艾滋病防治工作的社会组织、基层医疗卫生机构、居民委员会、村民委员会等社区的优势和作用，强调个人健康责任意识，与政府、部门和其他社会力量一起，共同防控艾滋病和推进“健康中国行动”，为遏制艾滋病流行和健康中国建设做出贡献。艾滋病是由人类免疫缺陷病毒（HIV）引起的，死亡率极高。下图为HIV的结构模式图，其外膜是类脂包膜，来自宿主细胞的细胞膜。请回答下列问题：（1）HIV外膜的化学成分主要是________________________。HIV专一性攻击人体的T淋巴细胞，从细胞膜结构角度分析，其原因最可能是________________________。（2）HIV感染T淋巴细胞后，以_____________为模板合成DNA，然后再表达出膜蛋白等蛋白质，整个过程中遗传信息的流动方向是___________________________（用图解表示）。（3）人体的免疫系统能够成功地抵御大多数病毒，却不能抵御HIV，其原因是__________________________________________。8．（10分）VNN1基因（1542bp）与炎症相关性疾病有关，GFP基因（4735bp）控制绿色荧光蛋白的合成，该蛋白可在相应波长的紫外光激发下发出绿色荧光。某研究小组进行鼠源GFP-VNNI重组质粒的构建及其功能研究，回答下列问题：（l）为构建重组质粒，研究小组从数据库查找到VNNl的DNA序列，并设计引物。上游引物：5ʹ-AAGCTTCCGCTGCACCATGACTACTC-3ʹ下划线为HindⅢ酶切位点），下游引物：5ʹ-GGATCCGCTCGAGCTACCAACTTAATGA-3ʹ（下划线为BamHI酶切位点），之后进行PCR扩增，PCR的原理是________。扩增后的VNNI基因要与含GFP基因的载体连接，需用________（填具体酶）切割VNNI基因和含GFP基因的载体，再用________酶处理，构建重组质粒。（2）GFP基因在重组质粒中可作为________________，其作用是________。用之前相同的限制酶对GFP-VNNI重组质粒切割后，进行电泳鉴定时得到如图1所示的部分条带，结果表明________。（3）IL-6为体内重要的炎症因子，能与相应的受体结合，激活炎症反应。图2为GFP-VNNI重组质粒对细胞分泌IL-6的影响，由此说明________________，同时发现与正常组比较，空质粒转染组IL-6的表达有轻微升高，造成这种现象的可能原因是________________________。9．（10分）已知果蝇的长翅和短翅、红眼和棕眼分别由两对独立遗传的等位基因（A和a、B和b）控制，这两对基因不在Y染色体上。为了确定这两对相对性状的显隐性关系，以及这两对等位基因的位置，研究小组让一只雌性长翅红眼果蝇与一只雄性长翅棕眼果蝇杂交，所得F1的表现型及比例为长翅红眼：长翅棕眼：短翅红眼：短翅棕眼=3:3:1:1。请回答：（1）翅形和眼色这两对基因的遗传遵循________________定律。（2）分析上述结果，可以得出的结论是________________。对性状的显隐性关系以及基因的位置还可作出________________种合理的假设，若理论上分析F1代长翅红眼果蝇中雌性个体所占的比例为0，F1代短翅红眼果蝇中雄性个体所占的比例为1，则所作的假设为________________。（3）用带荧光标记的B、b基因共有的特有序列作探针，与亲代雄果蝇细胞装片中各细胞内染色体上的B、b基因杂交，通过观察荧光点的个数可以判断眼色基因的位置。在一个处于有丝分裂后期的细胞中，若观察到________________个荧光点，则眼色基因位于常染色体上；若观察到________________个荧光点，则眼色基因位于X染色体上。（4）果蝇一种突变体的X染色体上存在ClD区段（用XClD表示）：D基因表现显性棒眼性状，l基因的纯合子在胚胎期死亡（即XClDXClD与XClDY不能存活），正常果蝇的X染色体无ClD区段（用X+表示）。让突变体雌果蝇与正常眼雄果蝇杂交，F1代棒眼果蝇所占的比例为________________，写出遗传图解________________。10．（10分）癌细胞表面蛋白“PDL-1”与T细胞表面蛋白“PD-1”特异性结合后，可抑制T细胞活性并启动其凋亡，导致肿瘤细胞发生免疫“逃逸”。研究者对“PD-1”基因进行克隆、表达及生物学活性鉴定，为制备抗体打基础。研究中所用引物α和β碱基序列见图1、几种常用限制酶名称及识别序列与酶切位点见图2：α链：5'-TCACTCGAGACCATGCAGATCCCACAGGCGCCC-3'β链：5'-CTCGAATTCTCAGAGGGGCCAAGAGCAGTG-3'图1（1）首先提取细胞中的mRNA反转录生成____________________作为模板；设计含有不同的限制酶切点的α和β序列为引物，通过____________________技术扩增目的基因。（2）选用图1中的两种名称分别为____________________的限制酶将“pIRES2-EGFP质粒”载体进行双切，再用DNA连接酶将其与目的基因拼接，构建表达载体。该表达载体的组成，除了目的基因、标记基因抗卡那霉素基因外，还必须具有____________________等。（3）而后一定温度下，与经过处理的感受态大肠杆菌混合培养在含有_____________培养基中，可筛选出已经完成转化的大肠杆菌，继续培养该种大肠杆菌以扩增重组DNA。（4）将扩增后的“pIRES2-EGFP载体/PD-1重组DNA”转入可高度表达外源基因的原代293T细胞。一段时间后，为确定PD-1基因是否表达，检测细胞膜表面是否具有____________________。为判断其是否具有生物学活性和功能，则可裂解293T细胞，提取该物质看能否与____________________发生结合，从而阻断“PD-1与PDL-1信号通路”。研究中还会有一步骤，只将“pIRES2-EGFP载体”转入293T细胞，其目的是_________________________。11．（15分）2018年！月25日，中科院神经科学研究所研究团队利用类似克隆羊“多莉”的体细胞克隆技术克隆的猕猴“中中”和“华华”，登，上了全球顶尖学术期刊《细胞》的封面，该成果标志着中国率先开启了以体细胞克隆猴作为实验动物模型的新时代。下图是体细胞克隆猴的技术流程图，请据图回答问题。（1）图中选择猕猴胚胎期而非成年期的成纤维细胞进行培养，其原因是_________。刚放入培养瓶中的细胞沉降到瓶底部后首先会出现___________现象。每一次传代培养时，常利用_________酶消化处理，制成细胞悬液后转入到新的培养瓶中。（2）图示过程涉及的主要技术有_________（答出三点即可）。以体细胞克隆猴作为实验动物模型的显著优势之一是同-批克隆猴群的遗传背景相同，图中克隆猴的遗传物质主要来自_______。（3）图中步骤①是克隆猴的技术难点之一，需要将卵母细胞培养到_________后进行去核操作，而后用_________方法激活受体细胞，使其完成分裂和发育。（4）体细胞克隆猴的另外一个技术难点是猴的体细胞克隆胚胎发育差。科学家发现，胚胎发育障碍与克隆胚胎基因组上大量组蛋白的甲基化密切相关。由此推测，图中Kdm4dmRNA翻译产生的酶的作用是_____。

