2025届河南安阳市林虑中学高三二诊模拟考试生物试卷含解析

2025届河南安阳市林虑中学高三二诊模拟考试生物试卷注意事项1．考生要认真填写考场号和座位序号。2．试题所有答案必须填涂或书写在答题卡上，在试卷上作答无效。第一部分必须用2B铅笔作答；第二部分必须用黑色字迹的签字笔作答。3．考试结束后，考生须将试卷和答题卡放在桌面上，待监考员收回。一、选择题：（共6小题，每小题6分，共36分。每小题只有一个选项符合题目要求）1．下列有关生物变异和进化的叙述，错误的是（）A．隔离是物种形成的必要条件B．杂合子Aa自交后代出现性状分离、是基因重组的结果C．无论是自然选择还是人工选择作用，都能使种群基因频率发生定向改变D．二倍体西瓜经一定浓度秋水仙素诱导，可得到四倍体西瓜，从而产生新物种2．下列能在人体内环境中进行的生理过程是（）A．血浆蛋白的合成 B．劳氏肉瘤病毒的增殖C．HCO3-维持酸碱平衡 D．胰蛋白酶催化蛋白质水解3．下表中人体不同细胞的寿命和分裂能力不同，以下说法错误的是（）细胞种类小肠上皮细胞癌细胞红细胞白细胞寿命1〜2天不死性120天5〜7天能否分裂能能不能大多数不能A．白细胞的凋亡比红细胞快，这与白细胞吞噬病原体有关B．癌细胞的无限增殖是由正常基因突变为原癌基因引起的C．通常情况下，细胞的分化程度越高，细胞分裂能力越弱D．小肠上皮细胞寿命最短，这与基因控制的凋亡有关4．人棘状毛囊角质化是一种伴X染色体显性遗传病，下列相关叙述错误的是（）A．女性患者的致病基因可以传递给儿子或女儿B．男性患者的致病基因可以传递给儿子或女儿C．女性患者与正常男性结婚可能生出正常女儿D．正常男性和正常女性结婚一般不会生出患病孩子5．完成反射的结构基础是反射弧，下列有关叙述正确的是（）A．K+内流是大多数细胞产生和维持静息电位的主要原因B．神经递质与相应受体结合可引发突触后膜电位变化C．在一次反射过程中一个神经元各部分同时兴奋D．反射弧的效应器是传出神经所支配的肌肉或腺体6．下列有关生物实验的叙述中，正确的是（）A．提取绿叶中的色素时，加入无水乙醇过量会导致提取液颜色浅B．检测经蛋白酶处理后的样液中底物的有无可用双缩脲试剂C．T2噬菌体侵染大肠杆菌的实验操作是先充分搅拌再短暂保温、离心D．进行预实验的目的是为了减少实验误差二、综合题：本大题共4小题7．（9分）图示pIJ732是一种常用质粒，其中tsr为硫链丝菌素（一种抗生素）抗性基因；mel为黑色素合成基因，其表达能使白色的链霉菌菌落变成黑色菌落；而限制酶SacⅠ、SphⅠ，BglⅠ在pIJ732上分别只有一处识别序列。回答下列问题。表1pIJ732pZHZ8BglⅡ1．7kb2．7kb表2固体培养基中硫链丝菌素浓度（μg/mL）312113不含质粒的链霉菌生长状况+++++++++--“+”表示生长；“-”表示不生长。（1）限制性内切核酸酶可以识别双链DNA中特定核苷酸序列，并使每条链中特定部位的两个核苷酸之间_______的断裂，切割形成的末端有_______两种。（2）以SacⅠ和SphⅠ切取的目的基因置换质粒PIJ732上长度为3．4kb的SacⅠ/sphⅠ片段，构建重组质粒pZHZ8。上述两种质粒的限制酶酶切片段长度见表1。由此判断目的基因的片段长度为_____kb，判定目的基因中含有一个BglⅡ切割位点的理由是____________________________。（3）导入目的基因时，首先用______处理链霉菌使其成为感受态细胞，再将重组质粒pZHZ8溶于________中与感受态细胞混合，在一定的温度下可以促进链霉菌完成______过程。（4）不含质粒的链霉菌在含硫链丝菌素的固体培养基上生长状况如表2所示。若要筛选导入pzHZ8的链霉菌细胞，所需硫链丝菌素浓度至少应在______μg/mL以上，挑选成功导入pZHZ8的链霉菌的具体方法是________________________。8．（10分）某昆虫（XY型性别决定）的体色和眼色分别由等位基因A（a）和B（b）控制，其中有一对基因位于性染色体上，现有多只黑身红眼雄昆虫与多只相同基因型的黄身红眼雌昆虫随机交配（假定每对昆虫子代数目相同），F1全为黄身，其中雄性全为红眼，雌性红眼：白眼=5：1，让F1中红眼雌雄个体随机交配，F2的表现型及比例如下表。