血涂片复检规则及应用

关于血涂片复检规则及应用03.08.2024德阳市医院检验科2全血细胞分析检测标本接收及拒收标本前处理血细胞分析仪检测操作外周血涂片及染色显微镜镜检第2页,共65页，星期六，2024年，5月03.08.2024德阳市医院检验科3血细胞发育成熟过程细胞内容物复杂度、细胞核密度增加细胞内DNA/RNA量减少巨核细胞系第3页,共65页，星期六，2024年，5月03.08.2024德阳市医院检验科4细胞形态学镜检是判断血细胞形态病理变化的金标准质量高的“镜检”包括观察炎症引起的白细胞毒性变化；白血病细胞病理变化；贫血红细胞形态变化；血小板形态特点，以及血液内寄生虫检查。血细胞分析仪不可取代！理想的血液检查：仪器计数细胞；镜检观察形态。镜检费人费时，必须制定筛选标准。第4页,共65页，星期六，2024年，5月03.08.2024德阳市医院检验科5分析仪白细胞分类结果可为镜检提供筛选手段,提高镜检效率,保证医疗质量镜检是细胞形态分析的最终手段具有特异诊断意义的形态变化必须镜检

第5页,共65页，星期六，2024年，5月03.08.2024德阳市医院检验科6三分类血球计数仪的血常规

复检标准中华医学会检验分会《三分群血细胞分析仪应用指南》：仪器结果只有同时出现WBC、HGB、PLT及3个直方图均正常且仪器无报警才可向临床报告“分群”结果而不需要镜检。白细胞三分群的结果只适合在正常血象。第6页,共65页，星期六，2024年，5月03.08.2024德阳市医院检验科7应用五分类血细胞分析仪的复检规则2005年，“国际血液学复检协作组”提出41条规则。15个实验室，使用CD-4000、LH-750、XE-2100、ADVIA-120，对13298份样品检测并同时进行镜检。整理验证得出41条规则如此高档仪器在常规检查中需涂片复查的样本仍有20-25%之多。第7页,共65页，星期六，2024年，5月03.08.2024德阳市医院检验科8ISLH复检专家组的41条复检规则关于血细胞计数—15条规则关于白细胞分类参数—7条规则关于网织红细胞—1条规则关于可疑报警—18条规则第8页,共65页，星期六，2024年，5月03.08.2024德阳市医院检验科9ISLH推荐的41条复检规则（1）①新生儿：首次检测标本；涂片镜检。②WBC、RBC、Hb、PLT、Reti：超出线性范围；稀释标本后重新测定。③WBC、PLT：低于实验室确认的仪器线性范围；按SOP文件进行。④WBC、RBC、Hb、PLT：无结果；①检查标本是否有凝块，②重测标本，③如果维持不变，用替代方法计数。

第9页,共65页，星期六，2024年，5月03.08.2024德阳市医院检验科10ISLH推荐的41条复检规则（2）⑤WBC：首次结果<4.0×109/L或>30.0×109/L；涂片镜检。⑥WBC：3天内Delta值超限，并<4.0×109/L或>30.0×109/L；涂片镜检。⑦PLT：首次结果<100×109/L或>1000×109/L；涂片镜检(计数)。⑧PLT：Delta值超限的任何结果；涂片镜检(计数)。

第10页,共65页，星期六，2024年，5月03.08.2024德阳市医院检验科11ISLH推荐的41条复检规则（3）⑨Hb：首次结果<70g/L或>其年龄和性别参考范围上限20g/L；①涂片镜检，②确认标本是否符合要求。

⑩MCV：24h内标本的首次结果<75fl或>105fl（成人）；涂片镜检。⑾MCV：24h以上的成人标本>105fl；①涂片镜检观察大红细胞相关变化，②如无大红细胞相关变化，要求重送新鲜血标本，③如无新鲜血标本，报告中注明。第11页,共65页，星期六，2024年，5月03.08.2024德阳市医院检验科12ISLH推荐的41条复检规则（4）⑿MCV：24h内标本的Delta值超限的任何结果；：确认标本是否符合要求。⒀MCHC：≥参考范围上限20g/L；检查标本是否有脂血、溶血、RBC凝集及球形红细胞。⒁MCHC：<300g/L，同时，MCV正常或增高；寻找可能因静脉输液污染或其他标本原因⒂RDW：首次结果>22%；涂片镜检。第12页,共65页，星期六，2024年，5月03.08.2024德阳市医院检验科13ISLH推荐的41条复检规则（5）⒃无DC结果或DC结果不全：无条件复检；人工分类和涂片镜检。