参考答案一、选择题：（共6小题，每小题6分，共36分。每小题只有一个选项符合题目要求）1、B【解析】

分析题图，该图的神经传导方向应该是a→d→c→e，所以a连接感受器，c连接效应器。【详解】A.分析反射弧的结构示意图可知，a连接感受器，c连接效应器，A错误；B.c处为组织液，如果理化性质改变很容易影响神经递质在两神经间的传递，B正确；C.在d、e点之间连接了灵敏电流计，神经冲动只能由d点传到e，刺激F点，神经冲动先传至d，再传至e，故电流计会有2次偏转，刺激G点神经冲动只能传至e，故电流计会有1次偏转，故电流计的偏转不相同，C错误；D.神经冲动是单向传导的，只能由d点传到e，所以即使不放药物，刺激e点d点也不会有电位变化，D错误。2、C【解析】

基因工程技术的基本步骤：(1)目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成；(2)基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等；(3)将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法；(4)目的基因的检测与鉴定:分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因-DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。【详解】A、如果某种生物的cDNA文库中的某个基因与该生物的基因组文库中的某个基因控制的性状相同，但这两个基因的结构不完全相同，因为基因组文库中的基因中含有内含子、启动子等结构，而cDNA文库中的基因中不含这些结构，A错误；B、一个基因表达载体的组成，除了目的基因外，还必须有启动子、终止子和标记基因，终止密码子位于mRNA上，B错误；C、目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程，称为转化，C正确；D、将目的基因导入植物细胞的常用方法是农杆菌转化法，导入动物细胞的常用方法是显微注射法，D错误；故选C。3、B【解析】