（不考虑突变）性别黄身红眼黄身白眼黑身红眼黑身白眼雌性51/1609/16017/1603/160雄性60/16020/160（1）该昆虫的红眼和白眼中，显性性状是________，眼色基因位于________染色体上。（2）亲本中的雄昆虫基因型及其比例为__________________。设计测交实验来验证亲本雌昆虫的基因型，并用遗传图解表示______。（3）F2中的黄身红眼雌昆虫有________种基因型，其中双杂合子所占比例是________。9．（10分）如图是胰腺组织局部结构模式图，请据图回答有关问题：（1）A、B、C三者共同构成了细胞生活的液体环境，这个液体环境称为_____。（2）维持内环境渗透压的Na+和Cl﹣以及葡萄糖、氨基酸等物质进入内环境要经过_____、_____系统。（3）饭后半小时，图示血管中（从左到右）血液里_____（激素）含量会增多；该胰腺组织能产生胰蛋白酶和胰高血糖素；这两种物质哪种不可以进入血液_____。（4）在一些病理条件下，血浆、组织液和淋巴三者的量都可能发生变化。请举出由于病理引起A液增多，其结果是将会引起_____；由于病理引起A液增多的实例_____、_____。（不得少于2种）（5）某人喝入大量的食醋后不会引起内环境pH明显下降，原因是图中_____（填字母）内存在着_____物质。10．（10分）胡萝卜素和花青素都是植物体内重要的色素。请回答有关问题：（1）胡萝卜素具有易溶于__________的特点，是_________（填“挥发性”或“非挥发性”）物质。（2）现有乙醇和乙酸乙酯两种溶剂，应选用其中的__________作为胡萝卜素的萃取剂，不选用另外一种的理由是_____________________________________。（3）花青素是构成很多植物花瓣和果实颜色的主要色素之一，花青素主要存在于_________（填细胞器名称）中。（4）花青素的提取工艺如下：实验原料加75%酒精添加金属离子研磨组织匀浆水浴保温搅拌70分钟.离心上清液→测花青素提取率①75%酒精的作用是：______________________；若从食品安全角度考虑，则对金属离子的要求是：______________________。②兴趣小组分别对水浴温度、某金属离子的添加浓度进行了探究实验。结果显示，水浴温度在69～71℃范围内，提取率提高；某金属离子的添加浓度在0.1～0.3g/L范围内，提取率较高。他们认为要达到最高提取率，还必须对水浴温度和某金属离子的添加浓度进行进一步优化，并确定以此为探究课题。请拟定该课题名称：_______________________________。11．（15分）萝卜的蛋白A具有广泛的抗植物病菌作用，而且对人体没有影响。我国科学家欲获得高效表达蛋白A的转基因大肠杆菌作为微生物农药，做了相关研究。（1）研究者用相同的_________酶处理蛋白A基因和pET质粒，得到重组质粒，再将重组质粒置于经_________处理的大肠杆菌细胞悬液中，获得转基因大肠杆菌。（2）检测发现，转入的蛋白A基因在大肠杆菌细胞中表达效率很低，研究者推测不同生物对密码子具有不同的偏好，因而设计了与蛋白A基因结合的两对引物（引物B和C中都替换了一个碱基），并按图2方式依次进行4次PCR扩增，以得到新的蛋白A基因。①这是一种定点的_________技术。②图2所示的4次PCR应该分别如何选择图1中所示的引物？请填写以下表格（若选用该引物划“√”，若不选用该引物则划“×”）。_____引物A引物B引物C引物DPCR1PCR2PCR3PCR4（3）研究者进一步将含有新蛋白A基因的重组质粒和_________分别导入大肠杆菌，提取培养液中的蛋白质，用_________方法检测并比较三组受体菌蛋白A的表达产物，判断新蛋白A基因表达效率是否提高。为检测表达产物的生物活性，研究者将上述各组表达产物加入到长满了植物病菌的培养基上，培养一段时间后，比较_________的大小，以确定表达产物的生物活性大小。（4）作为微生物农药，使用时常喷洒蛋白A基因的发酵产物而不是转蛋白A基因的大肠杆菌，其优点是_________。