⒄Neut＃：首次结果<1.0×109/L或>20.0×109/L；涂片镜检。

⒅Lym＃：首次结果>5.0×109/L（成人）或>7.0×109/L（<12岁）；涂片镜检。

⒆Mono＃：首次结果>1.5×109/L（成人）或>3.0×109/L（<12岁）；涂片镜检。

第13页,共65页，星期六，2024年，5月03.08.2024德阳市医院检验科14ISLH推荐的41条复检规则（6）(20)Eos＃：首次结果>2.0×109/L；涂片镜检。(21)Baso＃：首次结果>0.5×109/L；涂片镜检。(22)NRBC＃：首次出现任何结果；涂片镜检。(23)Ret＃：首次结果>0.10×109/L；涂片镜检。

第14页,共65页，星期六，2024年，5月03.08.2024德阳市医院检验科15ISLH推荐的41条复检规则（7）24.怀疑性报警[不成熟粒细胞(IG)/杆状核中性粒细胞（Band）报警提示除外]：首次成人结果出现阳性报警；涂片镜检。25.怀疑性报警：首次儿童结果出现阳性报警；涂片镜检。26.WBC结果不可信报警：阳性报警；①确认标本是否符合要求并重测标本，②如出现同样报警提示，检查仪器，③如需要，进行人工分类。第15页,共65页，星期六，2024年，5月03.08.2024德阳市医院检验科16ISLH推荐的41条复检规则（8）27.RBC碎片：阳性报警；涂片镜检。28.双形RBC：首次结果出现阳性报警；涂片镜检。29.难溶性RBC：阳性报警；①检查WBC直方/散点图，②根据实验室SOP证实Ret计数是否正确，③涂片镜检是否有异常形态的红细胞。30.PLT聚集报警：任何计数结果；①检查标本是否有凝块，②涂片镜检估计PLT数，③如PLT仍聚集，按实验室SOP进行。31.PLT报警：除PLT聚集外的PLT和MPV报警；涂片镜检。第16页,共65页，星期六，2024年，5月03.08.2024德阳市医院检验科17ISLH推荐的41条复检规则（9）32.IG报警：首次结果出现阳性报警；涂片镜检。33.IG报警：WBC的Detal值超上限，有以前确认的阳性报警结果；涂片镜检。34.左移报警：阳性报警；按实验室SOP进行。35.不典型和（或）变异Lym：首次结果出现阳性报警；涂片镜检。36.不典型和（或）变异Lym：WBC的Detal值超上限，有以前确认的阳性报警结果；涂片镜检。37.原始细胞报警：首次结果出现阳性报警；涂片镜检。第17页,共65页，星期六，2024年，5月03.08.2024德阳市医院检验科18ISLH推荐的41条复检规则（10）38.原始细胞报警：3～7天内WBC的Detal值通过，有以前确认的阳性报警结果；按实验室SOP进行。39.原始细胞报警：WBC的Detal值超上限，有以前确认的阳性报警结果；涂片镜检。40.NRBC报警：阳性报警；①涂片镜检，②如发现NRBC，计数NRBC，重新计算WBC结果。41.Ret：散点/直方图异常；①检查仪器状态是否正常，②如吸样有问题，重测标本，③如结果维持不变，涂片镜检。第18页,共65页，星期六，2024年，5月03.08.2024德阳市医院检验科19国内的筛选标准2007年，中华医学会检验分会成立“五分类血细胞分析仪复检标准制定协作组”，拟制定复检标准规则。国内朱忠勇等提出7条复检规则目前国内五分类血细胞分析仪没有统一的复检规则标准，41条是较为公认的规则。