细胞分化的概念：在个体发育中，由一个或一种细胞增殖产生的后代，在形态、结构和生理功能上发生稳定性差异的过程。细胞分化的实质：遗传信息的执行情况不同。细胞分化的意义：是生物个体发育的基础；使多细胞生物中的细胞趋向专门化，有利于提高各种生理功能的效率。在细胞分化过程中，细胞的遗传信息和细胞的数量不变。【详解】A、细胞分化发生在生物体的整个生命过程中，是生物个体发育的基础，A正确；B、细胞分化的实质是基因选择性的表达，细胞DNA不变，B错误；C、细胞分化使多细胞生物的细胞趋向专门化，有利于提高各种生理功能的效率，C正确；D、由于细胞分化使细胞功能趋向专门化，细胞器的数目发生改变，D正确。故选B。【点睛】本题主要考查细胞分化有关知识，答题关键在于掌握细胞分化的概念、实质和意义。4、D【解析】

有氧呼吸和无氧呼吸的过程：（1）有氧呼吸可以分为三个阶段：第一阶段：在细胞质的基质中：1分子葡萄糖被分解为2分子丙酮酸和少量的还原型氢，释放少量能量；第二阶段：在线粒体基质中进行，丙酮酸和水在线粒体基质中被彻底分解成二氧化碳和还原型氢；释放少量能量；第三阶段：在线粒体的内膜上，前两个阶段产生的还原型氢和氧气发生反应生成水并释放大量的能量。（2）无氧呼吸过程：第一阶段：和有氧呼吸第一阶段相同。第二阶段：在细胞质基质中丙酮酸重新生成乳酸，一般植物细胞内生成酒精和二氧化碳。【详解】A、由于癌细胞在有氧情况下也主要依赖无氧呼吸提供能量，所以癌细胞中乳酸含量比正常细胞中的多，A正确；B、无氧呼吸提供的能量较少，所以癌细胞消耗的葡萄糖量比正常细胞的多，B正确；C、癌细胞的线粒体缺少嵴，所以主要影响了有氧呼吸第三阶段，C正确；D、原癌基因调控细胞周期，如果该基因突变则使细胞周期紊乱，而不是影响线粒体的结构，D错误。故选D。【点睛】本题需要抓住题干中“大多数癌细胞的线粒体缺少嵴”，结合有氧呼吸的过程进行解答。5、A【解析】

由题意“未感染和感染疟原虫的红细胞中葡萄糖转运蛋白GLUT1表达量无明显差异，而其磷酸化水平可能存在差异”，说明疟原虫的感染不影响基因的表达，通过影响葡萄糖转运蛋白GLUT1的磷酸化影响葡萄糖的运输。【详解】A、由“未感染和感染疟原虫的红细胞中葡萄糖转运蛋白GLUT1表达量无明显差异”可知，感染疟原虫不会减少红细胞膜葡萄糖转运蛋白的数量，A错误；B、疟原虫是单细胞动物，通过其细胞膜与肝细胞、红细胞的膜融合进入宿主细胞，该过程依赖细胞膜的流动性，B正确；C、糖蛋白具有识别作用，镰状细胞贫血症患者不易感染疟原虫，可能与细胞表面糖蛋白变化有关，C正确；D、蛋白质纤维形成的细胞骨架与细胞形态的维持有关，D正确。故选A。6、D【解析】

现代生物进化理论的基本观点：种群是生物进化的基本单位，生物进化的实质在于种群基因频率的改变；突变和基因重组产生生物进化的原材料；自然选择使种群的基因频率发生定向的改变并决定生物进化的方向；隔离是新物种形成的必要条件。【详解】A、达尔文的自然选择学说是在拉马克的用进废退和获得性遗传的观点基础上形成的，但不能科学地解释遗传和变异的本质，现代生物进化理论能够解释遗传和变异的本质，A正确；B、现代生物进化理论认为种群是生物进化的基本单位，可遗传变异（突变和基因重组）为生物进化提供原材料，是进化的基础，B正确；C、突变和基因重组、自然选择及隔离是物种形成过程的三个基本环节，通过它们的综合作用，种群产生分化，最终导致新物种形成，C正确；D、变异为进化提供基础，生物的变异是不定向性的，进化的方向是定向的，D错误。故选D。【点睛】解答此题要求考生识记现代生物进化理论的主要内容，能结合所学的知识准确判断各选项。二、综合题：本大题共4小题7、脂质和蛋白质（以及少量糖类）T淋巴细胞具有HIV的特异性受体，其他细胞缺乏H1V的特异性受体自身的RNARNA→DNA→RNA→蛋白质HIV可杀死在免疫系统中起重要作用的T淋巴细胞，当T淋巴细胞被杀死后，免疫系统几乎处于瘫痪状态，因而不能抵御HIV【解析】

