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文档简介

实验六线性范围试验

检验系生化教研室临床生化试剂盒性能评价试剂空白吸光度试剂空白吸光度变化速率分析灵敏度线性范围重复性准确度稳定性时间反应曲线临床试验临床生化试剂盒的性能指标1、线性范围：在试剂盒评价中很重要,是指试剂盒按说明书使用可准确测量的范围。试剂盒测定线性范围是衡量其质量的重要指标,也是鉴定试剂盒和保证正确使用的关键指标之一。2.酶促反应时间曲线或化学反应速度时间曲线观察以吸光度为纵坐标，反应时间为横坐标作图，观察动态期（包栝延迟期，线性期，混和期）和平衡期出现，持续和终止的时间，分析有关性能指标。3.稳定性（1）效期稳定性（2）热稳定性试验（3）开瓶稳定性实验目的掌握检测临床生化检验商品试剂盒测定线性范围的原理和方法,剂量反应曲线的绘制,统计方法和性能评价;熟悉线性范围变窄的原因;了解影响线性的因素.原理使用不同浓度的葡萄糖标准溶液,用GOD-POD法试剂测定各自的吸光度,以标准浓度为横坐标,以其对应的吸光度为纵坐标,在方格纸上作图.即可绘制出一条直线,即剂量反应曲线(dose-responsecurve).试剂与器材40mmol/L葡萄糖标准液蒸馏水GOD-POD试剂盒可见分光光度计水浴锅加入物标准管

012345葡萄糖标准液(ul)010203040

50蒸馏水(ul)50403020100GOD-POD试剂(ml)

555555操作步骤混匀，37℃水浴10min，0号管调零，500nm读取吸光度；以葡萄糖浓度为横坐标，对应的吸光度为纵坐标，将其交叉点在坐标纸上标出，获得血糖与GOD-POD之间的剂量反应曲线结果计算1.测定结果：5个不同浓度的标本，随机排列，每个标本测定4次，舍去最大值与最小值，取中间两个值的均值为测定值。。2.线性评价统计采用回归分析,求出此直线的截距a和斜率b,建立直线回归方程y=a+bx;并作相关分析,求出相关系数(r),r2≥0.995认为此浓度范围内的溶液与吸光度呈良好的线性关系。注意事项1.葡萄糖标准液的加量必须十分准确,应用计量性能准确度很高的微量进样器加样。2.本方法线性可达22.24mmol/L,(指生化分析仪)造成线性变窄的原因试剂配料中组分投料不足;试剂配制后组分稳定性差;因运输或储存不当等导致试剂组分的含量发生变化。3.酶法测定时,有时当酶量相对不足时,

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