第19页,共65页，星期六，2024年，5月03.08.2024德阳市医院检验科20朱忠勇教授提出的7条复检规则①仪器出现血细胞计数、分类计数及相关指数的提示信号（flags）②直方图或散点图出现异常③仪器检测结果各参数之间出现矛盾④仪器检测结果与临床表现和初诊、拟诊明显不符⑤临床初诊或提示有白血病等血液病⑥临床医生指定要镜检，如重度感染病人，要求查中性粒细胞左移程度和毒性改变，不典型淋巴细胞，找寄生虫等。⑦新生儿的血样第20页,共65页，星期六，2024年，5月03.08.2024德阳市医院检验科21目前我科还未制定适合于本室的复检规则过程复杂：复检规则的制定→应用显微镜镜检对复检规则进行评估→复检规则的验证（重复）。制定复检规则的必要性。第21页,共65页，星期六，2024年，5月03.08.2024德阳市医院检验科22血涂片复检的必要性（1）实验室认可的要求ISO15189：血液学检查部门应制定如下标准/程序并形成文件1血细胞分析的显微镜复检标准（检测结果出现异常计数，警示标志，异常散点图等情况时结果的确认方法和程序）2血涂片制备和检验的书面程序/过程3对患者血液检查和凝固试验的标本进行重复检验的标准及程序CAP认可：HEM34200实验室要建立标准以确保当分类计数仪标记出临床异常结果时，必须对白细胞分类数据、直方图、和/或血涂片进行检查和复检。HEM34350所有的血涂片必须有唯一的标识号，如病人的序列号，姓名等。HEM34450所有的血涂片至少保存一周，以便复查或参考。第22页,共65页，星期六，2024年，5月03.08.2024德阳市医院检验科23血涂片复检的必要性（2）1过分依赖仪器，弱化人的能力及责任。2无或较少进行显微镜下形态学检查。3无或较少进行手工白细胞分类检查。4漏诊：白血病、传单、寄生虫感染等。5误诊：贫血、血小板减少性紫癜、白血病6丢失部分重要病理改变的信息。第23页,共65页，星期六，2024年，5月03.08.2024德阳市医院检验科24复检规则制定的原则1根据仪器对细胞形态识别能力，决定筛选标准的宽严程度。识别越差，标准越严。2筛选范围要涵盖所有人工镜检范围。3在保证筛选质量基础上，尽量使复检率低。4假阴性率是关键参数，具有诊断意义的重要参数不能出现假阴性。其它参数假阴性率也要尽可能最低。5在低假阴性率前提下,调整标准降低假阳性率第24页,共65页，星期六，2024年，5月03.08.2024德阳市医院检验科25复检规则制定的原则6白血病患者(不管初诊还是复诊)不能筛选。7临床医生提出阅片者,必须镜检。8筛选标准涉及的参数,应用的仪器能够提供。9不同型号仪器筛选标准不同，同一型号仪器实验室要求不同，标准也不同。第25页,共65页，星期六，2024年，5月03.08.2024德阳市医院检验科26XE-2100复检规则2008（1）①WBC：<3.0×109/L或>30.0×109/L；涂片镜检。②PLT：<80×109/L或>1000×109/L；涂片镜检。③Hb：<70g/L或>180g/L；涂片镜检。④MCV：<75fL或>105fL；涂片镜检。⑤MCHC：>380g/L；涂片镜检有无球形红细胞。⑥RDW：首次结果>22%；涂片镜检。⑦DC：无结果或结果不全；涂片镜检和人工分类。第26页,共65页，星期六，2024年，5月03.08.2024德阳市医院检验科27XE-2100复检规则2008（2）⑧Neut＃：<1.0×109/L或>20.0×109/L；涂片镜检。