1、细胞膜的主要成分是脂质（约占）50%和蛋白质（约占40%），此外还有少量的糖类（占2%～10%），组成细胞膜的脂质中，磷脂最丰富，磷脂构成了细胞膜的基本骨架。2、HIV的增殖过程：其遗传物质RNA，首先逆转录形成DNA并整合到宿主细胞DNA上，再转录形成RNA，进而翻译形成蛋白质，RNA和蛋白质组装形成子代病毒。【详解】（1）根据题意，HIV外膜是类脂包膜，来自宿主细胞的细胞膜，则其化学成分主要是脂质和蛋白质（以及少量糖类）；HIV专一性攻击人体的T淋巴细胞，从细胞膜结构角度分析，其原因最可能是T淋巴细胞具有HIV的特异性受体，其他细胞缺乏HIV的特异性受体。（2）HIV感染T淋巴细胞后，以自身的RNA为模板，在逆转录酶的作用下合成DNA，然后再表达出膜蛋白等蛋白质，该过程中遗传信息的流动方向是RNA→DNA→RNA→蛋白质。（3）人体的免疫系统能够成功地抵御大多数病毒，却不能抵御HIV是因为HIV可杀死在免疫系统中起重要作用的T淋巴细胞，当T淋巴细胞被杀死后，免疫系统几乎处于瘫痪状态。【点睛】本题围绕HIV考查细胞膜的成分、免疫调节以及中心法则等相关知识，意在考查考生的应用能力和理解所学知识要点，把握知识间内在联系，形成知识网络结构的能力；能运用所学知识，准确判断问题的能力。8、DNA双链复制HindⅢ酶和BamHⅠ酶DNA连接标记基因鉴别受体细胞中是否含有目的基因，从而将含目的基因的细胞筛选出来VNN1基因已插入到含GFP基因的载体中（合理即可）VNN1基因表达产物能促进细胞分泌炎症因子IL-6操作过程中对细胞的损伤（或用到的化学试剂对细胞具有一定的毒性作用），可以激活相应细胞分泌炎症因子IL-6【解析】

基因工程的基本操作程序第一步：目的基因的获取：原核基因采取直接分离获得，真核基因是人工合成，人工合成目的基因的常用方法有反转录法和化学合成法。第二步：基因表达载体的构建第三步：将目的基因导入受体细胞常用的转化方法：将目的基因导入植物细胞：采用最多的方法是农杆菌转化法，其次还有基因枪法和花粉管通道法等。将目的基因导入动物细胞：最常用的方法是显微注射技术；将目的基因导入微生物细胞：先用Ca2+处理细胞，使其成为感受态细胞，再将重组表达载体DNA分子溶于缓冲液中与感受态细胞混合，在一定的温度下促进感受态细胞吸收DNA分子，完成转化过程。第四步：目的基因的检测和表达。【详解】（1）PCR的原理是DNA双链复制，为防止切割的质粒环化，通常选择两种的限制酶进行切割，同时需要用相同的限制酶对目的基因进行处理，所以选择HindⅢ酶和BamHI切割VNNI基因和含GFP基因的载体，再用DNA连接酶处理形成重组质粒。（2）GFP基因（4735bp）控制绿色荧光蛋白的合成，该蛋白可在相应波长的紫外光激发下发出绿色荧光，所以在重组质粒中可以作为标记基因；鉴别受体细胞中是否含有目的基因，从而将含目的基因的细胞筛选出来；电泳条带显示分子量增加表明VNN1基因已插入到含GFP基因的载体中。（3）从柱状图中看出VNN1组中IL-6的浓度增加，说明了VNN1基因表达产物能促进细胞分泌炎症因子IL-6；空质粒转染组IL-6的表达有轻微升高，可能原因是操作过程中对细胞的损伤（或用到的化学试剂对细胞具有一定的毒性作用），可以激活相应细胞分泌炎症因子IL-6。【点睛】本题重点考查了基因工程的操作知识，考生需要数量掌握其操作步骤。9、自由组合长翅对短翅显性6种翅形基因位于常染色体上；眼色基因位于X染色体上，棕眼对红眼显性421/3【解析】