参考答案一、选择题：（共6小题，每小题6分，共36分。每小题只有一个选项符合题目要求）1、B【解析】

隔离是物种形成的必要条件，隔离包括生殖隔离和地理隔离；基因重组是指在减数分裂形成配子过程中，位于非同源染色体上的非等位基因自由组合。【详解】A、隔离是物种形成的必要条件，A正确；B、杂合子Aa自交后代出现性状分离、是等位基因分离的结果，B错误；C、生物进化的实质是种群基因频率的改变，自然选择决定进化的方向，无论是自然选择还是人工选择作用，都能使种群基因频率发生定向改变，C正确；D、二倍体西瓜经一定浓度秋水仙素诱导，可得到四倍体西瓜，四倍体西瓜与二倍体西瓜杂交，产生三倍体西瓜，由于三倍体西瓜高度不育，从而证明二倍体西瓜与四倍体西瓜存在生殖隔离，进而证明四倍体西瓜是新物种，D正确。故选B。2、C【解析】

人体体内的液体叫体液，可以分成细胞内液和细胞外液，细胞外液包括组织液、血浆、淋巴，细胞外液也叫内环境；一切与外界相通的管腔、囊腔（如消化道、呼吸道、膀胱、子宫等）及与外界相通的液体（如泪液、汗液、尿液、消化液等）都不可看作内环境，因而其内所含物质也不可看作存在于内环境中的物质。【详解】A、血浆蛋白在细胞内的核糖体中合成，细胞内的核糖体不是内环境，A错误；B、病毒必须营寄生生活，在活的宿主细胞内才能进行生命活动，因此劳氏肉瘤病毒的增殖发生在细胞内，不属于内环境，B错误；C、HCO3-维持酸碱平衡发生在血浆中，血浆属于内环境，C正确；D、胰蛋白酶催化蛋白质水解发生在消化道中，消化道与外界环境相通，不属于内环境，D错误。故选C。3、B【解析】

细胞分化是指在个体发育中，由一个或一种细胞增殖产生的后代，在形态、结构和生理功能上发生稳定性差异的过程，实质是基因的选择性表达，最终形成形态和功能不同的组织和细胞。【详解】A、白细胞没有细胞核，功能主要是吞噬病原体，因此更新速度快，A正确；B、癌细胞的无限增殖是由于原癌基因突变为癌基因，以及抑癌基因突变失去功能导致的，B错误；C、通常情况下，细胞的分化程度越高，其全能性就越低，细胞分裂能力就越弱，C正确；D、人体不同组织的细胞寿命不同，是由遗传物质决定，与基因控制的衰老和凋亡有关，D正确。故选B。【点睛】原癌基因主要负责调节细胞周期，控制细胞生长和分裂的进程；抑癌基因主要阻止细胞不正常的增殖。细胞癌变的内因是原癌基因和抑癌基因发生突变，导致正常细胞的生长和分裂失控，使得正常细胞变成不受控制、恶性增殖的癌细胞。4、B【解析】

1、棘状毛囊角质化是由位于X染色体上的显性致病基因决定的一种遗传病，其特点：（1）世代相传；（2）男患者少于女患者；（3）男患者的母亲和女儿都患病，女性正常个体的父亲和儿子都正常。2、假设棘状毛囊角质化的致病基因是D，则基因型和性状的关系：

XDXD

XDXd

XdXd

XDY

XdY

女性患者

女性患者

女性正常

男性患者

男性正常【详解】A、儿子和女儿的X染色体都可来自母亲，因此女性患者的致病基因可以传递给儿子或女儿，A正确；B、男性患者的致病基因只传递给女儿，B错误；C、女性患者（若为XDXd）与正常男性（XdY）结婚后可以生出XdXd正常的女儿，C正确；D、正常男性（XdY）和正常女性（XdXd）结婚，后代一般不会生出患病的孩子，D正确。故选B。5、B【解析】