⑨Lym＃：>5.0×109/L；涂片镜检。

⑩Mono＃：>1.5×109/L；涂片镜检。

⑾Eos＃：>2.0×109/L；涂片镜检。⑿Baso＃：>0.5×109/L；涂片镜检。第27页,共65页，星期六，2024年，5月03.08.2024德阳市医院检验科28XE-2100复检规则2008（3）⒀WBCIPMessage：白细胞异常散点图；涂片镜检。⒁WBCIPMessage：未成熟粒细胞；涂片镜检。⒂WBCIPMessage：核左移；涂片镜检。⒃WBCIPMessage：异形淋巴细胞或原始细胞；涂片镜检。⒄WBCIPMessage：原始细胞；涂片镜检。第28页,共65页，星期六，2024年，5月03.08.2024德阳市医院检验科29XE-2100复检规则2008（4）⒅WBCIPMessage：有核红细胞；涂片镜检。⒆CBC+DC：新生儿标本；涂片镜检。⒇CBC+DC：血液病标本；涂片镜检。第29页,共65页，星期六，2024年，5月03.08.2024德阳市医院检验科30复检内容，内涵丰富标本的复查人工对仪器报告的审核涂片镜检人工分类标本的确认和鉴定仪器运行状态的检查复检≠人工分类第30页,共65页，星期六，2024年，5月03.08.2024德阳市医院检验科31复检内容—细胞数量的验证白细胞数量血小板数量在细胞分布适中部位浏览血片，根据其与红细胞的比例估计白细胞数、血小板数。Ex:正常情况下，每10-40个红细胞会见到1个血小板。第31页,共65页，星期六，2024年，5月03.08.2024德阳市医院检验科32复检内容—白细胞分类计数和形态观察白细胞分类计数粒细胞核象：核左移，核右移中毒性改变：中毒性颗粒、空泡变性、核固缩、核溶解。原幼细胞异形淋巴细胞其他第32页,共65页，星期六，2024年，5月03.08.2024德阳市医院检验科33异形淋巴细胞？第33页,共65页，星期六，2024年，5月03.08.2024德阳市医院检验科34异形淋巴细胞第34页,共65页，星期六，2024年，5月03.08.2024德阳市医院检验科35嗜酸性粒细胞（成熟）第35页,共65页，星期六，2024年，5月03.08.2024德阳市医院检验科36嗜碱性粒细胞（成熟）第36页,共65页，星期六，2024年，5月03.08.2024德阳市医院检验科37单核细胞第37页,共65页，星期六，2024年，5月03.08.2024德阳市医院检验科38中毒颗粒第38页,共65页，星期六，2024年，5月03.08.2024德阳市医院检验科39MonocytosisImmatureGran?LeftShift?DIFF:单核散点较多。中性上方幼稚细胞区域出现少量散点IMI:幼稚细胞区域出现相应的散点IG%：仪器：3.5%镜检：中幼粒0.5%晚幼粒3.5%单核：仪器：18.7%镜检：17.5%第39页,共65页，星期六，2024年，5月40AbnLympho/L-Blasts?镜下见到分叶的异常淋巴细胞达15%DIFF散点图上，正常淋巴和单核的区域有较多的散点第40页,共65页，星期六，2024年，5月03.08.2024德阳市医院检验科41Acutemyeloidleukemia(AML)-M1DIFF:白细胞分化不良IMI:显示大量原始细胞镜检:77.5%的原始细胞第41页,共65页，星期六，2024年，5月03.08.2024德阳市医院检验科42Acutelymphocyticleukemia(ALL)-L1DIFF:淋巴至OTHER区域出现大量灰白色散点，中性粒细胞上方有少量散点IMI:幼稚细胞和原始细胞区域也出现少量红色散点，因此仪器提示原始细胞和幼稚粒细胞。镜检:93%原始细胞。第42页,共65页，星期六，2024年，5月03.08.2024德阳市医院检验科43复检内容—红细胞形态观察大小形状血红蛋白含量细胞内包涵体红细胞异形性第43页,共65页，星期六，2024年，5月03.08.2024德阳市医院检验科44正常红细胞第44页,共65页，星期六，2024年，5月03.08.2024德阳市医院检验科45靶形红细胞第45页,共65页，星期六，2024年，5月03.08.2024德阳市医院检验科46椭圆形红细胞第46页,共65页，星期六，2024年，5月03.08.2024德阳市医院检验科47缗钱状红细胞第47页,共65页，星期六，2024年，5月03.08.2024德阳市医院检验科48豪-周氏小体（Howell-Jollybody）第48页,共65页，星期六，2024年，5月03.08.2024德阳市医院检验科49嗜碱性点彩红细胞第49页,共65页，星期六，2024年，5月03.08.2024德阳市医院检验科50Hypochromia/Anemia/IronDeficiency?/Fragments?

/PLTAbnDistributionRET：大量红细胞碎片血小板直方图异常，阻抗法将部分红细胞碎片当成血小板计数，而核酸荧光染色法排除了红细胞碎片：PLT-I>PLT-O，PLT-O与镜检结果接近，仪器以PLT-O作为最终报告第50页,共65页，星期六，2024年，5月03.08.2024德阳市医院检验科51复检内容—血小板形态观察大小血小板聚集血小板数量评估第51页,共65页，星期六，2024年，5月03.08.2024德阳市医院检验科52大血小板第52页,共65页，星期六，2024年，5月03.08.2024德阳市医院检验科53复检内容—其他病理成分寄生虫真菌第53页,共65页，星期六，2024年，5月03.08.2024德阳市医院检验科54真菌第54页,共65页，星期六，2024年，5月03.08.2024德阳市医院检验科55疟原虫(左：环状体右：裂殖体)第55页,共65页，星期六，2024年，5月03.08.2024德阳市医院检验科56锥虫第56页,共65页，星期六，2024年，5月03.08.2024德阳市医院检验科57血涂片复检的报告方式描述性报告异常病理成分的分级报告定量报告确认仪器分类结果报告手工分类结果第57页,共65页，星期六，2024年，5月03.08.2024德阳市医院检验科58血细胞分析仪新功能介绍网织红细胞计数和分析：XE-2100/SE-9500、LH750/STKS、CD3200/4000、ADVIA-120、Pentral120幼稚细胞和有核红细胞分析：XE-2100、LH750、CD3700/4000、ADVIA-120红细胞体积和细胞内血红蛋白的分析：ADVIA-120淋巴细胞亚群测定：CD4000、GEN‘S动物血细胞分析：CD3700、ADVIA-2120同时分析血浆成分（CRP）：MicrosCRP第58页,共65页，星期六，2024年，5月03.08.2024德阳市医院检验科59血细胞分析新参数介绍IPF或RP（网织血小板）IG（幼稚粒细胞）NRBC（有核红细胞）第59页,共65页，星期六，2024年，5月03.08.2024德阳市医院检验科60网织血小板的定量检测

(ImmaturePlateletFraction)可报告参数:IPF