一只雌性长翅红眼果蝇与一只雄性长翅棕眼果蝇杂交，所得F1的表现型及比例为长翅红眼：长翅棕眼：短翅红眼：短翅棕眼=3:3:1:1，F1长翅∶短翅=3∶1，红眼∶棕眼=1∶1，可知长翅和短翅的基因（A和a）位于常染色体上，且长翅为显性，红眼和棕眼的显隐性及基因（B和b）的位置未知，可能有6种情况，亲本的基因型为（关于红眼和棕眼）：①翅形常染色体、眼色X染色体且红眼为显性：长翅红眼雌性（AaXBXb）×长翅棕眼雄性（AaXbY）；②翅形常染色体、眼色X染色体且红眼为隐性：长翅红眼雌性（AaXbXb）×长翅棕眼雄性（AaXBY）；③翅形X染色体、眼色常染色体且红眼为显性：长翅红眼雌性（BbXAXa）×长翅棕眼雄性（bbXAY）；④翅形X染色体、眼色常染色体且红眼为隐性：长翅红眼雌性（bbXAXa）×长翅棕眼雄性（BbXAY）；⑤翅形常染色体、眼色常染色体且红眼为显性：长翅红眼雌性（AaBb）×长翅棕眼雄性（Aabb）；⑥翅形常染色体、眼色常染色体且红眼为隐性：长翅红眼雌性（Aabb）×长翅棕眼雄性（AaBb）。【详解】（1）果蝇的长翅和短翅、红眼和棕眼分别由两对独立遗传的等位基因（A和a、B和b）控制，因此翅形和眼色这两对基因的遗传遵循自由组合定律。（2）亲本均为长翅，F1出现短翅，长翅为显性，短翅为隐性。对性状的显隐性关系以及基因的位置还可作出6种合理的假设。若理论上分析F1代长翅红眼果蝇中雌性个体所占的比例为0，则控制红眼和棕眼的基因位于X染色体上，且棕眼为显性，亲本的基因型为：长翅红眼（AaXbXb）×长翅棕眼（AaXBY），F1代短翅红眼果蝇中雄性个体（aaXbY）所占的比例为1。（3）用带荧光标记的B、b基因共有的特有序列作探针，与亲代雄果蝇细胞装片中各细胞内染色体上的B、b基因杂交，亲代棕眼雄果蝇细胞的基因型为XBY或XbY或Bb或bb，有丝分裂后期细胞中的基因数量是体细胞的两倍，若眼色基因位于常染色体上，则观察到4个荧光点（BBbb或bbbb），则；若眼色基因位于X染色体上，则复制后会观察到2个荧光点。（4）让突变体雌果蝇（XClDX+）与正常眼雄果蝇（X+Y）杂交，F1代果蝇为：XClDX+（棒眼雌性）、XClDY（致死）、X+X+（正常眼雌性）、X+Y（正常眼雄性），棒眼果蝇所占的比例为1/3。遗传图解如下，注意表现型中要有性别，各种符号需正确。【点睛】熟悉显隐性的判断及基因位置的判断，要学会从子代的表现型推测亲本的基因型，还有注意遗传中的致死问题。10、cDNAPCRXhoIEoRI启动子、终止子、复制原点卡那霉素PD-1蛋白PDL-1或答PD-1抗体作为对照【解析】

基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因采用DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA采用分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质采用抗原—抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。【详解】（1）基因文库包括基因组文库和部分基因文库（cDNA）。其中基因组文库包含某种生物所有的基因，而部分基因文库只包含某种生物的部分基因，可以mRNA为模板反转录形成cDNA；由于PCR技术利用的是DNA分子复制的原理，所以用该cDNA进行PCR技术扩增短时间内可以获得大量的目的基因。（2）分析图1中碱基序列，α链上有“—CTCGAC—”识别序列，β链上有“—GAATTC—”碱基识别序列，与图2中XhoI限制酶和EoRI限制酶的识别序列相同。故选用XhoI限制酶和EoRI限制酶将“pIRES2-EGFP质粒”载体进行双切，再用DNA连接酶将其与目的基因拼接，构建基因表达载体。基因表达载体的组成包括目的基因、标记基因、启动子、终止子、复制原点等。（3）根据第（2）题可知，基因表达载体上的标记基因是卡那霉素抗性基因，因此一定温度下，与经过Ca2+处理的感受态大肠杆菌混合培养在含有卡那霉素的培养基，可筛选出已经完成转化的大肠杆菌。（4）基因表达的产物是蛋白质，一段时间后，为确定PD-1基因是否表达，可以检测细胞膜表面是否具有PD-1基因表达的PD-1蛋白。为判断其是否具有生物学活性和功能，可采用抗原—抗体杂交技术，即从裂解293T细胞中，提取PD-1蛋白看能否与PDL-1发生结合，从而阻断“PD-1与