1、神经调节的基本方式是反射，反射的结构基础是反射弧，反射弧由感受器、传入神经、神经中枢、传出神经和效应器构成。2、静息时，神经细胞膜对钾离子的通透性大，钾离子大量外流，形成内负外正的静息电位；受到刺激后，神经细胞膜的通透性发生改变，对钠离子的通透性增大，钠离子内流，形成内正外负的动作电位。兴奋部位和非兴奋部位形成电位差，产生局部电流，膜内电流的方向与兴奋传导的方向一致。3、兴奋以电流的形式传导到轴突末梢时，突触小泡释放递质（化学信号），递质作用于突触后膜，引起突触后膜产生膜电位（电信号），从而将兴奋传递到下一个神经元。【详解】A、静息电位是外正内负，细胞膜内K+的外流是神经细胞产生和维持静息电位的主要原因，A错误；B、神经递质是由突触前膜以胞吐的方式释放进入突触间隙，作用于突触后膜上的特异性受体，可引发突触后膜电位变化，B正确；C、神经细胞接受剌激后能产生冲动，并沿着神经纤维向临近部位传导，因此在一次反射过程中一个神经元各部分兴奋不同步，C错误；D、效应器是由传出神经末梢和它控制的肌肉或腺体组成，接受传出神经传来的神经冲动，引起肌肉或腺体活动，D错误；故选B。【点睛】本题考查反射弧的结构、神经冲动的产生及传导，要求考生识记神经冲动的产生过程，掌握神经冲动在神经纤维上的传导过程及神经冲动在神经元之间的传递过程，能运用所学的知识准确判断各选项。6、A【解析】

预实验的目的：可以为进一步的实验摸索条件，也可以检验实验设计的科学性和可行性，以免由于设计不周，盲目开展实验而造成人力、物力、财力的浪费。预实验也必须像正式实验一样认真进行才有意义【详解】A、提取绿叶中的色素时，加入无水乙醇过量会因为色素含量少而导致提取液颜色浅，A正确；B、检测经蛋白酶处理后的样液中底物的有无不可用双缩脲试剂，因为经蛋白酶处理后的产物有多肽，还有加入的胃蛋白酶，即生成物和胃蛋白酶也能和双缩脲试剂发生紫色反应，B错误；C、T2噬菌体侵染大肠杆菌的实验操作是先短暂保温，再充分搅拌、离心，C错误；D、进行预实验的目的是为了减少人力、物力和财力的浪费，D错误。故选A。二、综合题：本大题共4小题7、磷酸二酯键黏性末端和平末端4．4pIJ732上的原有BglⅡ位点被目的基因置换得到的环状pZH28，仍能被BglⅡ切割成一条线段Ca2+缓冲液转化4根据导入pIJ732的链霉菌菌落呈黑色、导入pZHZ8的链霉菌菌落呈白色的特点，通过观察菌落的颜色进行挑选【解析】

该题主要考察了基因工程的相关操作，基因工程的基本操作步骤为目的基因的获取、基因表达载体的构建、将目的基因导入到受体细胞、目的基因的检测与鉴定。限制性核酸内切酶主要作用于识别序列的磷酸二酯键，切割完以后可能会产生黏性末端或者是平末端。将目的基因导入受体细胞时，常常使用Ca2+使得受体细胞成为感受态细胞。【详解】（4）限制性内切核酸酶是作用于其所识别序列中剪切位点的磷酸二酯键，不同的限制酶可以获得不同的末端，主要分为黏性末端和平末端；（2）由题干可知，质粒PIJ732上具有长度为3．4kb的SacⅠ/sphⅠ片段，使用SacⅠ和SphⅠ切取质粒会多置换下3.4kb的片段，而BglⅡ在原质粒和重组质粒上的切割片段相差4.3kb，介于BglⅡ的识别位点位于SacⅠ和SphⅠ之间，所以推测目的基因的片段长度应该为4.3+3.4=4.4kb；在表格中可以反应出重组质粒可以被BglⅡ限制酶切割，切割后称为一条线段，但原有质粒上的相关片段已经被SacⅠ和SphⅠ置换为目的基因，因此推测目的基因中也含有4个BglⅡ切割位点；（3）将目的基因导入到受体细胞之前，需要将受体细胞用Ca2+处理使得受体细胞成为感受态细胞；然后重组质粒要溶解到缓冲液中与感受态细胞融合；从而促进链霉菌完成转化的过程；（4）根据图中的表格可知，要想对重组的链霉菌细胞进行筛选，应该满足不含质粒的链霉菌无法生长的要求，因此所需硫链丝菌素浓度至少应在4μg/mL以上；在该质粒上存在一个mel基因，其表达的产物会使得白色的链霉菌菌落变成黑色菌落，所以导入pIJ732的链霉菌菌落呈黑色，而重组质粒pZHZ8在构建的时候破坏了mel基因，所以该重组质粒导入到链霉菌后菌落呈白色，后通过观察菌落的颜色进行挑选。【点睛】该题的难点在于基因表达载体的建构，由于切割位点及相对应的限制酶较多，所以准确分析目的基因及质粒的长度和结构就对学生有一个综合性的考察。而目的基因的检测与鉴定则需要在理解以上重组质粒的构建过程的基础上分析标记基因的应用情况。8、红眼X、YaaXBYB：aaXbYB=2：1420/51【解析】

题意分析，亲本黑身和黄身个体杂交，F1全为黄身，说明黄身对黑身为显性，结合子二代的性状表现可知控制体色的基因位于常染色体上，结合题目信息（某昆虫（XY型性别决定）的体色和眼色分别由等位基因A（a）和B（b）控制，其中有一对基因位于性染色体上）可知控制眼色的基因位于性染色体上，亲本全为红眼，而后代中出现白眼，说明红眼对白眼为显性，且相关基因位于性染色体上，结合题意中的子一代中的雄性个体全表现为红眼可知B（b）基因位于X、Y的同源区域，则亲本的基因型为：父本基因型：2aaXBYB：1aaXbYB；母本基因型：AAXBXb。【详解】（1）由分析可知，该昆虫的性状表现为，红眼对白眼为显性，且眼色基因[B（b）]位于X、Y染色体上。（2）由中F1雌性红眼：白眼=5：1，可知，亲本中的雄性个体不是一种基因型，父本红眼的基因型为XBYB和XbYB，而且只有满足aaXBYB：aaXbYB=2：1时，子代中的雌性个体才会出现上述的比例。亲本中雌性昆虫的基因型为AAXBXb，为了验证亲本雌昆虫的基因型，需要设计测交实验，用黑身白眼的雄性个体（aaXbYb）与该雌性个体进行杂交，遗传图解如下：（3）由分析可知，亲本中父本基因型：2aaXBYB：1aaXbYB；母本基因型：AAXBXb，F1均为Aa，其中雄性：1AaXBYB：1AaXbYB，雌性：2XBXB：3XBXb：1XbXb；取F1红眼雌雄个体随机交配，则F2中的黄身红眼雌昆虫的基因型为（1AA：2Aa）×（7XBXB：10XBXb），显然有2×2=4种基因型，其中双杂合子的比例是2/3×10/17=20/51。【点睛】熟知伴性遗传和常染色体遗传的特性并能利用该特性进行基因位置的判断是解答本题的关键！学会用分离定律的思路解答自由组合定律的计算问题是解答本题的另一关键！9、内环境消化系统循环胰岛素胰蛋白酶组织水肿过敏反应、长期营养不良、毛细淋巴管堵塞、肾炎B缓冲【解析】

1、体液是由细胞内液和细胞外液组成，细胞内液是指细胞内的液体，而细胞外液即细胞的生存环境，它包括血浆、组织液、淋巴等，也称为内环境。2、内环境稳态是指内环境的理化性质和化学成分保持相对稳定的状态，内环境稳态是机体进行正常生命活动的必要条件；目前普遍认为，神经-体液-免疫调节网络是机体维持稳态的主要调节机制。3、分析题图：题图是胰腺组织局部结构模式图，其中A液为组织液，是组织细胞直接生存的环境；B液为血浆，是血细胞直接生存的环境；C液为淋巴，是淋巴细胞和吞噬细胞直接生存的环境。【详解】（1）A、B、C三者共同构成了细胞生活的液体环境，这个液体环境称为内环境即细胞外液。（2）维持内环境渗透压的Na+和C1-以及葡萄糖、氨基酸等物质进入内环境要经过消化系统、循环系统。（3）饭后半小时，血糖浓度升高，图示血管中血液里胰岛素含量会增多，该胰腺组织能产生胰蛋白酶和胰高血糖素，由于胰蛋白酶属于消化酶，分泌后进入消化道，不进入血液。（4）在一些病理条件下，血浆、组织液和淋巴三者的量都可能发生变化。由于过敏反应、长期营养不良、毛细淋巴管堵塞、肾炎等病理引起组织液增多，其结果是将会引起组织水肿。（5）由于血浆中（图中B）存在着缓冲物质，因此某人喝入大量的食醋后不会引起内环境pH明显下降。【点睛】本题结合胰腺组织局部结构模式图，考查内环境的知识，考生识记内环境的组成，明确血浆、组织液、淋巴之间的关系，掌握内环境稳态的调节机制是解题的关键。10、有机溶剂非挥发性乙酸乙酯萃取胡萝卜素的有机溶剂应不与水混溶，而乙醇为水溶性有机溶剂液泡作为花青素的提取液（溶解提取花青素）金属离子要对人无害（或有益）探究水浴温度和某金属离子添加浓度对花青素提取率的影响【解析】

提取植物中的有效成分的基本方法有三种：蒸馏、压榨法和萃取。蒸馏是利用水蒸气将挥发性较强的芳香油携带出来，适用于提取挥发性强的芳香油；压榨法，是通过机械加压，压榨出果皮中的芳香油，适用于易焦糊原料的提取；萃取适用范围广，要求原料的颗粒要尽可能细小，能充分浸泡在有机溶液中，不同的原料应用不同的方法来提取。【详解】（1）胡萝卜素是橘黄色结晶，化学性质比较稳定，易溶于有机溶剂，是非挥发性的物质。（2）萃取胡萝卜素的有机溶剂应不与水混溶，而乙醇为水溶性有机溶剂，故应选用乙酸乙酯作为胡萝卜素的萃取剂。（3）决定花瓣和果实颜色的花青素存在于液泡中。（4）①色素溶于有机溶剂中，75%的酒精的作用是溶解提取花青素，花青素的提取，需加75%酒精、金属离子研磨，从食品安全角度考虑，则对酒精和金属离子的要求分别是酒精要是食用酒精、金属离子要对人无害或有益。②兴趣小组分别对水浴温度、某金属离子的添加浓度进行了探究实验。可见该实验的目的是：探究水浴温度和某金属离子添加浓度对花青素提取率的影响。【点睛】本题考查的是色素的提取相关知识，意在考查学生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，能运用所学知识与观点，通过比较、分析与综合等方法对某些生物学问题进行解释、推理，做出合理的判断或得出正确结论的能力。11、限制酶和DNA连接CaCl2基因突变引物A引物B引物C引物DPCR1√√××PCR2××√√PCR3××××PCR4√××√含有蛋白A基因的重组质粒、空质粒（pET质粒）抗原-抗体杂交抑菌圈对人、畜、农作物和自然环境安全；不会造成基因污染；有效成分纯度较高【解析】

（一）基因工程的基本工具1、“分子手术刀”——限制性核酸内切酶（限制酶）（1）来源：主要是从原核生物中分离纯化出来的。（2）功能：能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，因此具有专一性。（3）结果：经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式：黏性末端和平末端。2、“分子缝合针”——DNA连接酶（1）两种DNA连接酶（E•coliDNA连接酶和T4DNA连接酶）的比较：①相同点：都缝合磷酸二酯键。②区别：E•coliDNA连接酶来源于大肠杆菌，只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间的磷酸二酯键连接起来；而T4DNA连接酶来源于T4噬菌体，可用于连接粘性末端和平末端，但连接效率较低。（2）与DNA聚合酶作用的异同：DNA聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯键．DNA连接酶是连接两个DNA片段的末端，形成磷酸二酯键。3、“分子运输车”——载体（1）载体具备的条件：①能在受体细胞中复制并稳定保存。②具有一至多个限制酶切点，供外源DNA片段插入。③具有标记基因，供重组DNA的鉴定和选择。（2）最常用的载体是质粒，它是一种裸露的、结构简单的、独立于细菌拟核DNA之外，并具有自我复制能力的双链环状DNA分子。（3）其它载体：噬菌体的衍生物、动植物病毒。（二）基因工程的基本操作程序第一步：目的基因的获取1、目的基因是指：编码蛋白质的结构基因。2、原核基因采取直接分离获得，真核基因是人工合成．人工合成目的基因的常用方法有反转录法和化学合成法。3、PCR技术扩增目的基因（1）原理：DNA双链复制（2）过程：第一步：加热至90～95℃DNA解链；第二步：冷却到55～60℃，引物结合到互补DNA链；第三步：加热至70～75℃，热稳定DNA聚合酶从引物起始互补链的合成。第二步：基因表达载体的构建1、目的：使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传至下一代，使目的基因能够表达和发挥作用。2、组成：目的基因+启动子+终止子+标记基因（1）启动子：是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的首端，是RNA聚合酶识别和结合的部位，能驱动基因转录出mRNA，最终获得所需的蛋白质。（2）终止子：也是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的尾端。（3）标记基因的作用：是为了鉴定受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来．常用的标记基因是抗生素抗性基因。第三步：将目的基因导入受体细胞1、转化的概念：是目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程。2、常用的转化方法：将目的基因导入植物细胞：采用最多的方法